吴剑锋
- 作品数：8 被引量：19H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：南京市卫生局医学科技发展项目江苏省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 化脓性链球菌高毒力株特异基因文库的构建和分析被引量：1
- 2012年
- 目的构建化脓性链球菌高毒力株特异基因文库,克隆和筛选化脓性链球菌高毒力株特异表达基因。方法采用抑制消减杂交技术(SSH),以从患者体内所分离链球菌为毒力菌株,分离特异表达基因,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物转化感受态大肠杆菌TOP10进行文库扩增后,转化菌液涂布于LB固体平板,构建化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,用斑点杂交初步筛选消减文库后,将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析。结果酶切产物为100～2 000bp,连接效率大于50%,消减组与非消减组差异明显,成功构建了化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,所得阳性克隆经斑点杂交筛选后测序,与Genebank数据库进行同源性比对,5个未知序列可能为新基因,7个与已知基因有高度的同源性。结论用SSH及T/A克隆技术成功构建了人源化脓性链球菌高毒力株基因文库,5个未知的新序列有待于进一步的研究。
- 田福亮吴剑锋夏永祥
- 关键词：抑制消减杂交毒力基因
- 化脓性链球菌高毒力株特异基因文库的构建和分析
- 2011年
- 目的构建化脓性链球菌毒力基因文库，克隆和筛选化脓性链球菌高毒力株特异表达基因。方法采用抑制消减杂交方法，以从患者体内分离的链球菌作为毒力菌株，分离毒力基因，将其与PMDl8-T载体进行T／A连接构建文库，将连接产物转化感受态大肠杆菌TOP10进行文库扩增后，将转化菌液涂布于LB固体平板，构建化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库，用斑点杂交初步筛选后，将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析。结果酶切产物为100～2000bp，连接效率大于50％，成功构建了化脓性链球菌毒力基因消减文库，所得阳性克隆经斑点杂交筛选后测序，与Genebank数据库进行同源性比对。5个未知序列可能为新基因，7个与已知基因有高度的同源性。结论用抑制消减杂交技术及T／A克隆技术成功构建了化脓性链球菌毒力基因文库；5个未知的新序列可能与化脓性链球菌的高毒力有关。
- 吴剑锋夏永祥
- 关键词：链球菌科抑制消减杂交毒力基因
- 中性粒细胞与淋巴细胞计数比值、C反应蛋白和降钙素原在重症肺部感染患者中的早期诊断及预后评估价值被引量：10
- 2021年
- 目的探讨炎症指标中性粒细胞与淋巴细胞计数比值(NLR)、C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)对重症肺部感染患者早期诊断及预后评估的价值。方法回顾性分析2019年1月至2020年10月南京医科大学附属南京医院收治的重症肺部感染患者46例(重症组)的临床资料,选取同期普通肺部感染患者46例作为对照组。对比分析2组患者治疗前及治疗后7 d的NLR、CRP和PCT水平,随访30 d,统计重症肺部感染患者预后情况。结果重症组治疗前NLR、CRP及PCT水平显著高于对照组(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析显示NLR对重症组诊断灵敏度为78.26%,特异性为71.74%;CRP对重症组诊断灵敏度为93.48%,特异性为69.57%;PCT对重症组诊断灵敏度为95.65%,特异性为76.09%;三者联合诊断敏感度为灵敏度为98.13%,特异性为90.05%,高于单独诊断(P<0.05);随访结果显示死亡者NLR、CRP及PCT的水平均显著高于部分缓解者和完全缓解者(P<0.05);而部分缓解者NLR、CRP及PCT的水平均显著高于完全缓解者(P<0.05)。结论NLR、CRP和PCT对于重症肺部感染的临床诊断及预后情况评估均具有一定的应用价值,其中PCT具有较高的临床参考价值,且NLR+CRP+PCT联合检测能够提高重症肺部感染的诊断灵敏度,具有较高的临床预测价值,为指导临床治疗提供了有效的实验诊断依据。
- 王刚吴剑锋
- 关键词：重症肺部感染C反应蛋白降钙素原
- 胰腺癌患者血浆外泌体circ-BCAS3的水平和临床意义被引量：1
- 2021年
- 目的探讨胰腺癌患者血浆外泌体环状RNA-BCAS3(circ-BCAS3)的水平及临床意义。方法通过生物信息学网站exoRBase筛选胰腺癌患者血浆外泌体中异常表达的circRNAs。收集2018年1月至2020年2月年龄、性别相匹配的胰腺癌患者与健康体检者的血浆各20例,通过试剂盒分离、提取外泌体并通过电子显微镜检测验证分离效果。实时荧光定量PCR(qPCR)对血浆外泌体中的circRNAs定量检测并结合临床信息和随访数据分析circ-BCAS3水平与胰腺癌临床病理特征和预后的关系。使用circ-BCAS3小干扰RNA(si-circ-BCAS3)和无义核酸序列(si-NC)转染胰腺癌细胞PANC-1和BxPC3,采用CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况。结果通过肿瘤外泌体数据库exoRBase在胰腺癌患者血浆外泌体中筛选出3个高表达的circRNAs(circ-CMTR1、circ-SP1和circ-BCAS3),表达验证发现胰腺癌患者血清外泌体circ-BCAS3水平为16.98±2.33,高于健康对照的6.37±1.18(P<0.05)。circ-BCAS3水平与胰腺癌患者的TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关(P>0.05)。circ-BCAS3高水平患者中位总生存期为5.6个月,低于低表达患者的13.4个月(P<0.05)。细胞实验结果显示,与转染si-NC的细胞相比,转染si-circ-BCAS3后,PANC-1和BxPC3细胞株的增殖活力降低而凋亡率升高(P<0.05)。结论circ-BCAS3异常高表达于胰腺癌患者血浆外泌体中,影响胰腺癌细胞的增殖与凋亡,与胰腺癌患者的预后有关,可作为潜在的诊断以及预后标志物。
- 邰萍吴剑锋
- 关键词：胰腺癌
- D-二聚体与卵巢癌的诊断、治疗及预后关系的研究进展被引量：6
- 2018年
- 卵巢癌是女性多发的恶性肿瘤,其发病率在所有女性恶性肿瘤中位列第三,但由于其发病隐匿,病死率居首位。
- 伍紫娟吴剑锋
- 关键词：D-二聚体卵巢癌静脉血栓栓塞
- 血清miR-200a和S-100B与妊娠期高血压疾病患者临床参数的关系及诊断价值分析被引量：1
- 2021年
- 目的:检测妊娠期高血压疾病(HDCP)患者血清miR-200a和S-100钙结合蛋白B(S-100B)水平,分析其与HDCP患者临床参数的关系及对HDCP的诊断价值。方法:检测2017年2月至2019年2月我院收治的182例HDCP患者(观察组)和153例健康孕妇(对照组)血清miR-200a、S-100B水平,并比较不同年龄、入组时体质量指数(BMI)、分娩孕周、孕次、产次、病情程度、预后的HDCP患者血清miR-200a、S-100B水平差异。Pearson相关性分析血清miR-200a、S-100B及有关指标间的相关性。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-200a、S-100B水平诊断HDCP的价值。结果:观察组血清miR-200a、S-100B水平均高于对照组(P<0.05),血清miR-200a、S-100B水平随着病情加重而升高(P<0.05)。血清miR-200a水平与HDCP患者年龄、入组时BMI、预后有关(P<0.05),血清S-100B水平与HDCP患者分娩孕周、预后有关(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,HDCP患者血清miR-200a与S-100B、年龄、入组时BMI呈正相关(P<0.05),血清S-100B与分娩孕周呈正相关(P<0.05)。ROC分析结果显示,血清miR-200a、S-100B水平诊断HDCP的曲线下面积(AUC)分别为0.743、0.721,灵敏度和特异度分别为72.93%、74.59%;72.00%、75.00%。结论:HDCP患者血清miR-200a、S-100B水平升高,两者与HDCP发病、进展和预后均存在密切关系。miR-200a、S-100B可能作为辅助HDCP诊断的生物学指标。
- 李大千蒋云邰萍吴剑锋刘才冬
- 关键词：妊娠期高血压疾病S-100B病情
- 化脓性链球菌高毒力株特异的基因文库的构件和分析
- 目的构建化脓性链球菌毒力基因文库,克隆和筛选化脓性链球菌高毒力株特异表达基因。方法采用抑制消减杂交方法,以从病人体内所分离链球菌为毒力菌株,分离毒力基因,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物转化感受态大肠杆菌T...
- 吴剑锋
- 文献传递
- 化脓性链球菌高毒力株特异的基因文库的构件和分析
- 吴剑锋
