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甲基营养型酵母系统表达的重组人表皮生长因子的纯化及其性质被引量：18: 2001年; 目的获得可用于动物试验和临床试验的人表皮生长因子原料药。方法化学合成的人表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中表达并分泌到培养基中的人表皮生长因子蛋白经 Phenysepharose 6 Fast Flow（ high sub）柱、 Q-sepharose High Performance柱、 Superdex 30柱纯化后进行生物学性质检测。结果纯化后的蛋白产物纯度达 98％，是无热源、无内毒素、无甲基营养型酵母染色体 DNA污染的，有正确的分子量、等电点、氨基末端氨基酸顺序、肽图、紫外光谱、及生物活性性质的重组蛋白。结论纯化蛋白符合动物试验和临床试验的要求，为制备多种人表皮生长因子制剂进行动物实验和临床试验打下了基础。; 黄秉仁蔡良婉王欣马雪梅马晓骊李旌军李红卓韦忠明梁青郑华军唐琪浩唐申秀廖洪涛向绪传; 关键词：重组人表皮生长因子纯化生物活性

人表皮生长因子的基础和应用研究被引量：18: 2001年; 本文报道了有关人表皮生长因子（ hEGF）及其受体（ EGFR）的基础研究结果，以及在此基础上进行新药开发的有关工作： hEGF的基因合成、表达载体的构建和转化宿主细胞、表达产物的纯化和中试规模三批样品的生产和检验等的有关研究结果、 hEGF滴眼液的动物实验和临床实验等新药研制过程。有关基础研究表明，编码 51个氨基酸的 hEGF可以在α因子前导肽的引导下在酵母体系中分泌性表达，表达产物可促进角膜缘上皮细胞的增殖，可促进角膜碱烧伤的愈合，可用于口腔溃疡和皮肤烧伤的治疗，可对大鼠十二指肠溃疡有预防作用等 ,并用之制备了抗血清以测定血尿中 EGF的浓度。研究表明 EGF在大于 10 ng/ml浓度下对神经胶质瘤细胞株 BT325和人阴道上皮癌细胞株 A431的生长具有抑制作用，并用差异显示方法对此现象进行了分子机制的探讨。研究肾癌 EGFR表达和 DNA含量检测具有临床意义。对 EGF的晶体进行了初步的结构分析。中试产品检测表明 hEGF相对分子质量为 6000、等电点为 4.6、氨基端 15个氨基酸顺序正确、具有 EGF的免疫原性和生物活性。产品中无酵母细胞的残余 DNA。动物实验表明 EFG在体内无蓄积，有明确的促进角膜上皮细胞增殖的作用，无急毒和长毒副作用，对眼无刺激和局部毒性作用。在四家医院进行的多中?; 黄秉仁蔡良婉向绪传Xiang-Xu-zhuan; 关键词：表皮生长因子重组蛋白滴眼液基因工程药

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向绪传

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