马所峰
- 作品数：19 被引量：124H指数：7
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金黑龙江省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 卵丘颗粒细胞核移植克隆猪的初步研究被引量：15
- 1999年
- 经颗粒细胞核移植已成功获得克隆小鼠(Wakayamaetal.1998,Nature394:369)。在牛,卵丘颗粒细胞核移植胚胎也已经发育到囊胚期(Collasetal.1994,MolReprodDev38:264)。然而,目前在猪尚未见到有关颗粒细胞核移植成功的报道。为此,我们进行了颗粒细胞核移植培育克隆猪的研究。...
- 孙兴参岳奎忠邹贤刚刘忠华于元松周佳勃王爱国马所峰谭景和
- 关键词：克隆细胞核移植卵丘细胞囊胚
- 猪卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡现象的检测被引量：5
- 2002年
- 目的 验证猪卵泡闭锁过程中是否存在细胞凋亡及其发生的范围。 方法 用透射电镜观察猪各类卵泡的超微结构 ,对颗粒细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳图谱分析 ,对颗粒细胞涂片进行了DNA末端原位标记(TUNEL)及HE染色检测。 结果 猪的闭锁卵泡中存在大量的凋亡颗粒细胞 ,而健康卵泡中凋亡颗粒细胞则很少 ;对颗粒细胞涂片进行DNA末端标记和常规HE染色检测所得到的颗粒细胞凋亡比例分别为 :健康卵泡TUNEL法为 9% ,HE法为 3 6 % ;闭锁卵泡TUNEL法为 39 2 % ,HE法为 34 % ,尽管两种方法检测的结果之间有差异 ,但两者之间的相关系数达到 0 94。 结论 猪卵泡闭锁过程中确实存在细胞凋亡现象 ,并且凋亡细胞主要集中于颗粒层 ;
- 刘忠华梁轶群岳奎忠王玉琢赵亚旭马所峰陈清轩谭景和
- 关键词：颗粒细胞卵泡细胞凋亡透射电镜
- 卵泡表面直径判断山羊卵母细胞的发育能力被引量：4
- 2004年
- 试验探讨了山羊卵泡表面直径与实际直径的相关性及卵泡直径与卵母细胞直径和卵母细胞发育能力的关系。结果显示:(1)山羊卵巢表面直径1.5～2.5mm以上卵泡,其表面直径和实测直径相关性显著(r=0.72),可以利用表面直径对这群卵泡进行分类;(2)表面直径1.5～2.5mm以上卵泡,其卵母细胞已经达到最大直径(约130μm),透明带体积也达到最大(约7×105μm3);在此之前的有腔卵泡,卵母细胞直径和透明带体积均随着卵泡直径增加而增加;(3)不同直径卵泡其卵母细胞减数分裂能力不同:≤0.5mm直径卵泡卵母细胞未获得恢复减数分裂的能力;0.8～1.2mm直径卵泡卵母细胞可恢复减数分裂,但只能发育到M 期;1.5～2.5mm和3.0～5.0mm直径卵泡卵母细胞可恢复减数分裂并发育到M 期,24h时M 期比率分别为93%和91%。
- 马所峰苗义良李威兰国成王子玉罗明玖常仲乐谭景和
- 关键词：山羊卵母细胞发育能力透明带
- 性未成熟小母猪注射PMSG对卵泡闭锁及颗粒细胞凋亡的影响被引量：12
- 2002年
- 为探讨孕马血清促性腺激素 (PMSG)对 2～ 3月龄性未成熟的小母猪卵巢中卵泡发育、卵泡闭锁以及卵泡颗粒细胞凋亡的影响 ,就其注射 PMSG后 2 4、4 8、72、96 h卵巢中各类卵泡数量、颗粒细胞凋亡比例及外周血浆中类固醇激素水平等进行了研究。结果如下 :(1)未注射 PMSG前 ,性未成熟小母猪卵巢表面卵泡总数 (10 .5个 /卵巢 )及各类卵泡数 (小卵泡 9个 /卵巢 ,中等卵泡数 1.5个 /卵巢 )均较少 ;注射 PMSG后 2 4 h,小卵泡数 (2 4个 /卵巢 )、中等卵泡数 (6 .5个 /卵巢 )和大卵泡数 (1.5个 /卵巢 )与对照组相比均明显增多 ;至注射 PMSG后 96 h,小卵泡数 (4.5个 /卵巢 )和中等卵泡数 (1.5个 /卵巢 )均明显减少 ,但大卵泡数量仍较多 (4.5个 /卵巢 )。 (2 )未注射 PMSG前 ,性未成熟小母猪各类卵泡中的颗粒细胞凋亡比例均较高 ,小卵泡和中等卵泡分别为 2 4 .8%和 34.4 % ;注射 PMSG后 2 4 h,颗粒细胞凋亡比例显著降低 (P<0 .0 5 ) ,小卵泡和中等卵泡分别为 10 .7%和 13.7% ;至注射 PMSG后 72 h,小卵泡和中等卵泡的颗粒细胞凋亡比例开始显著升高 (P<0 .0 5 ) ,而大卵泡在出现后颗粒细胞凋亡比例较低且无较大波动。 (3)在未注射PMSG前 ,血清中的雌二醇含量仅为 15 .3ng/L,孕酮则由于含量太低而未能检测到 ;在注射
- 刘忠华刘海兰岳奎忠马所峰陈清轩谭景和
- 关键词：小母猪PMSG卵泡颗粒细胞细胞凋亡卵泡发育
- 注射hCG后不同时间猪所排卵泡内COC的形态和卵母细胞减数分裂进程被引量：4
- 2002年
- 研究了超排处理注射 h CG后不同时间猪卵丘卵母细胞复合体 (COC)的回收率和形态、卵母细胞减数分裂进程以及 COC形态与生发泡 (GV)染色质构型之间的关系。结果表明 :(1)注射 h CG后 4 h COC的回收率为 5 3.1% ,明显低于注射 h CG后 18、2 2、2 4 h(71.2 %、76 .5 %、70 .0 % ,P<0 .0 5 ) ;(2 )注射 h CG后 18、2 2、2 4 h收集的 COC分别有98.9%、98.0 %、91.4 %的卵丘已经发生扩展 ,而注射 h CG后 4 h收集的 COC则无一发生卵丘扩展 ;(3)注射 h CG后 4h,有少量卵母细胞开始恢复减数分裂 ,至 18h左右开始发生生发泡破裂 (GVBD) ,到 2 2～ 2 4 h有 5 8.4 %～ 6 0 .0 %的卵母细胞发生 GVBD;(4)外层卵丘扩展、放射冠轻微扩展的卵母细胞处于 GV- 1期的比例 (6 9.6 % )明显高于卵丘完全扩展的卵母细胞 (47.8% )和放射冠部分扩展、卵丘已经脱落的卵母细胞 (2 9.3% ) ,而后 2者发生 GVBD的比例(40 %、4 4 % )则略高于前者 (2 7% )。
- 孙兴参伊亚玲岳奎忠马所峰冯兴军谭景和
- 关键词：HCG减数分裂进程卵母细胞
- 血清和促性腺激素对山羊卵母细胞核体外成熟的影响被引量：2
- 2002年
- 试验研究了血清和促性腺激素对山羊卵丘扩展和卵母细胞核成熟的影响 ,卵母细胞与卵丘扩展的关系以及卵丘扩展与卵母细胞核成熟的关系。结果表明 :(1)培养 2 4 h,添加 PMSG组卵母细胞核成熟率显著高于不加激素组 (P<0 .0 5 ) ,而培养到 2 7h,2者成熟率之间差异变得不显著 ,说明添加 PMSG对卵母细胞核的最终成熟率没有明显影响 ,但加速了卵母细胞核的成熟进程 ;(2 ) M199+BSA培养 2 7h,卵母细胞核成熟率显著高于培养 2 4 h,而 M199+FCS培养 2 7h与培养 2 4 h的成熟率差异不显著 ,说明添加 BSA时 ,卵母细胞核体外成熟速度比添加 FCS的慢 ;(3)卵丘扩展良好与扩展不好的卵母细胞核成熟率以及第 1极体形态无统计学差异 ,说明山羊卵母细胞的核成熟可能不依赖于卵丘扩展 ;(4)山羊的卵丘扩展并不依赖于卵母细胞 ;(5 )将带壁颗粒细胞与不带壁颗粒细胞的 COC分开培养发现 ,2者卵母细胞核成熟率无明显差异 ,带有壁颗粒细胞的 COC卵丘扩展情况明显优于一般
- 马所峰苗义良兰国成王子玉常仲乐谭景和
- 关键词：促性腺激素山羊卵母细胞体外成熟
- 山羊体细胞克隆技术的研究
- 谭景和兰国成常仲乐罗明久姜运良韩东吴延光马所峰王君佐王慧利樊新忠于元松韩正滨王玉
- 该成果对山羊体细胞克隆过程中的卵母细胞成熟、去核和激活等技术环节进行了研究，并在此基础上把胎儿成纤维细胞、皮肤成纤维细胞和卵丘细胞核分别植入由屠宰场卵巢获得的卵母细胞中，组成重构胚移植到受体母羊，成功出生了3只体细胞克隆...
- 关键词：
- 关键词：山羊体细胞克隆
- 影响小鼠体细胞脂质体法转染效率的因素被引量：10
- 2005年
- 本实验主要研究脂质体量、质粒量、细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间、细胞传代次数以及细胞种类对转基因效率的影响.首先研究了脂质体量、质粒量和细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间对小鼠胎儿成纤维细胞(MFFC)的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响.结果表明,在本实验条件下,用传至3代的MFFC,24孔培养板中每孔接种4-10×104个细胞,70%-90%贴满程度,当脂质体(LipofectAMINE)4μg、质粒(pEGFP-N1)0.3μg,复合物作用时间为6h时获得的转染效率最高,为30.7%.用此方案比较不同传代次数的MFFC转染效率结果表明,原代细胞的转染效率为10.0%,3代为28.9%,到15代降到7.2%.说明随着传代次数的增加,转染效率逐渐降低.将MFFC、小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和小鼠颗粒细胞(MGC)分别传至3代,采用上述方案进行转染,转染效率分别是27.8%、13.7%和14.2%.可见不同种类细胞的转染效率不同.细胞周期检测表明,无论是不同代次的细胞还是不同种类的细胞,其转染效率高低与M期所占比例的多少有关.这为如何提高转染效率提供了有利的依据.
- 于建宁苗德强马所峰谭秀文袁继红谭景和
- 关键词：基因转移脂质体小鼠体细胞转染效率脂质体法
- 发情周期不同时期猪卵泡颗粒细胞凋亡的观察被引量：8
- 2002年
- 为探讨猪发情周期不同时期卵泡发育和闭锁的规律及机理 ,本实验通过TUNEL原位标记、H .E .染色以及放射免疫测定等手段研究了猪发情周期不同阶段卵巢表面各类卵泡数量的变化、各类卵泡中颗粒细胞的凋亡比例、闭锁卵泡的形态变化以及发情周期各阶段血清孕酮及雌二醇水平的变化等问题。卵泡的总数在发情间期最多 ,为 2 6 8个 /卵巢 ,发情期最少 ,为 7 4个 /卵巢。小卵泡的数量在发情间期最多 ,为 15个 /卵巢 ,在发情期数量最少 ,为 5 7个 /卵巢。中等卵泡数量在发情间期最多 ,为 8 5个 /卵巢 ,在发情后期卵巢中无中等卵泡。大卵泡的数量在发情前期最多 ,为 7 4个 /卵巢 ,在发情后期最少 ,为 0个。小卵泡的颗粒细胞凋亡比例(各时期平均 2 1 0 3%)显著高于大卵泡 ,在发情后期显著降低。中等卵泡的颗粒细胞凋亡比例 (平均 16 6 %)在发情前期显著低于其它各期。大卵泡的颗粒细胞凋亡比例 (平均 11 2 %)在发情周期各阶段无显著差异 ,均显著低于中等卵泡和小卵泡。
- 刘忠华马所峰岳奎忠刘海兰陈清轩谭景和
- 关键词：发情周期卵巢
- 山羊卵母细胞减数分裂进程及HX对其调控机理的研究
- 目前胚胎工程技术研究和开发（如体外生产胚胎和体细胞克隆等）需要大量高质量的成熟卵母细胞,但利用屠宰动物卵巢卵母细胞经过体外成熟培养而获取的卵母细胞质量还远不如体内成熟卵母细胞,其原因一般认为是由于缺乏体内主卵泡阶段的获能...
- 马所峰
- 关键词：卵母细胞卵泡减数分裂次黄嘌呤山羊
- 文献传递
