刘连瑞
- 作品数：11 被引量：19H指数：2
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 抗胃癌生物导向药-免疫球蛋白Y-植物毒蛋白A
- 本发明应用分子遗传学和癌基因遗传学的知识和方法合成了抗胃癌生物导向药-IgY-RicinA，并应用到治疗胃癌病人的临床研究，已治疗28例，证明该生物导向药对治疗肿瘤有很大潜力。
- 刘连瑞王恢鹏杨涛兰冯尚冯之凡
- 文献传递
- 能诱导MGC—803细胞凋亡的新免疫毒IgY—ricinA被引量：1
- 1998年
- 研究证明：许多化学药物的治疗都是以诱导细胞凋亡的方式杀伤癌细胞的。有关细胞凋亡的研究已成为肿瘤生物学研究中的一个新焦点。IgY-ricinA为本实验室新研制的一种免疫毒。与其它种类的免疫毒一样，它能够特异地杀伤靶细胞。推测：免疫毒IgY-ricinA也是以诱导细胞凋亡的方式杀死癌细胞的。我们已经研究了免疫毒对靶细胞的杀伤能力和效果，本文则着重对细胞的杀伤机理进行探讨。本实验以胃癌细胞MGC－803为靶细胞，HeLa细胞为非特异识别细胞，二倍体2BS细胞为正常对照细胞，进行IgY-ricinA处理，观察其诱导细胞凋亡的可能性。同时进行IgY和ricin处理，以期探明引起细胞凋亡的有效成分。OlympusBX荧光显微镜下观察到（Fig,2,.5&6)：在细胞培养液中加入IgY-ricinA后，MGC－803细胞表现出典型的凋亡形态变化，即染色质浓缩，细胞皱缩并放出凋亡小体。细胞凋亡时DNA被降解寡核体长度的片段，在琼脂凝胶电泳上形成DNA梯带，成为药物处理后确定细胞凋亡过程中细胞降解的一种生化指标。Fig.3表明，用IgY-ricinA处理MGC－803细胞24小时、用ricin处理MGC－803和Hela细胞后，均出现明显的寡核体长度的DNA梯带，但是用IgY处理的细胞无DNA梯带出现。用特异性DNA的染色探针（如propidium iodide)标记细胞、经流式细胞光度仪测定，可以得到凋亡细胞的apo峰，即图形中G1峰前的一个次峰。Fig.4表明：用10μg/mL的IgY-ricinA处理MGC－803细胞24小时，其凋亡率大大增高，apo峰很明显，214小时后接近80％。同样处理条件下，HeLa细胞凋亡率很低，apo峰不显著；2BS细胞则没有apo峰出现。同样方法、用ricin处理MGC－803和HeLa细胞，都出现明显的apo峰。IgY-ricinA和ricin两者的差别是使细胞凋亡达到最大比例所需时间的不同，后者较短。IgY不能够诱导细胞凋亡。结论：IgY-ricinA能够选择性
- 刘连瑞金志刚等
- 关键词：MGC-803癌细胞凋亡杀伤机理
- 孕牛外周血中胎儿Y-特异性序列的检测被引量：1
- 1996年
- 根据公牛Sry特异性序列设计两对寡核苷酸引物。并对20份妊娠晚期母牛外周血DNA样品进行PCR扩增,结果有9份样品检测出有Sry片断(阳性),其余11份为阴性。经分娩牛犊性别验证,在20份被检测的样品中,有16份PCR检测结果与犊牛实际性别相符,其余4例不符。我们的实验结果说明,胎儿细胞可以进入到孕牛的外周血中去。
- 杨建民王骊山姜小军蒋耀青刘连瑞
- 关键词：孕牛胎儿性别外周血
- HeLa细胞的反式作用因子CTF／NF－1与其顺式作用元件的特异性作用
- 1994年
- 本文运用凝胶延迟反应（ＧｅｌＲｅｔａｒｄａｔｉｏｎＡｓｓａｙ）和足迹法（Ｆｏｏｔｐｒｉｎｔｉｎｇ）研究了ＨｅＬａ细胞核蛋白中的反式作用因子ＣＴＦ／ＮＦ－１与其对应的顺式作用元件的特异性作用。研究结果表明ＨｅＬａ细胞的ＣＴＦ／ＮＦ－１包含有不同分子量的组分，它们均能特异性结合于特异位点ＡＴＡＴＴＧＧＣＴＴＣＡＡＧＣＣＡＡＡＡＴＧＧＡ序列，形成至少５种不同分子量形式的因子－元件复合物。这一结果对阐明ＣＴＦ／ＮＦ－１复杂多样的调控机制及其组成种类有重要意义。此外，本文还建立了一种制备核蛋白提取物的新方法，有效地解决了因反式作用因子含量极低带来的研究上的困难。
- 谷春刘连瑞王恢鹏冯尚杨涛兰
- 关键词：反式作用因子HELA细胞
- IgY抗体作为导向载体对消化系统肿瘤的选择性识别作用研究被引量：14
- 1997年
- 用生物治疗方法治疗肿瘤已被视为肿瘤治疗的第四大疗法，其主要是免疫治疗，包括抗体与偶合物，肿瘤疫苗等。而要想获得有效的肿瘤治疗药物，其关键是要寻找小型化的、高效的导向载体。我们的实验室以低分化腺胃癌的Ｐ１１０癌蛋白作为抗原，免疫ＳＰＦ鸡，从卵黄中提取抗体ＩｇＹ作为植物毒素的导向性载体；实验结果证明，ＩｇＹ能特异性地选择识别消化系统的肿瘤组织。
- 杨建民金志刚余琼杨涛兰王恢鹏刘连瑞
- 关键词：消化系肿瘤IGY抗体
- PCR用于孕牛外周血中胎儿SRY序列检测和奶牛早期胚胎性别鉴定被引量：1
- 1995年
- 根据文献报道的人，鼠，兔ＳＲＹ同源序列设计引物，从牛基因组中扩增出一段牛特异的ＳＲＹ序列，对该序列进行克隆测序后设计出一对雄牛特异的ＰＣＲ引物，利用此引物对奶牛早期胚胎细胞和妊娠晚期母牛外周血ＤＮＡ样品进行ＰＣＲ扩增，经分娩牛犊性别验证，本引物能够准确鉴别孕牛外周血中雄性胎儿的ＳＲＹ序列，并且对早期胚胎性别签定的准确率为８０％．
- 杨建民王丽山刘连瑞蒋耀青
- 关键词：PCR奶牛胚胎
- IgY-Ricin A诱导癌细胞程序化死亡的研究被引量：1
- 1998年
- 研究了抗癌导向药物IgY-Ricin A杀伤癌细胞的作用机理。人胃低分化粘液腺癌MGC-803细胞经IgY-Ricin A处理,细胞的增殖明显受到抑制,而同样处理的人胚正常肺细胞2BS,其生长不受这种药物的影响。FCM实验结果表明,IgY-Ricin A处理的MGC-803细胞,在8h开始出现细胞程序化死亡峰Apo,同样处理的2BS细胞则无Apo峰出现。经lgY-Ricin A处理的MGC-803细胞核由均一状态变为浓缩凝集状,经激光共聚焦显微镜进行光切片和三维重组,发现MGC-803细胞核由原来的球形变成高度浓缩凝集的点状结构。DNA凝胶电泳分析显示,IgY-Ricin A处理的MGC-803细胞DNA被降解,呈现梯状电泳条带这一典型的细胞程序化死亡指标。研究结果表明,IgY-Ricin A通过诱导细胞程序化死亡来控制MGC-803细胞的增殖,最终杀死癌细胞。
- 杨涛兰金志刚杨建民马秋云王恢鹏刘连瑞
- 关键词：癌细胞
- DNA指导的RNA聚合酶的研究——Ⅰ.615小鼠肝RNA聚合酶B(Ⅱ)的提取和鉴定
- 1979年
- 本文叙述了从615小鼠肝中提取和纯化RNA聚合酶B(Ⅱ)的程序。这种酶在性质和结构上与已报道的其他真核生物的同类酶基本一致。其DEAE-纤维素DE52洗脱部分在280nm光吸收测定和~3H-UTP掺入活性测定都表明它是单一的峰,在不变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳上也是一条电泳带;在变性电泳条件下,它由11条电泳带组成,其中有两个大亚基,其分子量分别为220,000和125,000道尔顿。这种酶对α-鹅膏蕈碱的抑制作用非常敏感,1μg/ml α-鹅膏蕈碱可以抑制RNA合成的50%。
- 刘连瑞张大达王斌王金霞黄崇喜王恢鹏
- 关键词：聚合酶多聚酶转肽酶真核体小家鼠鼠肝
- 转融合基因pXJ41小鼠的发育异常
- 1999年
- 马秋云杨涛兰刘连瑞
- 关键词：融合基因小鼠血红蛋白含量转基因动物发育异常基因表达调控
- 细胞死亡的基因调节被引量：3
- 1996年
- 杨建民刘连瑞
- 关键词：细胞细胞死亡基因调节
