余康
- 作品数：13 被引量：55H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项陕西省重大科技创新专项计划项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 西农萨能羊脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因的原核表达、纯化及多克隆抗体制备
- 2014年
- 在大肠杆菌中表达西农萨能羊脂肪分化相关蛋白(ADRP),并制备其多克隆抗体。以实验室保存的pMD19-T-ADRP质粒为模板,扩增ADRP的CDS区,将其克隆到pET32a(+)载体,阳性克隆转化到大肠杆菌菌株E.coli BL21(DE3)中诱导表达,优化融合蛋白表达条件,使用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白,纯化的ADRP蛋白经复性后免疫兔子制备多克隆抗体,ELISA和Western blot检测血清效价和特异性。结果表明:成功构建pET32a(+)-ADRP原核表达载体并诱导其表达,获得最佳表达条件,即37℃、0.5 mmol/L IPTG诱导6 h;ELISA检测显示抗体效价达1∶64 000;经Western blot鉴定,制备的多克隆抗体能特异性结合原核表达以及乳腺上皮细胞表达的ADRP蛋白。本实验成功表达、纯化了ADRP融合蛋白,获得具高特异性、高效价的兔抗ADRP多克隆抗体。
- 李芳罗军余康许会芬石恒波朱江江
- 关键词：ADRP原核表达多克隆抗体
- 日粮中添加脂肪酸钙或菜油对西农萨能奶山羊泌乳性能及乳品质的影响被引量：4
- 2014年
- 试验旨在研究日粮中添加脂肪酸钙或菜油对泌乳期西农萨能奶山羊产奶性能、乳成分及血浆生化指标的影响。采用单因素试验设计,将27只年龄、胎次、产奶量、泌乳期相近的健康奶山羊随机分为3组,每组9个重复,试验组I每天添加45 g脂肪酸钙,试验组II每天添加36 g菜油,对照组不添加。预试期10 d,正试期90 d。结果表明:1日粮添加脂肪酸钙或菜油分别使乳产量提高了2.67%和1.60%,但差异不显著(P>0.05)。2饲粮添加脂肪酸钙或菜油组试验羊乳中乳脂、全脂固形物呈下降趋势,试验组I乳脂降低的幅度最慢,对照组次之。其他指标差异均不显著(P>0.05)。3饲粮添加脂肪酸钙或菜油,试验组I血浆中葡萄糖含量下降趋势缓慢,试验组II次之;日粮中添加脂肪酸钙的试验组I血浆中尿素氮含量下降最快,对照组次之。其它各时期及各指标差异均不显著(P>0.05)。结果显示,饲粮中添加脂肪酸钙或菜油可提高乳蛋白的含量,减缓血浆中葡萄糖的下降趋势,降低血浆尿素氮含量,而添加脂肪酸钙更有利于提高奶山羊的泌乳性能。
- 姚大为罗军吴敏余康席立萌史怀平
- 关键词：西农萨能奶山羊脂肪酸钙菜油乳成分
- 不同蛋白质水平日粮对不同性别西农萨能羊羔羊生长发育的影响被引量：22
- 2013年
- 试验旨在研究不同性别和蛋白质水平对1～100日龄西农萨能羊羔羊生长发育的影响。选取同质性较好的新生公、母羔羊各80只,分别随机分到4个组中,每组40只羊,其中试验1、2组为母羊,试验3、4组为公羊,试验1、3组饲喂低蛋白质水平(17%)的颗粒料,试验2、4组饲喂高蛋白质水平(21%)的颗粒料。定期测量羔羊的体重和体尺指标并统计腹泻率,在试验结束当天采集血液进行生化指标分析,以确定适合西农萨能羊羔羊生长发育的颗粒饲料蛋白质水平。结果表明,在试验前中期,蛋白质水平对羔羊生长发育影响不显著(P>0.05),在此阶段可饲喂低蛋白质水平颗粒料以降低饲喂成本;而在试验中后期,高蛋白质水平可显著促进羔羊生长发育(P<0.05),在此阶段可饲喂高蛋白质水平颗粒料以保证羔羊良好的生长状况;体尺指标受日粮蛋白质水平影响较小,而高蛋白质水平日粮易引发羔羊腹泻,且在试验期内公羔羊较母羔羊表现出更快的生长发育趋势。因此,在羔羊培育中应控制高蛋白质水平饲料的饲喂量。
- 余康孙爽王玉红魏安民姚大为吴敏罗军
- 关键词：羔羊培育奶山羊蛋白质水平生长发育
- 日粮蛋白水平对不同性别1~100日龄西农萨能羊生长发育及血液生化指标的影响
- 本试验研究了性别和蛋白水平对1～100日龄西农萨能羊羔羊生长发育的影响。选取同质性较好的新生公母羔羊各80只,分别随机分到两个组中,每组40只羊,其中1、2组全为母羊,3、4组全为公羊,1、3组饲喂低蛋白水平(17％)颗...
- 余康罗军孙爽姚大维吴敏
- 关键词：羔羊培育奶山羊生长发育血液生化指标
- 文献传递
- 一种稳定表达山羊miR-103的腺病毒载体的构建方法及其应用
- 本发明公开了一种山羊miR-103的腺病毒载体的构建方法及其应用，其特征在于包括如下步骤：合成上、下游引物，以山羊miR-103DNA模板进行PCR扩增，其中所述上游引物为5’-CGC GATCGGTACCAACAGAA...
- 林先滋罗军赵旺生余康朱江江张犁苹
- 文献传递
- 奶山羊ADRP基因对GMEC脂滴的影响及其分子机制的初步研究
- 胞浆脂滴(Cytoplasmic lipid droplets, CLDs)(Martin and Parton2006)(Martin andParton2006)(Martin and Parton2006)(Mar...
- 余康
- 关键词：奶山羊脂滴ADRPRNAI脂质代谢转录调控
- 文献传递
- 日粮蛋白水平对不同性别1～100日龄西农萨能羊生长发育及血液生化指标的影响
- 本试验研究了性别和蛋白水平对1～100日龄西农萨能羊羔羊生长发育的影响。选取同质性较好的新生公母羔羊各80只,分别随机分到两个组中,每组40只羊,其中1、2组全为母羊,3、4组全为公羊,1、3组饲喂低蛋白水平(17%)颗...
- 余康罗军孙爽姚大维吴敏
- 关键词：羔羊培育奶山羊蛋白水平生长发育
- 文献传递
- 山羊SREBP-1基因的超表达对脂肪酸代谢相关基因表达的影响被引量：13
- 2012年
- 本研究旨在通过构建西农萨能羊固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)基因的重组腺病毒超表达载体,获得有感染性的病毒颗粒,并检测该基因过表达后对乳腺上皮细胞中脂肪酸代谢相关基因的影响,为进一步研究该基因在脂肪酸代谢及泌乳调控中的功能奠定基础。根据GenBank中收录的西农萨能羊SREBP-1基因的序列设计引物,PCR扩增后进行测序。将测序正确的目的基因连接到穿梭载体pAdTrack-CMV后并进行线性化,转化含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的大肠杆菌Escherichia coli BJ5183感受态细胞中进行同源重组,将重组成功的质粒进行PacⅠ酶线性化,转染HEK 293细胞进行重组腺病毒的包装、扩繁及滴度测定。病毒液感染原代乳腺上皮细胞,实时荧光定量检测SREBP-1超表达效果及对脂肪酸代谢相关基因的影响。结果表明:重组腺病毒质粒构建成功,腺病毒滴度为109U/mL。病毒液感染乳腺上皮细胞48 h后,SREBP-1基因表达量上升大约15倍,72 h后,表达量上调了30倍;对脂肪酸代谢相关基因的影响在72 h较为明显,其中,脂肪酸合酶(FASN)及酰基辅酶A羧化酶(ACC)均显著上调了大约两倍,过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)上调了大约1.5倍,肝素X受体(LXRα)及甘油三酯水解酶(ATGL)表达量升高了1.2倍;其中硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)表达水平无明显变化。表明在西农萨能羊乳腺上皮细胞中,SREBP-1能够促进脂肪酸合成相关基因的表达,对山羊乳腺脂肪酸代谢具有调控作用。
- 许会芬罗军李芳余康石恒波李君林先滋朱江江
- 关键词：山羊SREBP-1超表达
- 日粮中添加脂肪酸钙或菜油对西农萨能奶山羊泌乳性能及乳品质的影响
- 试验旨在研究日粮中添加脂肪酸钙或菜油对泌乳期西农萨能奶山羊产奶性能、乳成分及血浆生化指标的影响。采用单因素试验设计,将27只年龄、胎次、产奶量、泌乳期相近的健康奶山羊随机分为3组,每组9个重复,试验组I每天添加45 g脂...
- 姚大为罗军吴敏余康席立萌史怀平
- 关键词：西农萨能奶山羊脂肪酸钙菜油乳成分
- 文献传递
- 日粮中不同蛋白质和L-赖氨酸水平对西农萨能羊泌乳性能和血浆生化指标的影响
- 本试验旨在研究日粮中不同蛋白质和L-赖氨酸水平对西农萨能羊产奶性能和血浆生化指标的影响,以筛选泌乳母羊最佳日粮配方.采用2×2二因子完全随机试验设计,将48只泌乳量和体重比较接近,处于泌乳盛期(50天左右)的健康西农萨能...
- 吴敏罗军姚大为余康张伟
- 关键词：奶山羊饲料成分泌乳性能血浆生化指标
- 文献传递
