休贺明
- 作品数：4 被引量：28H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军白求恩国际和平医院更多>>
- 发文基金：河北省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脉络膜血管平铺及CD105染色在大鼠脉络膜新生血管研究中的评价意义被引量：2
- 2008年
- 目的评价异硫氰酸荧光素-右旋糖酐脉络膜血管平铺及CD105免疫组织化学染色作为分析指标在实验性脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)治疗研究中的意义。方法激光光凝方式建立棕色挪威大鼠CNV模型,30只大鼠随机分为治疗组、生理盐水组、对照组,每组各10只。分别给予Endostatin 20μL(5 g.L-1)、生理盐水20μL视网膜下注射、对照组光凝后不做处理,观察期为14 d。在光凝后第7天及第14天行颈动脉灌注异硫氰酸荧光素-右旋糖酐标记CNV,眼球标本制成脉络膜铺片进行CNV定量分析,组织病理切片光镜、CD105及因子Ⅷ免疫组织化学染色观察,比较不同检测方法在评价血管生成抑制剂对CNV治疗效应中的意义。结果造模后第7天,光凝部位CNV呈一高荧光团;光凝后第14天,表现为形态各异的高荧光微血管网;脉络膜血管平铺CNV定量分析显示,光凝后第14天Endostatin组CNV面积小于生理盐水组及对照组,Endostatin组CNV面积为(15.58±5.32)×103μm2,生理盐水组及对照组CNV面积为(24.01±4.67)×103μm2、(25.27±5.08)×103μm2(F=307.351,P<0.001);CD105免疫组织化学显示,光凝后第14天生理盐水组及对照组光斑内CD105及因子Ⅷ呈强阳性表达,各组在视网膜内核层及神经纤维层内皮细胞均无CD105阳性表达;光镜观察造模后第7天激光损伤部位呈纺锤样外观,外核层排列紊乱,光感受器外节消失,RPE屏障破坏,光斑处CNV形成;光凝后第14天,光凝斑部位脉络膜增厚,内皮细胞及微血管增生,大量CNV形成;Endostatin组内皮细胞增生数量及新生血管明显少于生理盐水组和对照组。结论脉络膜血管平铺于CNV定量评估具有一定意义;与因子Ⅷ的检测相比,CD105对于CNV的定性评估更具特异性;Endostatin可以有效抑制CNV的形成。
- 尚庆丽马景学尚忠林休贺明刘建宗
- 关键词：脉络膜新生血管激光血管生成
- 内皮抑素抑制脉络膜新生血管的实验研究被引量：14
- 2004年
- 目的 探讨内皮抑素蛋白抑制激光诱导的大鼠脉络膜新生血管 (CNV)的效果。方法采用基因重组方法获得内皮抑素蛋白 ,取BrownNorway大鼠 30只 (6 0只眼 ) ,用激光光凝方式建立CNV模型 ,随机分为内皮抑素组、生理盐水组及对照组 ,每组 10只 ,分别给予内皮抑素 2 0 μl(5g/L) ,生理盐水 2 0 μl视网膜下注射 ,对照组光凝后不做处理 ,观察期为 14d。应用激光共焦显微镜下脉络膜血管平铺法测量各组CNV面积 ,以荧光素眼底血管造影后荧光素渗漏程度、光镜下观察结果、CD10 5及因子Ⅷ免疫组化染色结果作为观察指标。结果 内皮抑素组CNV面积小于生理盐水组及对照组 (F=30 7 35 1,P <0 0 0 1) ;内皮抑素组各光凝斑荧光渗漏程度评分与生理盐水组及对照组间比较 ,差异有显著意义 (χ2 =13 711,P <0 0 0 1) ;光凝后 14d ,生理盐水组和对照组光凝区脉络膜层增厚 ,脉络膜毛细血管层内皮细胞增殖 ,新生血管增生 ,内皮抑素组内皮细胞增生数量及新生血管明显少于前两组 ;CD10 5、因子Ⅷ的阳性表达量明显降低 ;各组视网膜内核层及神经纤维层内皮细胞均无CD10 5阳性表达。结论 内皮抑素可以有效抑制CNV的形成 ,脉络膜血管平铺及CD10 5检测对于CNV的定性、定量评估具有一定意义。
- 尚庆丽马景学魏敬双尚忠林休贺明杨爱琴
- 关键词：内皮抑素脉络膜新生血管血管细胞黏附分子-1
- 两步酶分层消化法用于大鼠视网膜色素上皮细胞的培养被引量：7
- 2006年
- 目的探索体外分离、培养大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞的方法,建立其体外培养模式。方法采用两步酶分层消化法分离获取大鼠RPE细胞,F12培养液培养;生长曲线、细胞分裂时间等指标观察细胞生存活力及增生状态;光镜、免疫组织化学法形态学鉴别及细胞鉴定,电镜观察超微结构。结果收获的大鼠RPE细胞纯度高,量多,体外生长旺盛,达到融合的时间较短。原代细胞呈多角形,含大量色素;传代细胞呈梭形。电镜显示胞浆内含黑色素颗粒及各种细胞器。结论两步酶分层消化法是分离培养大鼠RPE细胞的理想方法,培养的细胞可用于RPE的体外实验研究。
- 尚庆丽马景学王萌吕兰存休贺明
- 关键词：视网膜色素上皮细胞
- 增殖型糖尿病性视网膜病变动物模型的建立被引量：6
- 2012年
- 目的建立模拟人类增殖型糖尿病性视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)的动物模型,并确证其价值。方法链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)60 mg/kg腹腔注射造成SD大鼠糖尿病模型1个月后行VEGF玻璃体注射制造增殖型糖尿病眼底病变模型(C组),观察造模后不同时间荧光素眼底血管造影(fluorescence fundus angiography,FFA)改变及有无CD105标记阳性的视网膜毛细血管内皮细胞,并与传统的非增殖型糖尿病眼底病变大鼠模型(B组)作比较。结果 FFA结果显示:正常组无1例观察到异常荧光;B组大鼠仅观察到背景荧光的增强;C组大鼠不仅出现了背景荧光增强、大血管扭曲和毛细血管扩张、视网膜血管荧光素渗漏、视网膜内出血等临床中常见的非增殖期病变,还观察到了视网膜新生血管这种增殖期糖尿病性视网膜病变特有的体征。光镜观察视网膜血管渗漏情况及免疫组化CD105标记视网膜内增殖的新生血管内皮细胞情况显示:正常组及B组大鼠无1例视网膜微血管碳素颗粒渗漏,CD105均为阴性;C1组(VEGF玻璃体注射后2周):仅观察到神经节细胞层大血管有碳素颗粒的渗漏,CD105阴性;C2组(VEGF玻璃体注射后4周):除C1组病变外,还可观察到外核层有渗漏至血管外的碳素颗粒,CD105阳性;C3组(VEGF玻璃体腔注射后8周):除C2组病变外,还可观察到黄斑区水肿、渗出等病理改变、广泛的微血管渗漏,CD105阳性。结论该动物模型成功地观察到视网膜新生血管,并与出现增殖内皮细胞的病程一致,经FFA及免疫组化CD105标记验证有很好的应用价值,并且周期短、更经济,为临床筛选药物研究提供了理想动物模型。
- 董白霞马景学叶存喜包永琴杨爱琴休贺明
- 关键词：增殖性糖尿病性视网膜病变动物模型荧光血管造影
