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镉暴露大鼠睾丸支持细胞金属硫蛋白表达的时相研究被引量：31: 2003年; 啮齿目动物的睾丸较肝脏对镉毒性更为敏感 .为阐明不同组织细胞的镉毒性分子机制 ,对镉暴露大鼠睾丸支持细胞与肝脏金属硫蛋白基因 (MT )的表达及镉蓄积进行了时相研究 .成年雄性SD大鼠低剂量镉(4 0 μmol/kg)皮下注射后 ,立即进行睾丸支持细胞和肝脏组织的分离 .采用RT PCR技术分析mRNA ,并用光密度扫描作半定量分析 ,蛋白质定量用ELISA方法 ,原子分光光度吸收法测定镉浓度 .结果显示 :镉暴露 1h后肝脏MTmRNA即有明显的诱导表达 ,3h达高峰 ;支持细胞也有明显的诱导表达 ,6h达高峰 .镉暴露后肝脏MT有明显的诱导表达 ,但睾丸支持细胞不但未见MT增加而且还稍有下降 .提示 :a 镉对MTmRNA的诱导表达具有时间依赖性和组织特异性 .b 镉虽然能诱导睾丸MT的转录 ,但没有促进其MT的合成。; 任绪义周雍张建鹏仲燕冯伟华焦炳华; 关键词：金属硫蛋白睾丸支持细胞睾丸组织

镉诱导大鼠睾丸三种类型细胞和肝脏金属硫蛋白基因表达的研究被引量：20: 2003年; 目的 :啮齿类动物睾丸较肝脏对镉毒性更敏感。通过对镉诱导早期大鼠睾丸三种类型细胞 (支持细胞、间质细胞和生精细胞 )与肝脏金属硫蛋白 (MT)及其亚型 MT1、MT2表达的研究 ,阐明大鼠睾丸对镉毒性较肝脏更敏感的分子机制。方法 :采用半定量 RT- PCR、EL ISA、原子分光光度吸收法 ,观察镉处理后不同时相大鼠睾丸三种类型细胞与肝脏 MT基因表达的变化。结果 :睾丸组织中存在 MT。同时还发现 0 h对照组大鼠镉处理后肝脏 MT m RNA增加并保持较高的基础水平 ,3h达峰值后下降 ;而睾丸支持细胞和间质细胞则在 6 h达高峰。镉中毒大鼠睾丸支持细胞和肝脏 MT1m RNA的变化幅度要低于MT2 m RNA,而在间质细胞中则相反。此外 ,生精细胞 MT1m RNA在镉处理后 0～ 3h减少 ,然后增加 ,而 MT2 m RNA的变化则相反 ,而且它们的诱导变化幅度较其他细胞低。镉暴露后肝脏 MT m RNA和 MT均升高 ,但在睾丸三种类型细胞中 MT的表达并没有增加。结论 :镉诱导后 MT m RNA的表达具有细胞和时间依赖性 ;镉虽然能诱导睾丸 MT m RNA的转录但没有促进其 MT的合成。; 张建鹏仲燕任绪义周雍冯伟华焦炳华; 关键词：镉睾丸支持细胞睾丸间质细胞生精细胞

东海贻贝抗菌肽Myticin A基因的克隆表达及其生物学活性被引量：14: 2005年; 目的:在毕赤酵母表达系统中表达贻贝抗菌肽Myticin A并检测其生物学活性。方法:提取贻贝总mRNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增得到DNA片段。PCR产物与pMD18 T连接,得到阳性重组载体pMD18 Myticin A。Myticin A基因插入载体pPIC9K中,得到的重组载体pPIC9K Myticin A转化至宿主菌中。得到高抗性阳性菌株并进行诱导表达。发酵上清进行Tricine SDS PAGE分析并用CM sepharose柱和Sephadex G 25柱纯化,Western印迹法鉴定并检测生物学活性。结果:获得重组载体pPIC9K Myticin A。高抗性多拷贝阳性表达菌株GS115/pPIC9K Myticin A经甲醇诱导后,Tricine SDS PAGE证实其相对分子质量为4 500,表达量为14%以上,纯化后纯度达到90%以上。Western印迹法证实所表达样品为Myticin A。表达样品对巨大芽胞杆菌的生长有抑制作用,对小鼠成纤维细胞(L929)、胰腺癌细胞(SW1990)、结肠腺癌细胞(LoVo)的生长均有明显抑制作用。结论:应用毕赤酵母表达系统能较好地表达抗菌肽Myticin A,生物学活性研究证实其具有抗革兰阳性菌作用,明显抑制肿瘤细胞生长。; 仲燕刘军华张建鹏冯伟华焦炳华; 关键词：抗菌肽贻贝重组质粒毕赤酵母基因表达

贻贝抗菌肽的研究进展被引量：6: 2004年; 贻贝中存在多种抗菌肽 ,根据一级结构的不同分为 4种 :defensin(防卫肽 )、mytilin、myticin和mytimycin。抗菌肽以前体的形式存在 ,在缺乏感染等刺激物的情况下 ,成熟前体以活性方式储存在血液中 ,当受到感染后便参与组织反应。它们的抗感染反应与哺乳动物吞噬细胞的作用相似 ,不同的抗菌肽具有不同的抗菌谱。抗菌肽是机体在进化过程中非特异性免疫系统中的一种。; 仲燕张建鹏冯伟华焦炳华; 关键词：抗菌肽贻贝 DEFENSIN

贻贝抗菌肽Myticin A的克隆表达及生物学活性研究: 近年来在海洋软体动物贻贝中发现了新的抗菌肽家族。该家族是由特定基因编码的一类具有广谱抗菌活性的小分子多肽，根据贻贝抗菌肽家族一级结构的不同可以将其分为4组：Defensins，Mytilins，Myticins和Myti...; 仲燕; 关键词：贻贝抗菌肽重组质粒毕赤酵母; 文献传递

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仲燕