于力
- 作品数：211 被引量：607H指数：14
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省科技攻关计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 牛细小病毒病毒样颗粒的组装及其免疫原性评价被引量：1
- 2014年
- 为研究牛细小病毒(BPV)VP2衣壳蛋白自组装病毒样颗粒(VLPs)以及VLPs的免疫原性。本研究以BPV-1型C7-5中国分离株的基因组序列为模板扩增VP2蛋白的编码基因,将其克隆至腺病毒穿梭载体p Shuttle-CMV中,利用E.coli BJ5183内同源重组将VP2基因插入腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1中,获得携带BPV VP2基因的重组腺病毒质粒(p Ad-BPV-VP2)。该重组质粒经PacⅠ线性化后转染Ad293细胞,获得重组腺病毒r Ad-BPV-VP2,第8代时滴度为107.25TCID50/m L。间接免疫荧光、western blot以及电镜观察结果显示,BPV VP2蛋白可以在腺病毒系统中稳定表达,并有效组装VLPs。将r Ad-BPV-VP2肌肉注射免疫BALB/c小鼠,结果显示,针对BPV的血清Ig G和中和(VN)抗体分别于加强免疫后2周和8周达最高水平,高峰抗体可持续至15周,VN抗体的最高滴度可达1∶4 000。此外,与对照小鼠血清相比,免疫小鼠血清中的IL-2、IL-4及IFN-γ含量显著升高(p<0.05)。结果表明,r Ad-BPV-VP2免疫小鼠后可以诱导机体产生针对BPV的特异性体液和细胞免疫。本研究为BPV的免疫预防及载体的开发奠定了基础。
- 张越常继涛于力
- 关键词：病毒样颗粒免疫原性
- 共表达O型FMDV衣壳蛋白和绿色荧光蛋白重组腺病毒的构建
- 2012年
- 为构建表达O型口蹄疫病毒(FMDV)的P12A3C基因及GFP基因的重组腺病毒rAdV-P12aEGFP2a3C,本研究以FMDV的2A基因序列为Linker,将报告基因EGFP插入FMDV的P12A与3C之间。重组腺病毒感染HEK-293细胞后可以观察到绿色荧光,表明EGFP蛋白获得表达。应用FMDV的VP2单克隆抗体4B2对重组病毒感染细胞进行western blot检测,反应条带与FMDV衣壳蛋白VP0和VP3的分子量大小相符,表明FMDV的完整衣壳蛋白和3C蛋白酶也均获得表达,而且EGFP的插入并未影响P1蛋白的表达和3C蛋白酶对P1的正确切割。重组腺病毒的生长特性分析表明,EGFP的插入也未影响该重组腺病毒的增殖特性。上述研究结果显示,表达FMDV衣壳蛋白P12A3C的重组腺病毒可以作为载体,以2A蛋白作为Linker表达一个小分子蛋白,为改进以腺病毒为载体的口蹄疫基因工程疫苗提供了新思路。
- 刘蒙蒙杨德成周国辉梁特于力
- 关键词：口蹄疫病毒绿色荧光蛋白
- 传染性喉气管炎病毒的分子生物学研究进展被引量：9
- 1996年
- 传染性喉气管炎病毒的分子生物学研究进展于力张绍杰童光志（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室１５０００１）传染性喉气管炎病毒（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｌａｒｙｎｇｏｔｒａｃｈｅｉｔｉｓｖｉｒｕｓ，ＩＬＴＶ）是疱疹病毒科的成员。该病毒感...
- 于力张绍杰童光志
- 关键词：传染性喉气管炎病毒分子生物学鸡病
- 猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)CH-la株N基因的分子克隆、序列测定及其比较分析被引量：25
- 1998年
- 根据已发表的ＰＲＲＳＶＩＡＦ－ｅｘｐ９１株的核酸序列，设计了一对特异性引物，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增了ＰＲＲＳＶＣＨ－ｌａ株的Ｎ基因，经补平和磷酸化后，克隆到ｐＵＣ１８ＳｍａＩ位点上。经电泳分析、酶切和ＰＣＲ鉴定证实后，进行序列测定。序列分析表明ＣＨ－ｌａ株与ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株（美洲型）Ｎ基因核苷酸同一性为９３．２％，氨基酸同一性高达９６．７％，而与ＬＶ株（欧洲株）核苷酸同一性为６３％，氨基酸同一性仅为５９％。其推导氨基酸残基分子量为１３．３ｋＤａ。根据ＣＨ－ｌａ株Ｎ基因推导的氨基酸残基缺少欧洲型毒株ＬＶ特有的两个氨基酸片段，表明ＣＨ－１ａ株与ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株同源性高于它与ＬＶ株的同源性，而且ＣＨ－１ａ株与鼠乳糖脱氢酶增高症病毒（ＬＤＶ）在进化关系上比ＬＶ株与ＬＤＶ更密切。ＣＨ－１ａ株Ｎ基因推导的氨基酸残基Ｎ－端１／２段约２６％是由Ａｒｇ、Ｌｙｓ和Ｈｉｓ这３种氨基酸组成的，其疏水性侧像图与ＬＶ株和ＶＲ－２３３２株（美洲型）几乎相同，这表明两种基因型的核衣壳蛋白（Ｎ蛋白）具有一定的保守性。由于Ｎ蛋白是ＰＲＲＳＶ所有结构蛋白中免疫原性比较强的病毒蛋白，是现行血清学试验的抗原基础，因此Ｎ基因的分子克隆为研制ＰＲＲ?
- 仇华吉童光志郭宝清王柳张绍杰王玫于力刘宝全
- 关键词：猪病PRRSVN基因分子克隆
- 产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体及其应用
- 本发明公开了产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体及其应用。本发明将野生型产气荚膜梭菌ε毒素成熟毒素的第71位酪氨酸突变为非芳香族氨基酸，获得了对于细胞或动物体减毒的ε毒素突变体。本发明进一步公开了含有所述产气荚膜梭菌ε毒素减毒突...
- 于力姜志刚常继涛
- 文献传递
- 哈尔滨兽医研究所牛羊传染病研究创新团队:关注的重点及其研究进展
- <正>2013年6月,中国农业科学院启动科技创新工程,此举是农业部、财政部等部门加强农业科技创新、探索国家创新体系建设的一项重大举措。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所大动物病研究室的牛羊病和口蹄疫部分,组建成为牛羊传染病研...
- 于力薛飞朱远茂周国辉王芳常继涛王海伟杨德成姜志刚
- 文献传递
- 哈尔滨兽医研究所牛羊传染病研究创新团队:关注的重点及其研究进展
- 2013年6月,中国农业科学院启动科技创新工程,此举是农业部、财政部等部门加强农业科技创新、探索国家创新体系建设的一项重大举措。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所大动物病研究室的牛羊病和口蹄疫部分,组建成为牛羊传染病研究创新...
- 于力薛飞朱远茂周国辉王芳常继涛王海伟杨德成姜志刚
- Leachii支原体中国分离株及其分离培养基和用途
- 本发明公开了一株Leachii支原体中国分离株及其分离培养基和用途。本发明所分离的Leachii支原体中国分离株的微生物保藏号是：CGMCC No.3808。本发明还公开了适合于所述Leachii支原体中国分离株的分离或...
- 于力常继涛刘海军
- 文献传递
- 口蹄疫病毒一个共享抗原表位的鉴定和精确定位
- 口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的一种主要侵害偶蹄动物的急性、热性、高度接触性动物传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物传染病之首,我国也将其列为一类动物传染病的第一位。在我国,防控口蹄疫的...
- 于永忠赵磊周国辉张春媛于力
- 文献传递
- O型口蹄疫病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达被引量：3
- 2013年
- 为构建表达O型口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白的重组杆状病毒,本研究将FMDV O/YS/CHA/05株的P12A和3C基因克隆于pFastBac1载体中,构建重组转移质粒pFast-P12A3C,将其转化DH10Bac感受态细胞,获得重组杆粒rBacmid-P12A3C。将该重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,制备重组杆状病毒rBV-P12A3C。间接免疫荧光试验(IFA)检测表明,获得的重组杆状病毒在Sf9细胞中能够表达O型FMDV衣壳蛋白。Western blot分析显示,FMDV的衣壳蛋白和3C蛋白酶均获得表达,并且3C蛋白酶对结构蛋白进行了正确切割。重组蛋白表达的动力学分析显示,表达的FMDV衣壳蛋白具有良好的反应原性,并且在重组杆状病毒感染Sf9细胞后第4 d蛋白表达量达到最大。该重组杆状病毒的构建,为研究FMDV空衣壳的体外组装以及O型FMDV空衣壳疫苗的开发建立了实验基础。
- 梁特杨德成刘蒙蒙周国辉孙超魏萍于力
- 关键词：O型口蹄疫病毒衣壳蛋白杆状病毒表达
