吴洁敏 作品数:41 被引量:115 H指数:6 供职机构: 上海交通大学医学院附属瑞金医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 北京市科委科技计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 社会学 更多>>
ApoH基因单核苷酸多态性与缺血性脑卒中患者颈动脉斑块的相关性研究 被引量:1 2017年 目的研究载脂蛋白H(ApoH)基因单核苷酸多态性(SNP)与缺血性脑卒中(ICS)患者颈动脉斑块的相关性。方法选取上海交通大学医学院附属瑞金医院及上海市闵行区中心医院神经内科住院的ICS中确诊患者,其中ICS伴颈动脉斑块431例(斑块组),不伴颈动脉斑块306例(对照组)。采用多重聚合酶链反应(PCR)及基因序列分析技术,对ApoH基因SNP位点(rs8178842、rs6933、rs4791079、rs2873966和rs1801690)进行2个组间基因型及等位基因频率的差异比较,并对相对风险进行评估。结果经统计分析发现,斑块组的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)、收缩压和血糖均明显高于对照组(P<0.05)。对ApoH基因SNP基因型频率在斑块组与对照组间进行比较分析发现,斑块组rs4791079位点CA、CA/AA基因型频率为15.3%、16.5%,显著高于对照组(8.8%、8.8%),差异具有统计学意义(P=0.008、P=0.022)。而斑块组rs1801690位点GC/CC基因型频率(8.8%)显著低于对照组(13.4%),差异具有统计学意义(P=0.049)。对ApoH基因SNP等位基因频率在斑块组与对照组间进行比较分析发现,斑块组rs4791079位点A等位基因频率(8.8%)显著高于对照组(4.4%),差异具有统计学意义(P=0.001)。似然比分析发现,携带A等位基因者发生斑块的危险性显著增加[比值比(OR)=2.095,95%可信区间(CI)1.333~3.292]。斑块组rs1801690位点C等位基因频率(4.4%)显著低于对照组(7.0%),差异具有统计学意义(P=0.030)。相对风险度分析发现,携带C等位基因者发生斑块的危险性降低(OR=0.610,95%CI 0.389~0.956)。结论 ApoH基因rs4791079位点和rs1801690位点基因多态性与ICS伴颈动脉斑块的发病具有相关性。 舒铭 王燕 陈宁 吴洁敏 倪培华关键词:载脂蛋白H 缺血性脑卒中 单核苷酸多态性 基因型频率 颈动脉斑块 医学检验专业临床生化课程的PBL教学在实践中不断完善 被引量:4 2011年 以"问题为基础"的教学法(problem-based learning,PBL),最初是由加拿大McMaster大学医学院于1969年应用于医学的一种挑战传统教学方法的课程体系。PBL医学教育是以问题为基础,以医学生为对象,以小组讨论为形式,在辅导教师的指导下,围绕某一医学专题或具体病例的诊治等问题进行联系实际的学习过程。目前,全世界已有近2 000所医学院采用了不同程度的PBL教学方式,其中部分学科中PBL教学方式所占比例高达60%~90%。PBL教学已成为医学教育中不可缺少的教学形式之一,并具有全面发展和深入挖掘潜力的意义和价值。 倪培华 刘湘帆 李莉 董雷鸣 应雅韵 吴洁敏 陈宁 胡翊群 樊绮诗关键词:教学 聚合酶链反应检测沙眼衣原体和解脲脲原体 被引量:16 1996年 应用聚合酶链反应(PCR)技术对156例非淋病性尿道炎(NGU)和128例淋病性尿道炎(GU)患者进行沙眼衣原体(Ct)和解脲脲原体(Uu)检测,其中NGU中Ct、Uu的阳性率分别为26.3%、17.9%,Ct、Uu双阳性率为7.7%;GU患者Ct、Uu的阳性率分别为43.8%、33.6%,Ct、Uu双阳性率的为16.4%。 倪培华 巫向前 徐洪 吴洁敏关键词:聚合酶链反应 沙眼衣原体 解脲脲原体 尿道炎 混合型高脂血症与肝脂酶基因启动子250G/A多态性的关系 2007年 目的:探讨混合型高脂血症与肝脂酶基因启动子250G/A多态性的关系。方法:运用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术,检测195名对照者和105例混合型高脂血症患者的肝脂酶(HL)基因启动子250G/A多态性,并研究其对血脂水平的影响。结果:混合型高脂血症组HL基因型和等位基因频率分布与对照组相比,均有显著差异(P<0.05);GAvs GG,0R=1.446,95%CI:0.829~2.524;AA vs GG,OR=4.076,95% CI:2.068~8.035;A vs G, OR=1.978,95%CI:1.408~2.777。在混合型高脂血症组中除患者年龄和AA型载脂蛋白Al(Apo Al)水平外,其他基因型的各项指标均与对照组相同基因型有显著差异(P<0.05)。混合型高脂血症组各基因型间的血脂指标均无差异(P>0.05);而对照组AA型的TG水平明显高于GG型、GA型(P<0.05),LDL-C水平则明显高于GG型(P<0.05)。结论:HL基因启动子250G/A多态性与混合型高脂血症的发生相关,并可影响血浆脂类代谢。 季慧峰 倪培华 胡晓波 应雅韵 张洁 吴洁敏关键词:混合型高脂血症 肝脂酶 启动子 基因多态性 金黄色葡萄球菌肠毒素A基因克隆及表达 被引量:4 2006年 目的对金黄色葡萄球菌肠毒素A基因(SEA)进行克隆、鉴定与表达,为制备单抗、诊断试剂及进一步深入研究SEA的功能奠定基础。方法用聚合酶链反应(PCR)扩增SEA基因,将扩增的产物连接于测序载体pMD18-T上,经测序反应确定无误,酶切后将SEA基因与原核表达载体pET42b(+)构建表达SEA的重组质粒,将重组质粒先转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,经双酶切鉴定后,再转化入表达宿主大肠杆菌BL21菌株内,对转化菌株进行诱导后,破菌,进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。结果构建了表达载体pET42b(+)-SEA,并获得高效表达,表达的蛋白质相对分子质量为27 000,重组蛋白(rSEA)在37℃、25℃经异丙基硫化-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导时均以包涵体形式存在。结论SEA基因成功克隆到表达质粒内并表达,为制备单抗、诊断试剂及其致病机制研究奠定了基础。 陈悦 倪培华 吴洁敏关键词:金黄色葡萄球菌肠毒素A 原核表达载体 克隆 基于团队学习的教学法在分子生物学检验技术实验教学中的探索及应用 被引量:4 2019年 分子生物学检验技术是一门理论与实践并重的应用型学科,课堂知识理解与实际操作应用相互交叉,联系密切。相较于传统的灌输式实验教学,团队互动的教学方式更适合当代学生的发展需要。 梁璆荔 姜晓星 陈宁 吴洁敏 李莉 刘湘帆 倪培华关键词:实验教学 线上线下混合实验教学模式在生物化学技术实验课中的实践 被引量:9 2021年 在2020年新型冠状病毒病(以下简称新冠)疫情发生后,为响应"停课不停学"的重要部署,各地纷纷开展在线教学,本教研室也开展了生物化学技术实验课程的线上线下混合教学实践。生物化学技术是研究生物大分子基本、重要的技术之一,这是医学专业学生必备的理论知识及实验技能。生物化学技术实验课是要求学生在掌握了一定生物化学基础理论和专业知识的基础上,对他们进行系统的实验训练,培养学生的独立实验技能和问题分析解决能力[1],在医学人才培养中具有重要地位。 梁璆荔 李莉 吴洁敏 陈宁 刘湘帆 姜晓星 倪培华关键词:生物化学技术 实验课 葡萄糖诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞凋亡信号传导途径的研究 2007年 目的:探讨葡萄糖诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)凋亡的信号传导途径。方法:利用葡萄糖诱导细胞凋亡:将不同浓度葡萄糖作用于HK-2细胞不同时间,并经透射电镜观察、流式细胞仪(FCM)检测凋亡细胞。采用抑制剂拮抗葡萄糖诱导凋亡:分别将不同浓度的蛋白激酶C抑制剂(hypericin)、半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)抑制剂(apopain)、蛋白酪氨酸激酶抑制剂(genistein)、一氧化氮合酶抑制剂(NAME)作用于HK-2细胞30min,再加50mmol/L葡萄糖作用48h,后行FCM检测HK-2细胞凋亡情况。结果:50mmol/L葡萄糖作用48h可诱导HK-2细胞发生凋亡,并可通过透射电镜观察到凋亡小体,而FCM检测发现10-4mmol/Lhypericin、10-4mmol/L和10-6mmol/Lapopain、10-7mmol/Lgenistein、10-2mmol/LNAME可明显抑制葡萄糖诱导的HK-2细胞凋亡。结论:蛋白激酶C、caspase-3、蛋白酪氨酸激酶、一氧化氮(NO)都参与了葡萄糖诱导HK-2细胞凋亡的信号传导过程。 胡亮 倪培华 徐洪 赵涵芳 吴洁敏 钱关祥关键词:细胞凋亡 信号传导 人regucalcin和红色荧光蛋白融合基因的构建及表达 2006年 目的:构建人regucalcin(RGN)全长cDNA的真核表达载体pcDNA3.1-RGN-DsRed-zeo,观察RGN及红色荧光蛋白(DsRed)在人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)中的表达。方法:RT-PCR技术扩增获得人HK-2细胞RGN全长cNDA,将扩增的产物进行T-A克隆,经酶切、DNA测序鉴定正确,将RGN基因酶切后构成pDsRed-RGN,再将RGN基因与DsRed一起酶切构建成pcDNA3.1-RGN-DsRed-zeo的真核表达重组质粒。用脂质体将重组质粒转染入HK-2细胞,激光共聚焦显微镜观察重组质粒的表达情况。结果:RT-PCR扩增获得人HK-2细胞,其RGNcDNA全长897bp,构建完成真核表达重组质粒pcDNA3.1-RGN-DsRed-zeo,经DNA测序与GenBank中的人RGNcDNA序列一致。经zeocin(zeo)筛选获得稳定表达重组质粒的单克隆细胞株。激光共聚焦显微镜观察到转染重组质粒的细胞中有红色荧光蛋白的表达。结论:本实验成功构建了pcDNA3.1-RGN-DsRed-zeo真核表达质粒,并发现其在HK-2细胞中表达。 徐洪 胡亮 倪培华 吴洁敏 赵涵芳关键词:红色荧光蛋白 重组质粒 钙结合蛋白 血红蛋白分析仪对地中海贫血和变异血红蛋白筛查的评估 目的评估HLC-723G7自动血红蛋白分析仪对地中海贫血和变异血红蛋白的诊断能力。方法:用HLC-723G7自动血红蛋白分析仪对以临床表现流行病学资料和醋纤薄膜电泳等确定的115名地中海贫血和4名怀疑变异血红蛋白患者进行... 陈瑞明 夏文权 吴洁敏 余文红 倪培华 胡翊群关键词:地中海贫血 血红蛋白A2 DNA分析 文献传递