吴秋明
- 作品数:1 被引量:9H指数:1
- 供职机构:北京林业大学生物科学与技术学院林木花卉遗传育种教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家林业公益性行业科研专项国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 一种高效提取杨树发病树皮总RNA的方法及应用被引量:9
- 2014年
- 对杨树发病树皮总RNA的高效提取是开展杨树抗溃疡病基因表达调控的基础,为了探讨杨树发病树皮RNA的高效提取方法,本研究以欧美杨细菌性溃疡病菌侵染后的‘中林46’杨为材料,比较了包括本研究提出的RNA提取新方法(RNA试剂盒改良法)在内的6种方法提取的总RNA的质量和浓度。结果显示,通过RNA试剂盒改良法提取的总RNA 28S rRNA条带亮度约为18S rRNA条带亮度的2倍且浓度高,表明该方法更适合感染欧美杨细菌性溃疡病的‘中林46’杨发病树皮总RNA的提取。为了验证RNA试剂盒改良法对健康杨树树皮及不同胁迫处理、组织RNA提取的适用性,进一步用该方法提取了‘中林46’杨、‘107’杨、‘北京’杨健康树皮,低氮、低磷处理的毛白杨组培苗以及白玉兰花的总RNA。结果表明,用RNA试剂盒改良法均能获取高质量的总RNA。所提取的总RNA已成功用于感染欧美杨细菌性溃疡病的杨树树皮转录组测序,以及低氮处理的毛白杨组培苗RT-PCR和荧光定量PCR实验,表明用RNA试剂盒改良法提取的总RNA可以用于后续分子实验。
- 侯佳孙丰硕吴秋明杨玉巧贺伟王延伟
- 关键词:RNA提取杨树侵染树皮