余模松 作品数:49 被引量:72 H指数:4 供职机构: 武汉生物制品研究所有限责任公司 更多>> 发文基金: 卫生部科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 农业科学 更多>>
噬菌体肽库技术及其在HCV抗原表位研究中的应用 被引量:1 2007年 噬菌体随机肽库技术是研究抗原表位及其配体受体相互作用位点的强有力的工具。本文对噬菌体肽库技术的原理及其在抗原表位研究尤其在HCV抗原表位研究中的应用作一综述。 彭祥兵 余模松关键词:噬菌体肽库 抗原表位 HCV HIV-1跨膜蛋白gp41的截短及表达 被引量:3 2003年 将HIV 1跨膜蛋白gp4 1进行截短 ,在大肠杆菌中进行表达并纯化。PCR扩增 gp4 1的部分编码基因 ,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体 pGEM T上 ,然后用EcoRⅠ和Sa1Ⅰ切下目的基因 ,并构建到表达载体pGEX 4T3上 ,导入宿主细胞BL2 1(DE3) ,用IPTG诱导表达 ,表达产物用亲和层析进行纯化并作相应鉴定。截短的HIV 1跨膜蛋白 gp4 1能直接在大肠杆菌内进行表达 ,利用亲和层析能方便地将目的蛋白进行纯化 。 端义坤 张涛 余模松关键词:人类免疫缺陷病毒1型 基因表达 淋病奈瑟氏球菌分型及其意义 1996年 淋病在世界范围内流行甚广,其发病率远远高于具它性病,由于耐药菌株的产生,使淋病奈瑟氏球菌(淋球菌)的传播更加广泛。近年来,随着分型技术的发展,许多学者对淋球菌的流行病学进行了研究,有效地控制和预防了淋病的发生和流行。本文就淋球菌分型技术及其意义综述如下。 郑和平 余模松关键词:法医学应用 淋病 奈瑟氏球菌 淋球菌 抗 A、B 和 C 群脑膜炎球菌多糖单克隆抗体的制备及鉴定 1990年 10株抗 A、B 和 C 群脑膜炎球菌多糖 McAb,经 PHA、PHAI、ELISA 和试管凝集试验测出较高的群特异性抗体滴度。经中国药品生物制品检定所选用12个群脑膜炎球菌国家标准菌株和地方菌株以及其它奈瑟氏菌株进行玻片凝集和试管凝集检定。结果显示 McAb 滴度高、特异性强,用于分群诊断取得满意的结果。10株 McAb 均属小鼠 IgM 类。 余模松 陈克金 童飞虹 范富林关键词:单克隆抗体 杂交瘤 牛血清白蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定 2007年 用牛血清白蛋白(BSA)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,培养上清经过双抗体夹心法检测初步筛选分泌鼠IgG的杂交瘤细胞,将此种杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水用间接ELISA法筛选,获得4株能稳定分泌抗BSA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A5、3A3、3G6、4A8。鉴定结果显示,2A5细胞分泌IgG2a/κ,其余3株细胞分泌IgG1/κ;纯化后4株腹水单抗的纯度达90%以上,对BSA的ELISA滴度均可达到1∶100000以上;4株单抗均不与人以及马、猪、羊、兔、豚鼠等血清发生交叉反应;W estern B lotting试验证明4株单抗均识别分子量为68000的BSA;用间接ELISA法测定4株单抗相对亲和力及相对敏感度大小依次为3A3>2A5>3G6>4A8;杂交瘤细胞株连续培养3个月以及冻存半年后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定。 余健 周志军 彭祥兵 朱华松 施金荣 余模松关键词:牛血清白蛋白 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体(ScFv)的表达和鉴定 目的:对从噬菌体抗体库中筛选的人源抗狂犬病毒单链抗体A12进行可溶性表达及特异性鉴定和中和活性检测.
方法:将表达人源单链抗体的菌株A12进行诱导后进行SDS-PAGE及Westernblot检测,用流式细胞仪(... 闭兰 张爱华 孙可芳 胡巧玲 祝玉桃 王志友 余模松关键词:单链抗体 可溶性表达 噬菌体抗体库 文献传递 利用生物信息学确定质粒中所含HIV基因片段相应特性 被引量:5 2003年 目的 确定质粒中所含HIV基因片段的来源以及相应表达产物的特性。方法 将质粒中的该段基因克隆到载体pUC19上进行测序后 ,利用生物信息学相关技术对该基因序列进行分析 ,并对其表达产物的基本特性作初步预测。结果 分析表明 ,该段基因与HIV ⅢB的同源性高达 99% ,属于HIVenv基因的序列 ,表达的产物含有HIVgp4 1和gp12 0的部分结构。结论 利用生物信息学的有关方法能迅速地对序列进行准确分析 ,有利于生物学、医学的迅速发展。 张涛 端义坤 余模松关键词:人免疫缺陷病毒 生物信息学 跨膜蛋白 人源抗乙型肝炎病毒表面抗原基因工程IgG全抗体的表达、纯化及初步鉴定 被引量:2 2007年 目的对人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体进行表达、纯化及初步鉴定。方法用含Fc片段抗-HBsAg Fab抗体基因的载体pAC-HBs-Fc,与杆状病毒线性DNA共转染昆虫细胞sf9,产生重组抗-HBsAg的全抗体。以不同浓度的HBsAg包被酶标板孔,用间接ELISA法检测培养上清中抗体的表达及特异性;用蛋白G亲和层析柱进行抗体的纯化,并对纯化的抗体进行SDS-PAGE、Western blot和竞争性ELISA分析。结果上清中表达的重组IgG抗体仅与HBsAg呈阳性反应,特异性良好,纯化后其纯度达97.1%。经SDS-PAGE和Western blot分析可见,IgG抗体轻链和重链的相对分子质量分别约为27000和55000,为人源IgG抗体。CHO表达的HBsAg和血源性HBsAg能竞争性抑制该重组IgG抗体与E.coli表达的HBsAg反应,其抑制率分别为55.9%和81.9%。结论人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体可在杆状病毒载体表达系统中成功表达。 黄仕和 周志军 彭祥兵 詹骞 张爱华 闭兰 余模松 梁米芳关键词:乙型肝炎病毒表面抗原 基因工程抗体 杆状病毒 纯化 噬菌体展示抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子的筛选和序列分析 被引量:2 2005年 目的 从自建的免疫噬菌体展示Fab抗体库中获得抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子 ,并进行基因序列分析。方法 采用纯化的乙型肝炎病毒表面抗原作为包被抗原 ,对自建的 4× 10 5Fab噬菌体抗体库进行富集筛选 ,从阳性强的次级库中挑选单个克隆菌 ,分别进行噬菌体ELISA、PCR和限制性内切酶鉴定后 ,再选取三者均为阳性的克隆菌进行基因序列分析。结果 共挑选了 6 0个单克隆菌株 ,其中噬菌体ELISA阳性有 2 7个 ,阳性率为 4 5 % ;PCR鉴定均为相应大小片段 ;限制性内切酶鉴定表明 2 7个阳性克隆菌中有 13个具有约 15 0 0bp的片段 ,其余均为约 75 0bp大小 ;BstOI酶切鉴定表明各克隆菌的酶切方式不同 ;选取 5个含约 15 0 0bp片段和 2个含约75 0bp片段的克隆菌株 ,经测序均为人免疫球蛋白基因 ,且重链分别属于VH3、VH4、VH5家族 ,轻链分别属于L5、L6、L8和 0 12 /0 2家族。结论 从自建的免疫噬菌体展示Fab抗体库中成功地获得了抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子。表明所构建的抗乙型肝炎病毒表面抗原的Fab抗体库的抗体基因具有多样性。 张爱华 端义坤 闭兰 赵亚杰 张智 阎莹 王志友 余模松关键词:FAB抗体 抗乙型肝炎病毒 表面抗原 噬菌体展示 人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体的表达和鉴定 被引量:4 2005年 目的对人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体A12进行可溶性表达及特异性和中和活性检测。方法表达人源单链抗体A12的菌株,经诱导后进行SDS-PAGE及Western blot检测,用流式细胞仪(FACS)检测表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染Vero细胞的能力,用快速荧光灶抑制实验(RFFIT)检测表达产物的中和活性。结果Western blot显示表达产物与抗C-myc抗体在相对分子质量约30 000处出现强阳性表达带。FACS表明A12与表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染的Vero细胞出现特异性反应。RFFIT表明,A12 ScFv在1∶27倍稀释时能完全中和病毒。结论已获得了A12可溶性表达,表达产物能与狂犬病毒G蛋白特异性结合,并对狂犬病毒具有一定的中和活性。 闭兰 张爱华 孙可芳 胡巧玲 祝玉桃 王志友 余模松关键词:单链抗体 基因表达 可溶性表达