于丹
- 作品数:3 被引量:35H指数:2
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- 螺旋毛壳ND35几丁质酶的纯化和性质
- 以胶体几丁质为诱导物,内生菌螺旋毛壳(Chaetomium spirole)ND35通过在SMCS液体培养基中振荡培养, 获得了具几丁质酶活性的粗酶液。经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换层析及Pheny...
- 白复芹刘晓光李惠于丹李静高克祥
- 关键词:几丁质酶纯化酶学性质
- 文献传递
- 螺旋毛壳ND35几丁质酶的纯化和性质被引量:5
- 2006年
- 以胶体几丁质为诱导物,内生菌螺旋毛壳(Chaetomium spirale)ND35通过在SMCS液体培养基中振荡培养,获得了具几丁质酶活性的粗酶液。经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换层析及Phenyl-Sepharose疏水层析,并通过SDS-PAGE鉴定,纯化了一种分子量约为42kDa的几丁质酶。其最适反应温度为40℃,在30℃以下很稳定;最适pH值为5.5,在pH 5-8.5范围内均较稳定;酶活性受Hg\+\{2+\}、Fe\+\{3+\}、Zn\+\{2+\}、Cu\+\{2+\}、Mg\+\{2+\}等金属离子不同程度的抑制,Na+对酶有轻微的激活作用;以胶体几丁质为底物时,该酶的米氏常数Km为1.72mg ml\+\{-1\},最大反应速度Vmax为21.18 Uml\+\{-1\}。
- 白复芹刘晓光李惠于丹李静高克祥
- 关键词:几丁质酶纯化酶学性质
- 螺旋毛壳ND35 β-1,3-葡聚糖酶的诱导、性质及其抑菌作用被引量:31
- 2005年
- 以病原菌Rhizoctonia solani的细胞壁为诱导物,模拟毛壳菌自然的重寄生过程,研究了内生真菌螺旋毛壳(Chaetomium spirale)ND35 β-1,3-葡聚糖酶的产酶条件、性质,尤其是不同碳源的调控作用。结果表明,不同种类的真菌细胞壁及几丁质 和昆布多糖,均可诱导产生β-1,3-葡聚糖酶,而作为分解代谢产物的葡萄糖则抑制产酶。经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose 阴离子交换层析及Phenyl-Sepharose疏水层析,并通过SDS-PAGE鉴定,纯化了一种分子量约为73 kDa的内切β-1,3-葡聚 糖酶GLUC73。其最适反应温度为55℃,在40℃以下较稳定;最适pH值为5.5,在pH 5-9范围内均很稳定;酶活性受 Hg2+、Fe3+、Zn2+、Mg2+等金属离子不同程度的抑制,Mn2+和Co2+对酶有激活作用;以昆布多糖为底物时,该酶的米氏常数 Km为0.412 mg·mL-1,最大反直速度Vmax为3.876 U·mL-1。粗酶液同时具有β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性,离体抑 菌试验表明,对苹果炭疽病菌(Glomerella cingulata)、杨树腐烂病菌(Valsa sordida)、苹果树腐烂病菌(Valsa mali)的菌丝 生长和孢子萌发有明显的抑制作用。通过对β-1,3-葡聚糖进行免疫细胞化学标记和超微结构观察,间接证明了β-1,3-葡 聚糖酶在螺旋毛壳重寄生过程中的作用。
- 郭晓高克祥印敬明白复芹马迎新于丹刘晓光
- 关键词:3-葡聚糖酶酶学性质抑菌作用