吴芬芳
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 新城疫病毒F48E9株M和NP基因的原核表达被引量：7
- 2008年
- 根据新城疫病毒(NDV)F48E9国内标准强毒株编码序列设计了2对特异性引物,分别用于扩增M和NP基因。经序列测定,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,转化E.coliBL21(DE3),筛选表达NDV F48E9株M蛋白和NP蛋白的菌株。IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析结果表明,NDV M蛋白在E.coliBL21(DE3)内以可溶形式存在,而NP蛋白以包涵体的形式表达。用纯化的M和NP蛋白免疫鸡制备超免疫血清,进行Western-blot分析;结果,它们可以与真核表达系统表达的M和NP蛋白以及NDV发生特异性反应,表明,原核表达系统表达的NDV M和NP蛋白具有良好的免疫原性和反应原性。
- 闻晓波吴芬芳闫丽辉曹殿军刘培欣刘春国孔宪刚
- 关键词：新城疫病毒M基因NP基因原核表达
- 牛环形泰勒虫血源细胞的生物反应器培养——营养物质消耗及代谢产物积累对细胞生长繁殖的影响
- 2009年
- 本文探讨了牛环形泰勒虫血源细胞活疫苗生产工艺中,营养物质消耗及代谢产物积累对血源细胞在生物反应器批培养中生长的影响。结果表明,牛环形泰勒虫血源细胞在生物反应器中接种5.0×105cells/ml,经60h细胞培养密度达到最大值2.19×106cells/ml。接种后在48h内,细胞生长迅速,未经生长适应期,就直接进入对数生长期;但培养到36h,葡萄糖就基本耗尽,48h后氨浓度上升,使得细胞生长的稳定期非常短暂,仅有12h;随后,细胞培养密度开始下降;96h,氨的积累量达到峰值270.52mg/l,细胞的生长受到明显的抑制,活性迅速下降,细胞生长进入衰亡期。到168h,细胞活力仅有5.91%。可见本次批培养中,营养物质葡萄糖初始浓度(2017.67mg/L)不足,而谷氨酰胺初始浓度可能(2.6mmol/L)偏高。
- 王延吴芬芳刘琼薛英黄炯
- 关键词：活疫苗细胞培养生物反应器
- 新城疫病毒样颗粒(ND-VLPs)免疫效力的研究被引量：6
- 2008年
- 为了研究ND-VLPs的免疫原性,利用共表达NDV F、HN、NP和M蛋白的重组杆状病毒rBac-F-HN-NP-M感染Sf9细胞,采用蔗糖密度梯度离心法纯化释放到细胞培养上清的VLPs,免疫60只,18日龄SPF鸡,监测血清中NDV特异性抗体滴度的变化。2周后用相同剂量的VLPs加强免疫。二免后2周以3.16×103EID50的F48E9株强毒滴鼻攻毒。攻毒前,LaSota灭活苗、LaSota+20μgVLP和不同剂量VLPs组(10μg、20μg、25μg)HI效价分别为28.3、28.9、24.1、26.1、26.7;攻毒后,10μg和20μgVLP免疫组仅能提供了80%和90%的保护率,但与LaSota灭活苗、LaSota+20μgVLP一样,25μgVLP试验组却能够完全抵抗致死剂量的NDV强毒攻击。本试验表明,ND-VLPs具有良好的免疫原性,25μgVLP诱导机体产生的免疫应答能抵抗致死剂量强毒的攻击。ND-VLPs有可能用来研制针对新城疫流行变异株的高效疫苗。
- 吴芬芳闫丽辉曹殿军刘培欣闻晓波孔宪刚
- 关键词：新城疫病毒病毒样颗粒免疫原性免疫效力
- 新城疫病毒样颗粒免疫效力的初步研究
- 本实验室采用昆虫细胞．杆状病毒表达系统，已经成功获得了共表达新城疫病毒 (NewcastleDise2Lse virus，NDV) F<,48>E<,9>株F、HN、NP和M蛋白的重组杆状病毒rBac-F-HN-NP-M...
- 吴芬芳
- 关键词：新城疫病毒病毒样颗粒免疫原性免疫效力
- 文献传递
