魏颖娟
- 作品数:5 被引量:1H指数:1
- 供职机构:湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 强疏水性、低丰度的整合质膜蛋白质分级提取与鉴定
- 占基因编码蛋白质20-30%的整合膜蛋白有重要生物学意义,然而这类蛋白质具有强疏水性、低丰度的特点,其蛋白质组学研究在方法上具有挑战性。为了鉴定大鼠肝脏低丰度,强疏水性的质膜蛋白质,我们通过两次蔗糖密度梯度离心纯化质膜,...
- 张丽军王细娥彭霞熊继先魏颖娟陈平谢锦云梁宋平
- 文献传递
- 鼠肝质膜蛋白质组研究的方法评估被引量:1
- 2007年
- 细胞质膜是细胞中重要的细胞器,在肝功能的发挥中具有非常重要的作用.使用蔗糖密度梯度离心纯化细胞质膜,通过电子显微镜观察和免疫印迹法检验膜的纯度.结果显示,与组织匀浆成分相比,质膜富集了20倍,线粒体的污染减少了约50%.提取的蛋白质用二/一维凝胶电泳(2DE/1DE)分离、胰酶酶解、电喷雾四极杆飞行时间质谱(ESI-Q-TOF)和基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF)鉴定,或者提取的蛋白质直接进行溶液内酶解、液相色谱串联电喷雾离子阱质谱(LC-LTQ)(鸟枪法)鉴定.一共鉴定了547个非冗余蛋白质,其中34%为质膜或质膜相关蛋白质.优化和评估了质膜蛋白质组研究的方法,且对鼠肝质膜蛋白质组进行了系统的分析.
- 陈平张丽军李选文王细娥曹锐刘珍熊继先彭霞魏颖娟银兴峰王贤纯梁宋平
- 关键词:细胞质膜蛋白质组鸟枪法
- C57小鼠肝脏质膜蛋白质组学分析
- 肝脏的细胞质膜作为细胞内外物质与信息交换,以及细胞内外因子识别的靶标所在场所,在肝脏细胞生命活动中发挥着重要作用。本研究采用两种策略分离得到C57小鼠肝脏细胞质膜。方法之一:采取小鼠肝门静脉原位灌流急性分离肝细胞,对分离...
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- 文献传递
- 肝质膜蛋白质组研究中染色方法比较及优化
- 2007年
- 对肝脏质膜蛋白质组进行了5种染色方法比较实验,发现荧光染的质谱鉴定准确性高于快速银染(Blum银染),快速银染又高于普通银染(Plus OneTM).考染中G-250的效果比R-350好,且背景低、快速.对考染后切取了高丰度蛋白质点后的胶块再进行快速银染,可以既提高鉴定的准确性也不丢失低丰度蛋白质.
- 张丽军魏颖娟熊继先贾小芳谢锦云梁宋平
- 关键词:银染
- 鼠肝质膜蛋白质组方法学研究
- 本文以鼠肝质膜为研究对象,旨在优化提取、纯化以及鉴定质膜蛋白质的方法。主要进行了两个方面的实验:(1) 纯化鼠肝质膜蛋白质方法学研究;(2) 肝质膜蛋白质组研究中染色方法比较及优化。
第一方面的实验以鼠肝为材料...
- 魏颖娟
- 关键词:双水相蛋白质组
- 文献传递