刘岩
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：解放军第302医院更多>>
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- 乙型肝炎病毒e抗原在肝细胞内作用蛋白AK026018亚细胞定位的研究
- 2005年
- 目的:确定肝细胞内乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)作用蛋白AK026018的亚细胞定位,初步研究该蛋白的生物学功能。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,从HepG2细胞中扩增编码AK026018蛋白的全基因,构建真核表达载体pEGFPAK,转染HepG2、293T细胞系,在激光共聚焦荧光显微镜下与转染空载体pEGFPN1的细胞比较观察。结果:经限制性内切酶分析和DNA序列测定鉴定构建的重组表达载体正确。通过激光共聚焦荧光显微镜观察,转染了重组载体pEGFPAK的细胞绿色荧光信号较集中分布于胞浆中,而空载体pEGFPN1转染的细胞绿色荧光信号在整个细胞中均匀分布。结论:成功分离了AK026018全基因序列并构建了真核表达载体,该基因表达产物亚细胞定位于细胞浆中。
- 李伯安刘岩李靖舒翠莉何卫平戚扬侯俊毛远丽程云
- 关键词：基因表达真核表达
- 慢性乙型肝炎病毒感染HBeAg清除相关因素的初步探讨被引量：1
- 1989年
- 本文对住院的181例慢性乙型肝炎病人,进行了一系列HBeAg/抗HBe的动态观察,对与HBeAg清除的相关因素进行了初步探讨。材料和方法研究对象为住院的慢性乙型肝炎病人共181例,初检HBsAg及HBeAg均为阳性,ALT异常,均经肝活组织检查,证实为慢活肝(CAH)109例、慢迁肝(CPH)72例。
- 饶文淑尤大栋刘岩李晖
- 关键词：乙肝病毒HBEAG
- HBeAg与CD81分子结合的研究被引量：4
- 2004年
- 目的 :研究HBeAg与CD81分子在细胞内、外的相互作用。方法 :应用RT PCR技术 ,从HepG2细胞中扩增CD81全基因 ,并构建重组真核表达载体。将其与pGBKT7 eAg共转染营养缺陷型酵母细胞 ,观察生长情况。应用网织红细胞裂解体外翻译及免疫共沉淀试验 ,进一步验证CD81分子与HBeAg的结合。结果 :经EcoRI和BamHI酶切和DNA序列测定鉴定表明 ,构建的CD81基因的重组表达载体正确。共转染后的酵母细胞在营养缺陷的培养基中生长良好。体外免疫共沉淀试验证实 ,CD81与HBeAg出现沉淀带。结论 :HBeAg与CD81分子在细胞内、外均可结合 。
- 李伯安刘岩李靖舒翠莉何卫平侯俊程云
- 关键词：乙型肝炎病毒E抗原CD81酵母细胞免疫共沉淀
- 慢性乙型肝炎血清学标志、HBV DNA定量分析及HBV前C/C变异的临床研究被引量：5
- 2004年
- 目的 :探讨慢性乙型肝炎患者血清学标志、HBVDNA载量及HBV前C/C变异与临床病变的关系。方法 :随机选取慢性乙型肝炎患者 2 4 6例 ,其中轻度 10 2例、中度 88例、重度 5 6例 ,分别应用ELISA、实时PCR法检测其血清中的HBV免疫学标志及HBVDNA含量。同时对HBeAg阴性而HBVDNA含量高拷贝的 3例轻度、6例中度及 8例重度患者血清 ,应用巢式PCR方法分离前C/C区全长基因 ,纯化后克隆入T载体 ,鉴定后进行序列测定。结果 :10 2例轻度、88例中度及 5 6例重度患者中血清学标志HBsAg ,HBeAg,抗 -HBc阳性模式分别为 5 3例 (5 1.9% )、4 6例(5 2 .3% )、33例 (5 8.9% ) ;HBsAg ,抗 -HBe,抗 -HBc阳性模式分别为 37例 (36 .3% )、32例 (37.5 % )、2 1例 (37.5 % ) ;单独HBsAg阳性为 8例 (7.8% )、5例 (5 .6 % )、1例 (1.7% ) ;其他模式分别为 4例、5例、1例。HBVDNA含量平均值分别为 10E 5 .5 3拷贝 /ml、10E 6 .0 3拷贝 /ml、10E 6 .5 8拷贝 /ml。HBeAg阴性而HBVDNA含量 >10E 6拷贝 /ml的病例数分别为 3例、6例、8例。统计分析表明 ,轻、中、重慢性乙肝患者间血清学标志及HBVDNA含量差异均不具统计学意义 ,而HBeAg阴性HBVDNA含量高拷贝的患者出现频率差异具有统计学意义。序列测定结果显示
- 李伯安戚扬刘岩陈昊舒翠利郑宇李靖高蓉程云
- 关键词：血清学生物学标记HBVDNA定量分析
- 乙型肝炎病毒HBeAg与AK026018基因表达产物的结合能力
- 2006年
- 目的验证乙型肝炎病毒HBeAg与AK026018基因表达蛋白在细胞内及细胞外的结合作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HepG2细胞中扩增AK026018基因序列,构建真核表达载体,与HBeAg真核表达载体共转染营养缺陷酵母细胞,观察生长情况。同时进一步应用网织红细胞裂解体外翻译及免疫共沉淀系统,验证AK026018蛋白与HBeAg间的确切结合作用。结果经限制性内切酶分析和DNA序列测定构建的AK026018重组表达载体正确。共转染后的酵母细胞在营养缺陷培养基中生长良好。体外免疫共沉淀实验可见特异放射自显影带。结论HBeAg与AK026018基因编码蛋白在细胞内及细胞外均能相互结合,推测该分子在HBV的致病过程中起着重要作用。
- 李伯安刘岩李靖舒翠莉何卫平戚扬侯俊程云
- 关键词：酵母菌
