孙健
- 作品数：17 被引量：45H指数：4
- 供职机构：中国科学院沈阳应用生态研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 一种固定化磷细菌肥料及其制备方法
- 本发明涉及微生物技术，具体的说是一种固定化磷细菌肥料及其制备方法。将聚乙烯醇和海藻酸钠加入到水中混合，使混合溶液中聚乙烯醇终浓度为60-90g/L，海藻酸钠终浓度为10-30g/L；将磷细菌发酵培养至菌数为2-5×10<...
- 张惠文李旭苏振成徐明恺王秀娟孙健张成刚
- 文献传递
- 增强型金黄色葡萄球菌肠毒素C2突变体及其超抗原活性被引量：5
- 2013年
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C2(Staphylococcal enterotoxin C2,SEC2)作为一种超级抗原蛋白,极微量即可有效激活机体免疫系统,这一特性可应用于对肿瘤和感染性疾病的辅助治疗。为了增强SEC2的超抗原活性,应用over-lap PCR方法将SEC2中的102～106位GKVTG氨基酸残基分别突变为WWH、WWT和WWP,获得3种突变体ST-1、ST-2和ST-3。三种突变体刺激小鼠淋巴细胞增殖活性和肿瘤细胞生长抑制活性与野生型SEC2相比均有显著提高。ST-1和ST-3的致热活性与野生型SEC2相当,而ST-2的致热活性明显高于野生型SEC2。此外,三种突变体体外刺激淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平也显著提高,这可能是导致突变体具有较高肿瘤细胞生长抑制活性的原因。进一步实验发现,三种突变体刺激下,小鼠脾淋巴细胞mVβ8.2基因的转录水平较野生型SEC2显著增加,暗示突变体对TCR mVβ8.2分子亲和力的提高,可能是其超抗原活性增强的主要原因。
- 张国俊徐明恺孙健李洪义杨宏丽张惠文张成刚
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素C2CELL
- 臭氧浓度升高对不同品种小麦根际细菌种群的影响被引量：1
- 2014年
- 利用臭氧FACE(Free-Air Ozone Concentration Enrichment)实验平台,研究4个小麦品种"扬麦15"、"扬麦16"、"扬幅麦2号"、"烟农19"根际细菌在拔节期和成熟期对臭氧浓度升高的响应;采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)和荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)方法,分别对细菌种群结构和数量进行了测定。结果表明:臭氧浓度升高仅显著降低了拔节期"扬幅麦2号"小麦品种根际细菌数量,对成熟期各品种小麦根际细菌数量影响不显著;多样性指数和主成分分析表明,"扬麦15"和"扬幅麦2号"根际细菌多样性和种群结构分别在拔节期和成熟期发生明显变化;臭氧对"扬幅麦2号"品种根际细菌种群的影响较持久,可能会产生累积效应。
- 晏培王秀娟孙健宋宇张惠文李新宇
- 关键词：小麦品种荧光定量PCR
- 保护性耕作对土壤光合细菌和Ⅱ型甲烷氧化菌的影响被引量：3
- 2012年
- 保护性耕作对土壤微生物具有明显的保护效应,但是其对土壤光合细菌和甲烷氧化菌的影响却鲜有报道。本文采用土壤宏基因组16SrDNA变性梯度凝胶电泳(DGGE)和荧光定量PCR技术比较了不同耕作模式(免耕和传统翻耕)和不同秸秆覆盖量(0、50%、100%)对潮土中光合细菌和Ⅱ型甲烷氧化菌数量和群落结构的影响。结果表明:免耕土壤中光合细菌的多样性(多样性指数H=2.47)显著高于传统翻耕土壤(多样性指数H=2.35),且与土壤总氮呈显著正相关,数量略低于传统翻耕土壤;光合细菌的数量和多样性虽均随着秸秆覆盖量的增加而有所增加,但不显著;虽然免耕和秸秆覆盖对Ⅱ型甲烷氧化菌数量和多样性产生了有益的影响,但是耕作模式、秸秆覆盖及二者互作对其影响均不显著;不同处理中光合细菌和Ⅱ型甲烷氧化菌的种群结构无明显变化,光合细菌优势种群以根瘤菌目(Rhizobiales)和鞘脂单胞菌目(Sphingomonadales)为主,Ⅱ型甲烷氧化菌优势种群主要为甲基孢囊菌科(Methyloc ystaceae)的细菌类群。
- 王敬敬李新宇徐明恺苏振成李旭孙健张惠文
- 关键词：免耕秸秆覆盖DGGE
- 一种芽孢杆菌的发酵培养方法
- 本发明属于微生物制备技术领域，具体的说是一种芽孢杆菌的发酵培养方法。具体为，将菌种在培养基中于30-37℃下活化培养24-48小时，待长出单菌落后，转接至固体斜面培养基上，培养得到菌体，待用；将活化后的菌株制成菌悬液，而...
- 张惠文李旭孙健苏振成李新宇
- 文献传递
- Zn^2＋及其谷氨酸结合位点突变对金黄色葡萄球菌肠毒素 C2超抗原活性的影响
- 2014年
- 目的：研究金黄色葡萄球菌（金葡菌）肠毒素C2（SEC2）中与Zn^2＋结合相关的谷氨酸残基突变及Zn^2＋自身对其超抗原活性的影响。方法应用定点突变技术将SEC2中与Zn^2＋结合相关的谷氨酸残基突变成丙氨酸残基，分离纯化后获得突变蛋白rSEC2（E71A）、rSEC2（E80A）及rSEC2（E71A/E80A）；突变蛋白的超抗原活性及Zn^2＋对SEC2超抗原活性的影响通过MTT法检测其刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖来验证，而结构稳定性通过对胃蛋白酶及胰蛋白酶的抵抗能力来检测。结果蛋白酶酶切结果与脾淋巴细胞增殖实验结果表明参与第2个Zn^2＋结合的71位及80位谷氨酸残基突变对SEC2的酶解稳定性及超抗原活性没有显著影响；但微量Zn^2＋（10μmol/L）却能显著增强rSEC2的超抗原活性，并且在EDTA存在下，仅有Zn^2＋在一定浓度下才可完全恢复其超抗原活性。结论SEC2分子中的Zn^2＋结合位点的突变对其自身结构稳定性和超抗原活性无显著影响，但SEC2超抗原活性发挥过程中Zn^2＋可能通过其他途径间接影响其超抗原活性。
- 刘彦礼牛荣成徐明恺李旭孙健张惠文
- 关键词：ZN^2+金黄色葡萄球菌肠毒素C2超抗原
- 半自动微胶囊成型装置
- 本发明涉及一种半自动微胶囊成型装置，属于生物制药及微生态制剂制造技术领域。本发明的装置由调控装置支配的电机，运转时电机使皮带带动转盘旋动，单螺杆随之上升或下降，将带有针头的注射器插入焊接在支撑板上的注射器套中，推进板焊接...
- 苏振成谢跃武王硕孙健王秀娟赵继阳张惠文
- 文献传递
- 嗜酸乳杆菌微胶囊制剂工艺初步研究被引量：4
- 2013年
- 为了提高嗜酸乳杆菌对环境的耐受性,本研究采用挤压法对其进行微胶囊包埋,并通过冷冻干燥法制成微生态制剂。通过正交实验得到最佳微胶囊化工艺参数,当脱脂奶粉浓度为4%(w/v),谷氨酸钠浓度为1.5%,海藻酸钠浓度为3%,氯化钙浓度1.62%至2%时,嗜酸乳杆菌存活率达99.21%,活菌数可达8.9×1011cfu/g,制剂具有较好的耐酸性与肠溶性,且稳定性良好。
- 谢跃武苏振成王硕孙健马福海毛大庆张惠文
- 关键词：挤压法嗜酸乳杆菌
- 一种微生物菌剂及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物农药技术领域，具体的说是一种微生物菌剂及其制备方法和应用。菌剂包括灰色链霉菌（<I>Streptomycesgriseus</I>）和枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）；所述灰色链霉菌（<I>...
- 张惠文李旭苏振成王秀娟孙健张成刚
- 文献传递
- 大豆根腐病生防菌KJB04-11的鉴定及其产生的脂肽类抗生素被引量：15
- 2012年
- 从大豆根围筛选到1株对尖孢镰刀菌和立枯丝核菌都具有很好拮抗作用的菌株KJB04-11,经形态观察、生理生化特征和16SrDNA序列分析,属于枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。具有抗菌活性的KJB04-11发酵液无菌滤液对热和酸碱具有较强的稳定性。采用SephadexG-25柱层析、反相HPLC和冷冻干燥从KJB04-11发酵液中分离纯化了抗菌活性成分。由红外光谱、MALDI-TOF-MS、氨基酸组成及脂肽合成酶基因扩增结果推测该菌株产生的抗菌物质为C16、C17的mycosubtilin和C15的surfactin。田间试验表明,大豆种子经KJB04-11发酵液包衣处理对大豆根腐病防效为53.6%,大豆产量提高12.5%。
- 李旭马福海王秀娟孙健张惠文
- 关键词：枯草芽孢杆菌脂肽生物防治大豆
