刘景华
- 作品数：27 被引量：126H指数：7
- 供职机构：中国药品生物制品检定所更多>>
- 发文基金：北京市优秀人才培养资助艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 狂犬病病毒核蛋白的体外表达及其免疫原性研究
- 目的研究狂犬病病毒核蛋白在保护性免疫应答中的作用。方法 RT-PCR获得狂犬病病毒CVS-11株的核蛋白全长基因,并克隆至原核表达载体pET30a（+）,获得重组表达质粒pET30a-N,转染BL21（DE3）菌株,在体...
- 曹守春李加王玲唐建蓉刘景华曲小肃吴小红石磊泰董关木俞永新
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白免疫原性病毒攻击
- 文献传递
- 斑点杂交法测定Vero细胞DNA残留量的探针选择被引量：7
- 2008年
- 目的:为精确检测以Vero细胞为基质的生物制品中宿主细胞残余DNA含量。方法:将提取的Vero细胞DNA分别用不同时间的超声波和 HindⅢ内切酶进行断链处理,电泳和序列分析并确定DNA片段长度,地高辛标记后制备成检测探针,测定已知的不同浓度的样品DNA和疫苗中DNA残留量。结果:HindⅢ内切酶处理断链后产生172 bp、344 bp、516 bp、688 bp不同长度的DNA,并选取172bp长度的DNA片断和超声波处理30 s的DNA长度为500～750 bp的DNA片断作为检测用探针。结论:两种方法处理的DNA探针检测DNA的灵敏度可达0.1 pg,重复性均较好,超声波处理的探针特异性优于酶切探针,并能成功的应用于疫苗产品中残余宿主细胞DNA的检测。
- 李加唐建蓉刘景华曲小肃董关木
- 关键词：疫苗VERO细胞DNA探针
- 检查传代细胞致肿瘤因子动物模型的研究
- 1995年
- 以Vero传代细胞系为例，用一种严重联合免疫缺陷小鼠（SevereCombinedImmunodeficintMice，SCID）及棵鼠（NudeMice），以10~7／0.2ml的传代细胞注射于胸部皮下。同时用Hela细胞作为阳性肿瘤细胞对照，并接种于免疫功能正常的BALB／c小鼠和昆明种小鼠。结果表明Vero细胞（P_(137)代）无论在SCID小鼠或探鼠都未引起肿瘤。而Hela细胞注射的SCID小鼠及裸鼠，于注射后第7天，在注射部位有进行性的肿瘤生长，到21天解剖时长至15×20mm，局部淋巴结也受累；而在免疫功能正常的小鼠则未引起肿瘤生长。证明SCID小鼠及探鼠可作为致肿瘤试验的动物模型。
- 刘丽华李冠民刘景华范文平
- 关键词：传代细胞SCID小鼠疫苗动物模型
- 国产狂犬病疫苗免疫抗体监测试验报告被引量：2
- 2004年
- 试验选用6月龄以上,5岁以内的成年健康犬65条,分别接种2种国产减毒狂犬疫苗,并对一免后6个月和8个月的犬及22条第2次加免犬进行了血清抗体监测。免疫接种1次后6个月,28.57％的犬血清抗体高于0.5IU/mL(狂犬病血清抗体在0.5IU/mL以上,犬达到保护水平);8个月时,有5.71％的犬血清抗体在0.5IU/mL以上;半年后进行第2次免疫,81.82％的犬血清抗体高于0.5IU/mL。
- 周桂兰祝俊杰赵景义郑瑞峰王卫东江翠兰吴小红刘景华赵民于垡
- 关键词：狂犬病国产疫苗免疫抗体免疫保护力
- 我国纯化狂犬病疫苗的临床反应及效果评价被引量：18
- 2002年
- 目的 对11家企业新近研制成功的9批地鼠肾细胞纯化狂犬病疫苗和5批Vero细胞纯化狂犬病疫苗进行临床安全性和有效性考核。方法 每家企业研制的疫苗任取1批,按3针和/或5针免疫程序接种,观察接种人群的副反应发生率。通过测定全程免疫后的血清中和抗体确定其免疫效果。结果 纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗和Vero细胞狂犬病疫苗的副反应发生率分别为0％～31.5％和0％～39.4％。全程免疫后均能产生很高的中和抗体。无佐剂疫苗第1针免疫后的第7d中和抗体GMT水平已达到0.4IU/ml,阳转率可达45.2％。结论2种疫苗均具有较好的安全性和免疫原性。
- 董关木郑海发刘增顺曲小肃刘景华吴小红
- 关键词：狂犬病疫苗纯化疫苗
- 人用Vero细胞狂犬病疫苗生产毒种(CTN-1-V株)的建立
- 董关木刘增顺郑海发吴小红刘景华曲效民严子林俞永新
- 1994年10月-2003年10月，由中国药品生物制品检定所利用1996年卫生部科技贷款和自筹资金，应用中国自行分离、减毒的狂犬病毒株，适应于Vero细胞。该毒种在Vero细胞中增殖快，病毒滴度可达到10<'8>/ml以...
- 关键词：
- 关键词：狂犬病毒株VERO细胞
- 狂犬病毒CTN-1株在Vero细胞上的适应传代研究被引量：20
- 1995年
- 本文报导了用我国狂犬病毒固定毒人二倍体细胞适应株（ＣＴＮ－１）进行Ｖｅｒｏ细胞适应传代研究。通过连续传代培养，滴度可达８．０ｌｏｇＬＤ_（５０）ｍｌ，达到了ＷＨＯ规定的不需浓缩的标准。病毒用０．０１ＭＯＩ感染细胞其产量与１Ｍｏｌ感染量相仿。病毒增殖高峰在４－５天，维持达１５天无明显下降，且可连续收获４－５次。因此，该毒种符合ＷＨＯ提出的疫苗生产毒种要求，可用于狂犬病疫苗生产。
- 董关木刘增顺俞永新严子林刘景华
- 关键词：狂犬病疫苗VERO细胞二倍体细胞
- 抗狂犬病病毒中和抗体效价快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的建立及应用被引量：19
- 2009年
- 目的建立抗狂犬病病毒中和抗体效价的快速荧光灶抑制试验(RFFIT),验证其与小鼠脑内中和法(MNT)的相关性,并用于马抗狂犬病病毒血清(ERIG)和人狂犬病免疫球蛋白(HRIG)及狂犬病疫苗免疫后血清中和抗体效价的测定。方法待测血清或免疫球蛋白在96孔板中作3倍系列稀释,与能感染80%～95%细胞量的攻击病毒混合后,37℃体外中和1h,接种BSR细胞,培养24h后荧光染色,荧光显微镜下读取结果。用建立的RFFIT法与MNT法同时标定狂犬病免疫球蛋白国家标准品,并检测ERIG和HRIG以及疫苗免疫后血清样品的抗狂犬病病毒中和抗体效价,以比较两种方法的精密度和相关性。结果采用MNT法和RFFIT法检测我国抗狂犬病免疫球蛋白国家标准品的GMT分别为21.4和23.8IU/ml,两种方法的变异系数分别为62.3%和13.3%;两个实验室用RFFIT法测定我国国家标准品的结果分别为21.71和23.81IU/ml。两种方法测定ERIG和HRIG及疫苗免疫后血清中和抗体效价的结果差异无统计学意义,相关系数为0.976,两种方法的检测结果之间呈良好的正相关性。结论RFFIT法可替代MNT法检测抗狂犬病病毒中和抗体效价。
- 吴小红李加唐建蓉Hervé Bourhy刘景华曲效民曹守春董关木
- 关键词：狂犬病中和抗体快速荧光灶抑制试验
- 兽用狂犬病疫苗免疫犬的效果评价被引量：17
- 2007年
- 周桂兰赵德明祝俊杰赵景义林德贵施振声凌凤俊张永振徐葛林祝玉桃郑新雄吴小红刘景华李佳
- 关键词：狂犬病疫苗免疫兽用世界卫生组织灭活疫苗法定报告
- 狂犬病病毒减毒株CTN-181基因组全序列的测定
- 狂犬病病毒CTN-181是本室保存的一株经初步鉴定为毒力减弱的弱毒株，鉴定结果表明：CTN-181是一株高度减毒、弱毒稳定性高、不易返祖而且具有十分良好免疫原性的弱毒株，其实验室指标达到WHO推荐作为口服疫苗的SAG2株...
- 石磊泰俞永新刘景华唐建蓉董关木
- 关键词：全基因组序列
- 文献传递
