吕亦晨
- 作品数:3 被引量:11H指数:2
- 供职机构:哈佛大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划中国综合性艾滋病研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 按痘苗病毒优势密码子改造HIV-1 gag基因提高表达水平的研究被引量:10
- 2005年
- 为确定痘苗病毒密码子偏向性与基因表达的关系及其在痘苗病毒与宿主细胞相互作用过程中的作用,按痘苗病毒的优势密码子对HIV-1gag基因进行改造,并对合成基因与野生型HIV-1gag基因在痘苗病毒载体系统的表达水平进行了研究。结果显示:①各目的基因分别正向插入了痘苗病毒TK区7.5k启动子下游;②免疫荧光检测显示,改造前后的gag基因均能够很好地在痘苗病毒中表达;③Westernblot检测显示,在相同感染量时,改造后的gag基因具有更高的表达水平;④流式细胞术检测显示,密码子改造后的gag基因较野生型gag基因表达水平提高约17%。上述结果表明:按照痘苗病毒优势密码子进行外源基因改造,可作为提高外源基因在痘苗病毒中表达的策略,同时提示,密码子偏向性是痘苗病毒与宿主细胞相互作用的重要调控因素。
- 张相民辛伟王世峰李仁清陆柔剑王文玲吕亦晨阮力
- 关键词:痘苗病毒基因表达HIV-1GAG基因
- 非复制重组痘苗病毒表达人免疫缺陷病毒Bostwana C亚型Nef蛋白及免疫效果的观察被引量:2
- 2004年
- 从含人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV 1)BostwanaC亚型全基因的质粒pJM4 HIV中克隆了nef基因,并利用非复制型痘苗病毒载体构建表达Nef蛋白的重组病毒NTVJ1175nef,经PCR和Southernblot鉴定,nef基因正确整合到痘苗病毒基因组的J片段上;感染人源细胞后,经Westernblot和免疫荧光检测表明,重组病毒能很好地表达Nef蛋白,并定位于细胞质中。NTVJ1175nef免疫BALB/c小鼠后,经Pep IFN ′γ Assay法检测,可诱导产生针对表位肽P1特异的可分泌IFN ′γ的CD+8T细胞(占脾细胞总数0 20%);经乳酸脱氢酶(LDH)法检测证实,诱导的细胞毒性T细胞(CTL)可特异性地杀伤表位肽P1特异P815靶细胞。这些结果表明,NTVJ1175nef具有良好的细胞免疫原性,为下一步构建表达包含HIV早期抗原的多组分重组痘苗病毒候选疫苗奠定了免疫学基础。
- 辛伟郭斐陆柔剑王世峰邓瑶王文玲张相民李仁清吕亦晨阮力
- 关键词:人类免疫缺陷病毒HIV-1NEF蛋白细胞毒性T细胞
- 液相芯片法联合检测乙肝血清标志物HBsAb/HBcAb方法的建立
- 2010年
- 乙肝血清标志物(HBV—M)对于乙肝筛查、诊断、分期、疗效监测及预后判断等具有重要价值。目前,检测乙肝血清标志物主要是采用酶联免疫吸附试验(ELISA),该方法仅能单独检测,不能满足临床中多指标检测分析的要求。液相芯片法是一种新型生物芯片技术平台,其最大优势在于可同时对同一样本中多达100种不同目的分子进行分析。
- 刘利军呼和巴特尔吕亦晨
- 关键词:生物芯片标志物乙肝血清B方法