马迎辉
- 作品数：6 被引量：24H指数：2
- 供职机构：上海中医药大学附属龙华医院更多>>
- 发文基金：上海市教委科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展被引量：14
- 2009年
- 脊髓损伤的治疗一直是医学界的难题。脊髓损伤后神经元轴突再生困难,同时神经胶质瘢痕阻碍再生轴突的通过。嗅鞘细胞是一种特殊的神经胶质细胞,具有中枢神经系统(CNS)星形胶质细胞和外周雪旺氏细胞的特性,许多基础与临床研究发现嗅鞘细胞是神经系统中具有促进神经轴突再生,引导轴突正确生长的独特细胞,取得了一定的成果,为脊髓损伤的修复带来了希望。
- 胡志俊马迎辉
- 关键词：嗅鞘细胞脊髓损伤
- 痿症方联合嗅鞘细胞移植对脊髓慢性压迫损伤后神经营养素3表达的影响被引量：2
- 2008年
- 背景:中药痉证方、痿证方具有促进神经营养因子分泌的作用已经诸多实验结果证实,而脊髓功能恢复与神经营养素3的表达与分泌有密切的关系。目的:实验拟观察痿症方联合嗅鞘细胞移植对脊髓慢性压迫损伤后神经营养素3的影响。设计、时间及地点:对照动物实验,细胞学观察,于2005-11/2007-03在上海中医药大学脊柱病研究所完成。材料:新生SD雄性大鼠10g采用酶消化法培养嗅鞘细胞。3月龄雄性SD大鼠以螺钉持续性压迫大鼠C4脊髓的方法建立脊髓慢性压迫动物模型。痿症方由上海中医药大学脊柱病研究所提供,成分为炙黄芪、党参、炒白术、当归。方法:造模1个月后分为:模型组,后路椎板减压,继续喂养2个月;DF12培养液组:注入等剂量DMEM/Ham's F-12培养基,继续喂养2个月。嗅鞘细胞组:嗅鞘细胞移植,按1μL/点在距离脊髓压迫区域上下0.5mm处取4点注射109L-1嗅鞘细胞,注入速度为1μL/min,继续喂养2个月。含药血清培养嗅鞘细胞组:进行经痿症方含药血清培养的嗅鞘细胞移植,按1μL/点脊髓内注射109L-1嗅鞘细胞,注入速度为1μL/min,继续喂养2个月。中药灌胃组:痿症方中药连续灌胃1个月,继续喂养1个月。设立正常对照组。主要观察指标:应用ELISA抗原竞争法、PT-PCR方法检测各组大鼠神经营养素3蛋白及mRNA的变化。结果:与模型组、DF-12培养液组比较,痿症方和嗅鞘细胞移植治疗后脊髓组织中神经营养素3蛋白及神经营养素3 mRNA表达均明显增加。痿症方含药血清培养的嗅鞘细胞移植与单纯嗅鞘细胞移植相比,脊髓组织中神经营养素3蛋白及神经营养素3 mRNA表达增加明显。与单纯痿症方相比,痿症方含药血清培养的嗅鞘细胞移植脊髓组织中神经营养素3增加不明显,差异不显著,神经营养素3 mRNA表达差异显著(P<0.01)。结论:痿症方和嗅鞘细胞移植均可促进脊髓组织中神经营养素3的表达,
- 马迎辉胡志俊周重建王拥军施杞
- 关键词：嗅鞘细胞神经营养素3
- 新生鼠嗅鞘细胞培养的几种纯化方法的比较
- 2009年
- 目的对文献报道的嗅鞘细胞(OEC)纯化方法进行比较,寻找一种较优化的纯化方法,为细胞移植修复脊髓损伤实验研究提供高纯度的种子细胞。方法实验分别比较了3种纯化方法:差速贴壁法、差速贴壁法联合阿糖胞苷化学纯化法、差速贴壁法联合NGFRp75抗体纯化法纯化原代培养的新生SD大鼠的OEC,并对纯化的OEC的形态学和免疫学特性等进行观察。结果与另两种纯化方法相比,差速贴壁法联合NGFRp75抗体纯化法得到的OEC不仅纯度高而且细胞活性好。结论该实验找到了一种纯化OEC的较优化方法——差速贴壁法联合NGFRp75抗体纯化法,此法得到的细胞较符合细胞移植的要求,为下一步细胞移植修复脊髓损伤实验研究打下了细胞学基础。
- 胡志俊马迎辉王拥军舒冰周重建
- 关键词：嗅鞘细胞细胞培养细胞免疫组织化学
- 益气化瘀方对大鼠腰神经根损伤后生长相关蛋白-43与蛋白基因产物9.5的作用
- 目的：探讨益气化瘀方在神经再生修复过程中对神经肌肉接头部(NMJs)生长相关蛋白-43(growth-associated protein-43，GAP-43)及蛋白基因产物9.5(Protein Gene Produc...
- 周重建舒冰马迎辉王拥军刘梅施杞
- 关键词：神经肌肉接头生长相关蛋白43益气化瘀方
- 文献传递
- 嗅鞘细胞移植对脊髓慢性压迫形态和脑源性神经营养因子表达的影响被引量：1
- 2008年
- 背景:嗅鞘细胞是介于星形胶质细胞和许旺细胞之间的一类特殊的胶质细胞,具有切实有效的促进神经再生修复的作用,但其相关机制还没确定。目的:观察嗅球成鞘细胞移植对脊髓慢性压迫损伤后脊髓功能形态和脑源性神经营养因子的影响,以及嗅鞘细胞移植后脊髓慢性压迫损伤动物脊髓功能的修复。设计、时间及地点:对照动物实验,细胞学观察,于2005-11/2007-03在上海中医药大学脊柱病研究所完成。材料:新生SD雄性大鼠采用酶消化法培养原代大鼠嗅鞘细胞,并将其制成细胞悬液。雄性3月龄SD大鼠以螺钉持续性压迫大鼠C4脊髓建立脊髓慢性压迫动物模型。方法:造模后大鼠分为模型组、嗅鞘细胞组、DMEM/Ham’sF-12培养液组、正常组,每组12只。嗅鞘细胞组在距离脊髓压迫区域上下0.5mm处选4点注射,按1μL/点脊髓内注射109L-1嗅鞘细胞,注入速度为1μL/min。主要观察指标:应用光学显微镜、电子显微镜观察脊髓形态的变化,采用免疫组织化学、PT-PCR的方法检测脊髓组织脑源性神经营养因子的分泌,以改良的Gale联合行为评分法对脊髓功能进行评定,结果:免疫组织化学检测显示,嗅鞘细胞移植能部分改善大鼠脊髓灰质神经细胞的凋亡程度,延缓白质神经纤维的减少,促进髓鞘的修复与再生。与模型组、DMEM/Ham’sF-12培养液组比较,嗅鞘细胞移植治疗后脊髓组织中脑源性神经营养因子表达明显增加(P<0.01)。与模型组、DMEM/Ham’sF-12培养液组比较,嗅鞘细胞移植能较大程度的改善大鼠脊髓功能(P<0.05)。结论:嗅鞘移植能够部分改善脊髓损伤后脊髓组织的病理形态,促进脊髓组织中脑源性神经营养因子的表达,减轻脊髓慢性压迫后的功能损害。
- 马迎辉胡志俊周重建王拥军施杞
- 关键词：嗅鞘细胞脑源性神经营养因子
- 酶消化法体外分离培养的大鼠嗅鞘细胞形态及表型特征被引量：7
- 2007年
- 目的:目前国内外研究介绍的嗅鞘细胞培养方法存在繁杂或重复性差的问题,不利于实际应用。为此实验应用酶消化法体外分离培养大鼠嗅鞘细胞,观察其形态学及表型特征。方法:实验于2005-11/2006-03在上海中医药大学附属龙华医院脊柱病研究所完成。①选取新生1周龄雄性SD大鼠1只,浸入体积分数为0.75的乙醇中3min,碘伏消毒。打开前颅,暴露嗅球,完整取下两个嗅球,放入4℃预冷的DMEM抗菌液中清洗2遍,洗掉嗅球表面的血液等杂质,剥下嗅球被膜,将嗅球用眼科剪剪碎,加入质量浓度为2.5g/L的胰酶,在37℃孵育箱磁力搅拌下孵育15min,DMEM终止消化。细胞液过100μm细胞筛,离心去除上清液,用DMEM稀释细胞浓度至1×109L-1,种植于无包被处理的6孔细胞培养板内常规培养。按差速贴壁法在培养18～20h后吸出细胞悬液,重新种植于包被神经生长因子低亲和力受体p75的6孔细胞培养板内。观察细胞生长情况,每2～3d换液1次,培养14d。②将培养不同时间的嗅球成鞘细胞于倒置显微镜、透射电镜下观察其形态变化,并行苏木精-伊红染色。使用免疫组化法检测嗅鞘细胞的特征性标志神经生长因子低亲和力受体p75的表达情况,阳性表达为棕黄色,无着色为阴性。结果:①倒置显微镜形态学观察:差速贴壁培养第2天可见有较多嗅鞘细胞贴壁生长,细胞突起较短,胞体较大,透亮度一般,成团或散在生长,较难辨认细胞的形态。5～6d可见较典型的嗅鞘细胞形状,主要以梭形和多突起细胞为主,细胞立体感强、透亮、杂质细胞较少、本底清楚,亦可见有少量成纤维细胞开始生长。9d时嗅鞘细胞数量明显增加,其生长方向呈较一致的条索状。至14d无论在细胞数量及质量上都呈明显的降低趋势。②苏木精-伊红染色结果:细胞多呈梭形,还可见扁平细胞,核为圆形或椭圆形,有时见双核,胞浆充实无空泡。③透射电
- 胡志俊马迎辉周重建王拥军
- 关键词：嗅球表型研究嗅鞘细胞
