姚克群
- 作品数：6 被引量：32H指数：3
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- 钙离子ATP酶2a基因修饰骨髓间充质干细胞移植改善慢性心力衰竭大鼠的心功能(英文)
- 2008年
- 背景:目前仍缺乏有效手段修复心力衰竭后受损心肌,逆转心肌病理性重塑。作为一种新的治疗策略,用正常肌细胞和治疗性基因干预受损心肌正逐渐显示出其在改善心功能方面的优势。目的:观察腺病毒转染不同代骨髓间充质干细胞的有效性和稳定性。并以携带肌浆网钙离子ATP酶(sarcoplasmicreticulumCa(2+)ATPase,SERCA2a)基因的腺病毒转染骨髓间充质干细胞,治疗心力衰竭大鼠,比较SERCA2a基因治疗,骨髓间充质干细胞移植以及骨髓干细胞基础的SERCA2a基因治疗慢性心力衰竭大鼠的效果。设计:随机对照实验。单位:解放军总医院老年心血管病科和北京医科大学生物化学系。材料:选取购于北京医科大学动物实验中心的4周龄雄性SD大鼠作为骨髓供体。选取体质量200~250g雌性成年SD大鼠作为细胞移植和基因治疗受体。以雄性大鼠Y染色体sry基因鉴定供体移植细胞是否在雌性大鼠受体心肌内存活。实验所用Ad-SERCa2a,Ad-EGFP的构建由我科鲁小春博士完成;第3和8代骨髓间充质干细胞自行分离培养。方法:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系周春燕实验室完成。对30只雌性SD大鼠进行左冠状动脉结扎,制作急性心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠模型。将造模成功的29只大鼠随机分为4组:基因治疗组7只,干细胞移植治疗组7只,基因修饰的干细胞移植组8只,腺病毒空载体对照组7只,分别予以单纯SERCA2a基因、MSC移植、SERCA2a基因修饰的骨髓间充质干细胞移植及腺病毒空载体干预。分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,用携带SERCA2a及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-SERCA2a-GFP)转染第3和8代骨髓间充质干细胞。主要观察指标:采用流式细胞仪检测不同代骨髓间充质干细胞的Ad-SERCA2a-GFP转染率。分别在治疗前及治疗后14,21d采用超声心动图检测大鼠心功能。采用免疫组化法检测大鼠心脏Ⅷ因子表达;采用
- 郭豫涛李小鹰鲁小春吴迪姚克群陈平马康涛周春燕
- 关键词：细胞移植干细胞
- 接受骨髓间充质干细胞移植的心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠心肌组织基质金属蛋白酶及抑制剂的变化被引量：1
- 2008年
- 背景：Ⅰ型及Ⅲ型胶原含量与比例的变化是促使心脏几何形态改变、心肌收缩和舒展功能的重要因素，基质金属蛋白酶2及抑制剂是胶原代谢的主要调节物质。心肌梗死后心力衰竭大鼠接受骨髓干细胞移植后，心肌组织中这些指标会发生哪些变化？目的：观察接受骨髓干细胞移植治疗的心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠，心肌组织中胶原含量与比例、基质金属蛋白酶2及抑制剂的变化。设计：随机对照实验。单位：解放军总医院老年心血管病科和北京医科大学生物化学系。材料：实验于2004—07／2005—12在北京医科大学生物化学系周春燕实验室完成。实验动物由北京医科大学动物实验中心提供，选取4周龄清洁级雄性SD大鼠用于骨髓间充质干细胞的制备，200～250g清洁级雌性SD大鼠14只用于心肌梗死后心力衰竭模型的制备，实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。方法：采用梯度离心法与贴壁培养法分离纯化、扩增骨髓间充质干细胞。结扎雌性SD大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死后心力衰竭模型。造模成功4周后将14只大鼠随机分为2组：移植组大鼠梗死后心肌瘢痕区接受雄性SD大鼠来源的5×10^6骨髓间充质干细胞。对照组大鼠梗死后心肌瘢痕区接受等体积磷酸盐缓冲液。每组7只。主要观察指标：移植治疗后21d：①以苏木精-伊红染色和Masson染色评价左心室形态。②以免疫组织化学分析心肌基质金属蛋白酶2及抑制剂与瘢痕区Ⅰ型及Ⅲ型胶原的变化。③以Western杂交检测基质金属蛋白酶2及抑制剂蛋白的变化。结果：14只大鼠均进入结果分析，无脱失值。与对照组大鼠比较，骨髓间充质干细胞移植大鼠心肌梗死瘢痕区Ⅰ型胶原增加，Ⅲ型皎原降低，心肌组织基质金属蛋白酶抑制剂表达增加，基质金属蛋白酶2表达降低，心室壁增厚，心室腔缩小，�
- 郭豫涛李小鹰吴迪姚克群陈平马康涛周春燕
- 关键词：骨髓间充质干细胞基质金属蛋白酶2基质金属蛋白酶抑制剂心肌梗死细胞移植心室重构
- 钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗大鼠心肌梗死后心力衰竭的研究被引量：5
- 2006年
- 目的比较肌浆网钙离子ATP酶2 a(SERCA2 a)基因治疗,骨髓干细胞(MSC)移植以及SERCA2 a基因修饰的细胞移植治疗慢性缺血性心力衰竭的效应,评价MSC作为治疗基因的细胞载体策略的可行性。方法制作心力衰竭大鼠模型并随机分为4组。SERCA2 a基因治疗组(组Ⅰ,7只),MSC细胞移植组(组Ⅱ,7只),基因修饰的细胞移植组(组Ⅲ,8只),腺病毒空载体对照组(组Ⅳ,7只)。检测各组SERCA2 a基因,蛋白表达及活性。超声心动图及有创血流动力学评价心脏功能。HE染色观察心室形态。结果组Ⅰ,组Ⅱ,组Ⅲ比对照组Ⅳ心功能和血流动力学明显改善。治疗后组Ⅱ(2.9 mm±0.2 mm)和组Ⅲ(3.0 mm±0.1 mm)大鼠室壁厚度增加,心室腔减小。治疗后14d组Ⅰ,组Ⅱ与组Ⅲ射血分数(EF)为26.6%±3.9%,20.6%±5.0%,25.6%±2.7%。短轴缩短率(FS)分别为13.3%±2.0%,10.1%±2.5%,12.1%±1.0%(P<0.05)。治疗后21 d组Ⅰ,组Ⅱ与组ⅢEF分别为19.7%±5.0%,21.4%±5.2%,26.6%±4.1%,FS分别为9.7%±2.5%,10.7%±2.6%,12.8%±2.2%(P<0.05)。组Ⅳ治疗后14 d EF无变化,治疗后21 d EF下降了6.6%±4.0%。组Ⅰ和组ⅢSERCA2 a基因,蛋白表达及酶活性均高于组Ⅱ和组Ⅳ(P<0.01)。结论MSC移植和SERCA2 a基因修饰的细胞移植组大鼠呈现稳定持续的心功能改善作用。MSC可以作为治疗基因的有效转移载体。
- 郭豫涛李小鹰鲁小春吴迪姚克群陈平马康涛周春燕
- 关键词：钙离子基因修饰骨髓干细胞移植心肌梗死心力衰竭
- 钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗大鼠慢性心力衰竭被引量：5
- 2007年
- 目的:观察肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心功能的影响。方法:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系实验室完成。选取4周龄清洁级雄性SD大鼠作为骨髓供体。雌性SD大鼠作为细胞移植、基因治疗受体,随机数字表法分为4组:肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组(n=7)、骨髓干细胞移植治疗组(n=7)、肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植组(n=8)、腺病毒空载体对照组(n=7)。结扎左冠状动脉制作急性心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠模型,每组进行相应的基因治疗和细胞移植。治疗后21d,采用苏木精-伊红染色和MASSON染色评价心脏形态及结构变化,组织多普勒评价各组心功能。并检测肌浆网钙离子ATP酶2a基因和蛋白在宿主心脏的表达。结果:29只雌性大鼠均进入结果分析。①与腺病毒空载体对照组大鼠相比,骨髓干细胞移植治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠心室腔明显减小。MASSON染色显示,肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠蓝色的胶原纤维染色区域减少,红色的肌纤维染色区域增多。②肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组、骨髓干细胞移植治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠左室前壁、室间隔收缩及舒张期纵向峰值速度均较腺病毒空载体对照组显著升高[左室前壁:(0.58±0.03),(0.67±0.02),(0.78±0.05),(0.31±0.02)cm/s;(0.81±0.04),(1.26±0.04),(1.39±0.05),(0.40±0.01)cm/s;室间隔:(0.60±0.05),(1.00±0.08),(1.33±0.04),(0.40±0.01)cm/s;(0.70±0.04),(1.28±0.05),(1.57±0.03),(0.44±0.03)cm/s,P<0.001]。与肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组相比,肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠左室前壁、室间隔收缩及舒张期纵向峰值速度升高(P<0.001)。③肌浆网钙离子ATP酶2a基因治�
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- 关键词：细胞移植基因疗法充血性肌浆网
- 大鼠骨髓干细胞移植对慢性心力衰竭模型缺血心肌的影响
- 2007年
- 目的 探讨骨髓干细胞（bone marrow mesenehymal stemcell，MSC）移植对慢性心力衰竭大鼠模型心肌瘢痕周边及远隔区心肌的影响。方法 制作心力衰竭大鼠模型，4周后分为细胞移植组（将5×10^6MSC注射到梗死后心肌）和对照组（注射等体积磷酸缓冲液），每组7只。组织多普勒评价室壁运动。Tunel染色检测心肌细胞凋亡情况。RT-PCR及Western杂交检测Bax、Bcl2基因和蛋白表达。结果细胞移植组在心肌瘢痕区观察到血管形成。与对照组相比，治疗后21d移植组大鼠心肌收缩及舒张期纵向峰值速度在左室前壁、后壁、前室间隔及二尖瓣水平均显著升高[左室前壁收缩峰值速率为（0．67±0．02）cm／s对（0．31±0．02）cm／s，P〈0．001]；左室前壁舒张峰值速率为（1．26±0．04）cm／s对（0．4±0．01）cm／s，P〈0．001]；移植组大鼠心肌凋亡细胞减少[（9．2±1．1）个／mm^2对（28．5±3．6）个／mm^2，P〈0．001]；瘢痕远隔区细胞比对照组细胞减小[（29．5±1．6）μm^2对（78．5±3．9）μm^2，P〈0．001]。与对照组相比，移植组大鼠心脏Bax基因和蛋白表达降低，Bcl2基因和蛋白表达升高。结论 MSC移植改善瘢痕边缘缺血心肌血供，增强缺血心肌功能；拮抗细胞凋亡，防止远隔区细胞肥大。
- 郭豫涛李小鹰吴迪姚克群陈平马康涛周春燕
- 关键词：干细胞移植细胞凋亡
- 骨髓干细胞移植通过基质金属蛋白酶及其抑制剂降低大鼠缺血性心力衰竭心室重构被引量：21
- 2006年
- 目的探讨骨髓干细胞通过调节基质金属蛋白酶2／基质金属蛋白酶抑制剂1（MMP2／TIMP1）系统改善急性心肌梗死后心力衰竭心室重构。方法结扎雌性SD大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死模型。4周后随机分为2组：移植组大鼠7只，移植雄性SD大鼠来源的骨髓干细胞（5×10^6）到梗死后瘢痕区。对照组大鼠7只，移植等体积的PBS到瘢痕心肌。通过HE染色和Masson染色评价左室形态。免疫组织化学分析心肌MMP2和TIMP1和瘢痕区Ⅰ、Ⅲ型胶原表达情况。经Western杂交检测MMP2和TIMP1蛋白变化。结果部分骨髓干细胞在移植后21天呈纤维母细胞样生长。移植后早期有炎症细胞聚集在瘢痕区，移植后7天炎症细胞减少。与对照组相比，移植组大鼠左室射血分数和左室短轴缩短率提高[（63．43±3．97）％与（36．20±3．99）％，（31．71±1．98）％与（18．00±2．07）％，P〈0．05]，左室压力下降最大值（dp／dtmin）降低[（-4756．24±270．00）mmHg／s（1mmHg：0．133kPa）与（-2789．53±624．13）mmHg／s，P〈0．05]，左室厚度率增加[（76．34±2．66）％与（64．37±2．36）％，P〈0．05]，梗死区面积缩小[（36．19±0．83）％与（42．12±1．88）％，P〈0．05]。移植组大鼠瘢痕区Ⅰ型胶原表达升高，Ⅲ型胶原降低；心肌MMP2蛋白水平降低而TIMP1水平升高。结论骨髓干细胞移植通过MMP2／TIMP1导致胶原网络的动态变化，从而改善急性缺血后衰竭心脏的左室重构。
- 郭豫涛李小鹰吴迪姚克群陈平马康涛周春燕
- 关键词：蛋白酶抑制药
