伍晓斌
- 作品数：12 被引量：31H指数：2
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：广东省教育厅科研项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 顶头孢青霉素扩环酶R308位点的饱和突变
- 青霉素扩环酶可以催化青霉素类化合物生成头孢类化合物,具有重要的工业应用前景。对青霉素扩环酶进行蛋白质工程改造,扩展其底物范围,是将其应用于工业化生产的重要基础。已有的研究表明扩环酶的C末端残基对于其活性具有显著影响。我们...
- 田秀云伍晓斌范可强杨克迁
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- β－环糊精蚓纤溶酶修饰酶的制备方法
- 本发明以蚯蚓血纤蛋白溶酶为原材料，用β-环糊精进行化学修饰。修饰酶(β-CDEFE)的稳定性得到提高。经药代动力学实验证明，β-CDEFE在体内的分布相半衰期为1h，是EFE的1.52倍。β-CDEFE对底物(酪蛋白)的...
- 高向阳徐凤彩詹福建伍晓斌谢晓生
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- 修饰蚯蚓纤溶酶的药代动力学研究被引量：3
- 2003年
- 环毛蚓纤溶酶经聚乙二醇(PEG)和β-环糊精(β-CD)修饰后,分别静脉注射到猪体内和兔体内进行药代动力学研究。结果表明PEG-EFE在猪体内的半衰期为0.96 h,而原酶在猪体内的半衰期为0.59h,PEG-EFE较原酶提高了1.62倍。β-CD-EFE注射于兔体内的药代动力学证明,β-CD-EFE在兔体内的分布相半衰期为1.00h,而原酶仅为0.65 h,β-CD-EFE较原酶的体内半衰期提高了1.52倍。说明2种修饰方法都是有效的。
- 伍晓斌王雪英徐凤彩
- 关键词：药代动力学
- 脱乙酰氧基头孢菌素C合成酶底物专一性改造的研究
- 本文为了增加该酶对青霉素G的催化能力，以两种来源的DAOCS基因(棒状链霉菌和产黄头孢)为模板进行error-pronePCR和DNAshuffling。将获得的1600多个可能含突变体扩环酶的克隆用Bioassay的方...
- 伍晓斌
- 关键词：定向进化定点突变底物
- 文献传递
- 棒状链霉菌扩环酶R306位点的定点突变
- 2006年
- 目的:通过对棒状链霉菌的脱乙酰氧基头孢菌素C合酶(DAOCS)C末端R306位点突变,改变酶的活力和底物专一性。方法:利用生物信息学和空间结构分析推测,利用定点突变技术,对DAOCS的C-末端R306位点进行定点突变。结果:将DAOCS的C末端R306位点突变为其它3种性质相异的氨基酸,显示酶的活力和底物专一性都有一定改变。结论:DAOCS的C末端修饰对于提高酶活力或改变酶的底物专一性是一个非常有效的策略。
- 莫宏波伍晓斌周翔刘誉
- 关键词：定点突变
- 蚯蚓血纤蛋白溶酶的修饰酶制备方法
- 本发明是涉及蚯蚓纤溶酶的修饰酶的制备，用活化的三聚氰氯对蚯蚓血纤蛋白溶酶进行修饰，经碱性缓冲液透析后得修饰酶。修饰酶在热稳定性和pH稳定性均强于原酶，其体内半衷期是原酶的1.4倍，且具有原料来源易、价廉、投资少等优点。
- 徐凤彩高向阳伍晓斌詹福建
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- β－环糊精蚓纤溶酶修饰酶的制备方法
- 本发明以蚯蚓血纤蛋白溶酶为原材料，用β－环糊精进行化学修饰。修饰酶(β－CDEFE)的稳定性得到提高。经药代动力学实验证明，β－CDEFE在体内的分布相半衰期为1h，是EFE的1.52倍。β－CDEFE对底物(酪蛋白)的...
- 高向阳徐凤彩詹福建伍晓斌谢晓生
- 文献传递
- 蚯蚓纤溶酶的分离和化学修饰及其应用的研究
- 蚯蚓纤溶酶(Earthwormfibrinolyticenzymes,EFE)是一种存在于蚯蚓体内的丝氨酸蛋白酶,属胰蛋白酶类,类似于血纤维蛋白溶酶,它能水解蛋白质底物(如酪蛋白)、碱性氨基酸的酯(如BAEE)及酰胺,并...
- 伍晓斌
- 关键词：蚯蚓纤溶酶化学修饰药代动力学
- 文献传递
- 蚯蚓纤溶酶化学修饰的研究被引量：1
- 2004年
- 以三聚氰氯为活化剂,采用活化聚乙二醇(PEG)对环毛蚯蚓纤溶酶进行化学修饰,优化了修饰条件,得到了PEGEFE的加合物(修饰酶),并研究了PEGEFE的部分酶学性质。修饰酶的活力为天然酶的85%,结果表明酶的活性中心基本保持不变。对修饰酶的残留氨基测定表明,70%的可滴定氨基参加了反应,且EFE的活性改变较小,可以推测PEG是连接在蛋白质表面上的。
- 莫宏波伍晓斌徐凤彩
- 关键词：修饰酶PEG化学修饰活性中心蚯蚓纤溶酶酶学性质
- 蚯蚓纤溶酶的分离纯化及其部分酶学性质的研究被引量：28
- 2003年
- 以野生环毛蚓 (Pheretima)为材料 ,经匀浆抽提、热变性、硫酸铵分步沉淀、SephadexG 75凝胶过滤和DEAE 纤维素离子交换柱层析等纯化步骤 ,得到纯度较高的蚯蚓纤溶酶 (EFE) ,具有强烈的溶解血纤维蛋白的作用。同时对酪蛋白和BAEE也具有较强的水解作用 ,但对ATEE无水解活性。实验表明蚯蚓纤溶酶能被苯甲磺酰氟强烈抑制 ,说明该酶是丝氨酸蛋白酶、属胰蛋白酶类。金属离子Na+、K+、Mg2 +对此酶有一定的抑制作用 ,Hg2 +对EFE有强烈抑制作用 ,而Ca2
- 王雪英伍晓斌徐凤彩
- 关键词：蚯蚓纤溶酶纯化酶学性质
