黄静燕
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 供职机构:南京农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 豚鼠精子获能和超激活运动机理的研究
- 本试验的目的是研究Caz+和HC03-调节豚鼠精子体外获能、超激活运动和蛋白酪氨酸磷酸化的信号机制。
1 cAMP促效物对豚鼠精子获能、超激活运动和蛋白酪氨酸磷酸化的作用
将豚鼠精子分别于TALP、缺...
- 黄静燕
- 关键词:哺乳动物获能精子
- 文献传递
- 转化生长因子β1对奶牛乳腺组织细胞凋亡及HSP70蛋白表达的影响被引量:3
- 2009年
- 应用乳酸脱氢酶(LDH)活力测定、透射电镜、免疫组化和Caspase-3活性分析等技术,检测转化生长因子β1(TGF—β1)对奶牛乳腺组织细胞活性、凋亡和HSP70蛋白表达的影响。用10ng·mL^-1TGF—β1处理乳腺组织48h,分别在不同时间点收集组织和培养液检测各指标,以0h不加TGF—β1作为对照组。结果显示,随TGF—β1作用时间的延长组织细胞活率逐渐降低,24h和48h组显著低于对照组(P〈0.05),LDH活性逐渐升高,6、12、24和48h组极显著高于对照组(P〈0.01)。处理12、24和48h组织DNA发生断裂;Caspase-3活性在24h达到高峰,并极显著高于对照组(P〈0.01);上皮细胞逐渐由腺泡脱落,腺泡塌陷,但间质结构基本完整;超微结构观察显示,48h时上皮细胞呈现染色质凝集、线粒体肿胀等明显凋亡特征,而成纤维细胞胞浆致密、线粒体丰富,结构较完整、处理3~12h后组织过表达HSP70,且均显著高于对照组(P〈0.05)。结果提示:TGF—β1以促进上皮细胞凋亡的方式促进奶牛乳腺发生退化。
- 狄和双杨媛媛王利刚崔群维程凯宁黄静燕王根林
- 关键词:乳腺组织细胞凋亡
- TGF-β_1对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡及HSP70蛋白表达的影响被引量:2
- 2008年
- 【目的】探讨TGF-β1对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡和HSP70蛋白表达的影响。【方法】TGF-β1作用乳腺上皮细胞不同时间,收集细胞及培养液,应用MTT检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡率、比色法检测LDH活性、琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整性、Western bolt技术分析HSP70蛋白的表达量。【结果】1、5、10ng·ml-1的TGF-β1均能抑制乳腺上皮细胞的增殖,且随浓度增加抑制作用加大,呈现剂量依赖性,其中10ng·ml-1TGF-β1组与对照组差异显著(P<0.05);10ng·ml-1TGF-β1作用于乳腺上皮细胞,随着作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐升高,其中6、12和24h与对照组相比差异极显著(P<0.01);LDH活力随作用时间延长而升高,12、24h与对照组差异极显著(P<0.01);DNA完整性随TGF-β1作用时间的延长发生不同程度降解;TGF-β1作用2~6h细胞大量表达HSP70,6h达到高峰,而后下降,2~12h的表达量均极显著高于对照组(P<0.01)。【结论】TGF-β1可以抑制奶牛乳腺上皮细胞的增殖,具有浓度依赖性。10ng·ml-1TGF-β1可以显著增加细胞凋亡率,提高细胞培养液中LDH活力,使细胞DNA发生不同程度的降解,同时HSP70蛋白随TGF-β1作用时间发生显著的表达变化。本试验结果表明,TGF-β1可以以促进上皮细胞凋亡的方式,促进奶牛乳腺发生退化。
- 狄和双杜娟张中霞黄静燕崔群维程凯宁王根林
- 关键词:乳腺上皮细胞HSP70
- 酪氨酸磷酸化蛋白在体外获能豚鼠精子上的分布与表达被引量:2
- 2007年
- 为研究豚鼠精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的变化规律,将豚鼠精子悬浮于改良的TALP获能培养基中,在5%CO2孵箱37℃培养,以精子与金霉素(CTC)荧光结合类型为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术和Western blot方法检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布以及酪氨酸磷酸化水平的变化。结果显示,随着获能的进行,发生蛋白酪氨酸磷酸化的精子占总精子的百分比增加,由未获能前的36%增至获能7h时的92%。酪氨酸磷酸化的蛋白分布变广,由精子头部扩增至精子头部、鞭毛主段和中段。另外,有80,45,40kDa的三种蛋白发生酪氨酸磷酸化,其中40kDa的蛋白酪氨酸磷酸化水平自精子体外培养后呈递增趋势,45kDa的蛋白酪氨酸磷酸化自培养3h后发现并呈递增趋势,而80kDa的蛋白酪氨酸磷酸化水平在精子培养3h时最高,后呈递减趋势。
- 孔丽娟李忠浩黄静燕代婷婷王根林
- 关键词:精子获能酪氨酸磷酸化
- 不同获能时间豚鼠精子运动参数分析被引量:2
- 2008年
- 目的:评价精子运动参数在研究豚鼠精子超激活运动中的作用,进一步确定豚鼠精子超激活运动的指标。方法:采用计算机辅助精液分析(CASA)系统检测豚鼠精子不同孵育时间(0、1、3、5、7h)的运动参数。结果:豚鼠精子孵育过程中精子曲线运动速度(VCL)、平均路线速度(VAP)、头部侧摆幅度(ALH)随孵育时间的增加而提高,并在5h达到最大值,而直线运动速度(VSL)、直线性(LIN)、向前性(STR)、鞭打频率(BCF)随孵育时间的增加而降低,并在5h达到最低值。结论:豚鼠精子获能培养过程中在发生超激活运动前精子的运动方式可发生很大的变化。
- 徐璐黄静燕崔群维王根林
- 关键词:精子计算机辅助精液分析