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LC-MS/MS检测鸡可食性组织中黏菌素残留量的方法研究: 黏菌素（coslitin）也称为多黏菌素E（polymyxin E）、抗敌素，它是一种含有至少30多种成分的白色结晶或结晶性粉末状混和物，是主要由黏菌素A（多黏菌素E1， C53H100N16O13）和黏菌素B（多黏菌素...; 刘晶晶; 关键词：液相色谱-串联质谱; 文献传递

高效氯氰菊酯降解菌BCC01的分离鉴定研究被引量：2: 2012年; [目的]分离鉴定高效氯氰菊酯降解菌。[方法]从拟除虫菊酯农药污水淤泥中,分离得到15株芽孢杆菌,通过降解HPLC测定降解活性,其中1株对高效氯氰菊酯具有较高活性,对其进行形态、生理生化16S rDNA聚类分析鉴定其种属。[结果]该菌株命名为BCC01,鉴定为蜡样芽孢杆菌,能够以高效氯氰菊酯为唯一碳源生长,4 d内对50 mg/L的高效氯氰菊酯降解率为86.8%。[结论]BCC01是对高效氯氰菊酯具有高降解活性的蜡样芽孢杆菌。; 刘晶晶胡美英李亚楠陈少华林惠花易欣钟国华; 关键词：高效氯氰菊酯生物降解

拟除虫菊酯类农药降解菌及其菌剂: 本发明公开了一种拟除虫菊酯类农药残留降解菌及其降解菌菌剂，属于生物高技术领域。所用菌株为ZS-S-01，经鉴定为寡养单胞菌属(Stenotrophomonas sp.)，菌种保藏号为CCTCC M 2010095，该菌株...; 钟国华胡美英陈少华刘晶晶黄文文

土壤宏基因组中硫氧还蛋白还原酶部分序列的克隆被引量：2: 2012年; 为探明硫氧还蛋白还原酶(TrxR)在微生物中的保守性,利用宏基因组技术从农药厂废水淤泥中提取环境DNA,并以其为模板直接采用PCR方法进行TrxR基因克隆,最终获得了硫氧还蛋白还原酶基因的部分序列片段。该片段全长476 bp,通过多序列比对及进化树分析,发现其与海杆菌、假单胞菌硫氧还蛋白还原酶基因序列的同源性高达80%以上,氨基酸序列同源性达98%以上,在进化中具有高度的保守性。; 李亚楠刘晶晶胡美英范继巧; 关键词：硫氧还蛋白还原酶基因克隆进化树

河源市东源县农村教师流失因素与对策研究: 农村学校教师队伍流失问题是近年来教师队伍建设遇到的突出问题之一,当前，城乡二元结构体制与中国特设社会主义市场经济体制并存的叠加时期将存在较长一段时间，教学环境较差、教师待遇偏低、师资力量薄弱、教师普遍压力大等种种原因影响...; 刘晶晶; 关键词：农村学校教师离职意愿; 文献传递

甲氰菊酯降解菌ZH-3的分离鉴定及降解特性被引量：5: 2010年; 【目的】分离筛选甲氰菊酯的高效降解菌株,为拟除虫菊酯类杀虫剂果蔬残留危害的综合治理提供候选生物制剂。【方法】采用基础盐培养基,从农药厂废水排放口的污泥中筛选降解菌,以甲氰菊酯为唯一碳源进行摇瓶培养复筛,以降解率为评价标准,确定高效降解菌株,根据形态、生理生化特征和16SrDNA序列同源性鉴定其种属,高效液相色谱法研究其降解特性。【结果】分离得到甲氰菊酯高效降解菌株ZH-3,初步鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。菌株ZH-3能有效降解25～300mg/L的甲氰菊酯,在1%接种量、30℃、pH8.0、160r/min条件下,3d内对50mg/L甲氰菊酯的降解率为85.3%。【结论】菌株ZH-3对菊酯类农药的降解作用谱广,对甲氰菊酯、高效氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯及溴氰菊酯等均具有较高的生物降解作用。; 黄文文刘晶晶叶美玲韩海涛钟国华; 关键词：甲氰菊酯生物降解蜡状芽孢杆菌降解特性

重叠延伸PCR法构建小菜蛾化学感受蛋白1基因突变体研究被引量：3: 2011年; 【目的】探索重叠延伸PCR法在昆虫化学感受蛋白基因点突变上的应用,研究半胱氨酸(Cys32)对小菜蛾(Plutella xylostella)化学感受蛋白1(PlxyCSP1)结合特性的影响。【方法】用计算机软件模拟PlxyCSP1上Cys32突变前后的蛋白三级结构以及与配体化合物的结合情况,确定点突变位点。根据扩增得到的PlxyCSP1序列设计并合成重叠引物,利用重叠延伸PCR法,将PlxyCSP1上的Cys32突变成色氨酸(Trp32),获得突变体PlxyCSP1-M。将突变后的基因与载体pET-32a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)。【结果】分子对接图显示,配体可以顺利进入PlxyCSP1的结合口袋,而无法进入PlxyCSP1-M的结合口袋。结合能预测显示,配体化合物与PlxyCSP1的结合能均为正值,与PlxyCSP1-M的结合能均为0。突变后的重组质粒测序结果表明,Cys32(TGC)已突变为Trp32(TGG),经IPTG诱导,该菌表达了分子质量约为36 ku的融合蛋白。【结论】Cys32是影响PlxyCSP1结构和功能的重要氨基酸残基。Cys32突变为Trp32后,PlxyCSP1-M结合特性发生了变化,不能与配体化合物正常结合。; 任珍珍刘晶晶柳晓磊陈永李珣胡美英; 关键词：小菜蛾重叠延伸PCR

小菜蛾气味受体蛋白PlxyOr83b基因的克隆及表达被引量：2: 2011年; 【目的】克隆小菜蛾Plutella xyostella气味受体Or83b基因,并进行原核表达,为研究小菜蛾寄主选择行为的分子机理,开发昆虫行为调节剂提供基础。【方法】提取小菜蛾的总RNA,反转录获得总cDNA,采用RT-PCR方法扩增目的基因,将其克隆至T载体并测序,然后将目的基因克隆到大肠杆菌Escherichia coli表达载体pET-32a(+)中表达。经酶切、PCR及测序鉴定正确后转化BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE,Western印迹鉴定表达蛋白。【结果】获得了编码小菜蛾Or83b的cDNA序列,该基因阅读框长1 413 bp,编码471个氨基酸,预测的等电点为7.19,命名为PlxyOr83b(GenBank登录号为GQ923610);成功构建了pET-PlxyOr83b原核表达重组质粒,目的基因获得高效表达,其融合蛋白分子量为32.0 kD,Western blot检测结果进一步表明PlxyOr83b在大肠杆菌DE3中得到正确表达。【结论】成功克隆和表达了小菜蛾气味受体基因PlxyOr83b,该基因与其他昆虫Or83b基因基本一致。; 李珣刘晶晶龚亮陈永钟国华; 关键词：小菜蛾气味受体基因克隆原核表达

A Mutant of PlxyCSP1 Protein in Plutella xylostella: 2012年; [Objective] This study aimed to explore the effects of cysteine （Cys58） on the characteristics of PlxyCSP1 in P. Iostella combined with pesticide compounds. [Method] Cys58 of PlxyCSP1 was mutated into Trp58 by using overlap extension PCR method, and PlxyCSP1-M2 mutant was obtained. Expression vector was con- structed and the protein was detected by western blot. [Result] Expression vector pET32a-PlxyCSP1-M2 was constructed to express the 35kDa weight protein. [Conclusion] PlxyCSP1 mutant protein has been expressed successfully in prokaryotic ex- pression system.; 刘晶晶胡美英任珍珍李亚楠

小菜蛾化学感受蛋白突变体的构建: 2012年; [目的]研究半胱氨酸(Cys58)对小菜蛾(Plutella xylostella)化学感受蛋白1(PlxyCSP1)与农药化合物结合特性的影响。[方法]利用重叠延伸PCR法,将PlxyCSP1中Cys58突变成色氨酸(Trp58),获得突变体PlxyCSP1-M2。构建表达载体,表达突变蛋白,并进行Western Blot检测。[结果]构建了突变基因的原核蛋白表达载体pET32a-PlxyCSP1-M2,并表达了大小为35 kDa的融合蛋白。[结论]利用重叠延伸PCR法成功在原核系统中表达了PlxyCSP1突变蛋白。; 刘晶晶胡美英任珍珍李亚楠; 关键词：小菜蛾原核表达

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刘晶晶