乔卿华
- 作品数:10 被引量:4H指数:1
- 供职机构:第四军医大学基础医学部更多>>
- 发文基金:中国肝炎防治基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 用于病毒研究的人源化小鼠研究进展被引量:1
- 2014年
- 人源化小鼠从起初的人-鼠嵌合体到目前具有人体免疫活性的模型不断演进,已用于人免疫缺陷病毒、EB病毒、丙型肝炎病毒和登革病毒等病原体的感染、发病机制和防治的研究,取得了很大进展。我们简要介绍几种有代表性的人源化小鼠模型及其在病毒研究中的应用。
- 乔卿华韩佩君汪爱勤尹文
- 关键词:病毒免疫反应
- DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析工作站特殊故障两例分析
- 2007年
- 乔卿华张卉
- 关键词:尿沉渣定量分析工作站R/S2003DIASYS分析仪器
- 丙型肝炎病毒NS3-5B转基因小鼠模型的构建
- 2015年
- 目的:构建表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3-5B蛋白的转基因小鼠模型。方法:显微注射线性化p IRES2-EGFP-NS3-5B载体到小鼠受精卵,制备并传代筛选HCV NS3-5B转基因小鼠;通过血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)检测和肝脏HE染色,对6周龄转基因小鼠进行肝功能评价。结果:PCR、RT-PCR和Western印迹结果表明HCV NS3-5B转基因小鼠构建成功;6周龄部分转基因小鼠血清ALT和AST值升高,但差别无统计学意义,肝组织形态无改变。结论:构建了HCV NS3-5B转基因小鼠模型,为进一步在体研究HCV复制复合体建立了平台。
- 赵海卫韩佩君姚敏吕欣雷迎峰杨敬乔卿华翁代慧党品香尹文
- 关键词:丙型肝炎病毒转基因小鼠模型
- HCV NS3-5B转基因小鼠模型的构建
- 目的 构建表达HCV NS3-5B蛋白的转基因小鼠模型。方法 显微注射线性化pIRES2-EGFP-NS3-5B载体到小鼠受精卵,制备并传代筛选HCV NS3-5B转基因小鼠;通过血清ALT、AST检测和肝脏HE染色对6...
- 赵海卫吕欣雷迎峰姚敏乔卿华韩佩君张芳琳徐志凯尹文
- 关键词:丙型肝炎病毒动物模型
- HCVNS3-5B转基因小鼠模型的构建
- 目的:构建表达HCV NS3-5B 蛋白的转基因小鼠模型。方法:显微注射线性化pIRES2-EGFP-NS3-5B 载体到小鼠受精卵,制备并传代筛选HCV NS3-5B 转基因小鼠;通过血清ALT、AST 检测和肝脏HE...
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- 关键词:丙型肝炎病毒动物模型
- 表达丙型肝炎病毒核心蛋白的人肝癌稳定转染细胞株的建立与鉴定被引量:2
- 2014年
- 目的建立能表达丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV core)的人肝癌细胞SMMC-7721的稳定转染细胞株。方法构建含目的基因HCV core的重组质粒,转染HEK293T细胞,包装获得含ZsGreen和HCV core基因的慢病毒后,感染SMMC-7721人肝癌细胞,采用实时荧光定量PCR检测HCV core mRNA表达,采用免疫荧光细胞化学染色和Western blot法检测HCV core蛋白表达,筛选稳定表达HCV core的细胞株。结果质粒酶切和序列测定证实重组载体构建正确;慢病毒包装48 h后可见清晰ZsGreen表达,感染SMMC-7721细胞后筛选获得稳定转染的细胞株,实时荧光定量PCR检测到HCV core mRNA,免疫荧光细胞化学染色和Western blot法均检测出HCV core蛋白表达。结论成功构建了表达HCV core蛋白的SMMC-7721人肝癌细胞的稳定转染细胞株。
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- 关键词:丙型肝炎病毒核心蛋白肝癌细胞株慢病毒
- 丙型肝炎病毒(HCV)非结构区NS3-5B蛋白的真核表达载体构建及其在BHK-21细胞中的表达被引量:1
- 2013年
- 通过PCR方法扩增出HCV NS3-5b全长基因序列,克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP中,构建重组质粒pIRES2-EGFP-NS3-5b。利用脂质体将该质粒转染至BHK-21细胞,通过荧光成像和Western Blot检测NS3-5b基因的表达。结果显示成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-NS3-5b,并且NS3/4A蛋白和NS5B蛋白得到特异性表达,为下一步建立HCV RdRp活性的细胞评价系统和动物模型评价系统奠定了实验和理论基础。
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- 表达丙型肝炎病毒核心蛋白的人肝癌稳定转染细胞株的建立与鉴定
- 目的建立能表达丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV core)的人肝癌细胞SMMC-7721的稳定转染细胞株。方法构建含目的基因HCV core的重组质粒,转染HEK293T细胞,包装获得含绿色荧光蛋白ZsGreen和HCV c...
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- 关键词:丙型肝炎病毒核心蛋白肝癌细胞株慢病毒
- 文献传递
- 表达森林脑炎病毒NS5蛋白的转基因小鼠模型构建与鉴定
- 2017年
- 目的建立能够表达森林脑炎病毒NS5蛋白的转基因小鼠模型,为评价TBEV感染时RdRp酶的活性提供研究平台。方法将线性化的pRP.ExBi-EF1α-NS5-IRES-eGFP质粒显微注射入FVB/N小鼠受精卵雄原核,移入假孕母鼠输卵管内,构建并筛选转基因首建鼠;首建鼠传代并筛选出遗传性状稳定的纯合子转基因小鼠;检测TBEV NS5基因的表达。结果成功筛选出5只转基因首建鼠并传代至F5代,PCR、RT-PCR及Western blot检测结果表明,转基因小鼠成功表达了TBEV NS5基因。结论成功构建了表达森林脑炎病毒NS5蛋白的转基因小鼠模型。
- 乔卿华吕欣姚敏党品香徐志凯鄂玲玲尹文汪爱勤
- 关键词:森林脑炎病毒
- 实时检测HCV RdRp酶活性的真核表达载体的的构建与功能检测
- <正>目的构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-(-)5′UTR-EMCV IRES-DsRed2-rvGLuc-(-)3′UTR并进行功能检测。方法设计含有HCV负链5′UTR序列、负链3′UTR序列、EMCVIRE...
- 韩佩君吕欣雷迎峰杨敬姚敏乔卿华翁代慧赵海卫党品香尹文
- 文献传递