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顺铂与足叶乙甙对白血病细胞K562的协同杀伤作用及其机制被引量：4: 2005年; 背景与目的:足叶乙甙(etoposide,VP鄄16)为白血病化疗最常用的化疗药之一,其临床应用日益受到天然与继发耐药的影响。对一些实体瘤的研究发现顺铂(cisplatin,DDP)与VP鄄16联合应用具有协同效应。本研究通过DDP与VP鄄16联合作用杀伤白血病细胞K562,探讨其增强VP鄄16疗效的作用机制。方法:采用VP鄄16(0,5μg/ml)与不同浓度DDP(0,0.3,3,15,30μg/ml)联合对K562细胞进行处理。应用噻唑蓝(MTT)法检测用药后细胞的存活相对数量,计算VP鄄16和DDP应用对K562细胞的抑制作用;AO/EB双荧光法定量分析细胞凋亡率。半定量RT鄄PCR法和Westernblot检测拓扑异构酶(topoisomerase,TOPO)Ⅱα、Ⅱβ、Sp1、Sp3基因的mRNA和蛋白水平。结果:VP鄄16与DDP合用具有明显的协同效应。两药合用后,细胞凋亡率明显增加。单独应用DDP可以明显上调TOPOⅡ和Sp1表达(呈浓度依赖,TOPOⅡα、Ⅱβ、Sp1在30μg/mlDDP时比正常对照分别上调36%,25%和75%),并使Sp3的表达降低49%;单用5μg/mlVP鄄16时TOPOⅡ则下调(TOPOⅡα下降72%),TOPOⅡβ和Sp1的表达未受影响,Sp3的表达上调14%。5μg/mlVP鄄16与DDP联合应用具有协同效应,使TOPOⅡ和Sp1表达水平升高。TOPOⅡα、Ⅱβ、Sp1在5μg/mlVP鄄16与30μg/mlDDP联合应用时比单用VP鄄16分别上升83%,11%,58%,但低于单独应用DDP的表达水平;而Sp3的表达水平与单独应用DDP比较下调61.3%。Western印迹检测结果与RT鄄PCR结果相符。结论:DDP在化疗中与VP鄄16发挥协同作用,通过上调拓扑异构酶Ⅱ的表达水平,为VP鄄16提供更多的靶酶,使VP鄄16杀伤K562细胞效果明显提高。; 马卫东阴梅云蒋常文徐世荣翟丽东郑力芬王彦玲闫蕴力; 关键词：转录因子SP1

上调Sp1表达对小细胞肺癌耐药细胞的化疗增敏作用被引量：2: 2007年; 探讨转录因子Sp1对人小细胞肺癌足叶乙甙耐药细胞H446/VP的化疗增敏作用。采用脂质体转染Sp1质粒进入细胞,MTT法检测细胞对足叶乙甙作用的半数抑制浓度(IC50);AO/EB双荧光染色观察细胞死亡率;RT-PCR和Western印迹检测Sp1、拓扑异构酶Ⅱα(Topo Ⅱα)和拓扑异构酶Ⅱβ(Topo Ⅱβ)mRNA和蛋白质表达。结果:细胞转染Sp1质粒后IC50明显降低,细胞死亡率明显增加。RT-PCR和Western印迹检测可见,H446/VP-Sp1细胞中Sp1、Topo Ⅱα的mRNA和蛋白质表达量均较转染前明显增加,而Topo Ⅱβ表达无显著性差别。研究表明,上调Sp1表达可提高人小细胞肺癌耐药细胞中Topo Ⅱα的表达,为Topo Ⅱ抑制剂类药物提供了更多的作用靶点,使细胞对Topo Ⅱ抑制剂类药物的敏感度提高。; 王彦玲马卫东蒋常文赵俊霞周娜静郑力芬赵娟闫蕴力; 关键词：转录因子SP1 小细胞肺癌足叶乙甙

转录因子Sp1、Sp3对K562白血病细胞增殖、凋亡及耐药性影响的研究: 目的：急性白血病(acuteleukemia，AL)是血液系统常见的恶性疾病，近年来其发病率有逐年上升的趋势。随着新的化疗药物的不断出现以及造血干细胞移植技术的不断进步，其近期和远期疗效有了明显的提高，但是有些患者在治疗...; 马卫东; 关键词：白血病多药耐药足叶乙甙转录因子

外源性IL-18基因对C6胶质瘤细胞周期及相关基因表达的影响被引量：3: 2006年; 目的:本研究拟从分子水平探讨IL-18基因转染对C6胶质瘤细胞周期及其相关基因表达的影响。方法:用流式细胞仪检测C6/IL-18细胞周期、细胞增殖指数的变化;以MTT法检测细胞的增殖活性及细胞抑制率,用RT-PCR、Western blot分析C6/IL-18细胞PCNAc、yclin D1c、yclin B1、p21 mRNA及蛋白的表达。结果:与C6/LXSN细胞及亲代C6细胞相比,C6/IL-18细胞周期有所改变,表现为G0/G1期细胞增多、G2/M期细胞减少,细胞增殖指数(PI)与细胞增殖活性降低。C6/IL-18细胞的PCNAc、yclin D1c、yclin B1 mRNA及蛋白表达降低,p21 mRNA及蛋白表达增高。结论:外源性IL-18基因表达可降低C6细胞的增殖活性,下调PCNA,cyclin D1,cyclin B1表达,上调p21基因表达,其作用机制有待进一步研究。; 蒋常文闫蕴力马卫东高庆华王彦玲周娜静; 关键词：白细胞介素18 细胞周期细胞周期蛋白质类 C6细胞

外源性IL-18基因对C6胶质瘤细胞增殖及相关基因表达的影响被引量：1: 2006年; 目的:研究IL-18基因转染对C6胶质瘤细胞增殖活性及相关基因表达的影响.方法:用流式细胞仪观察C6/IL-18细胞周期、增殖指数的变化;用RT-PCR,蛋白印迹、免疫细胞化学方法分析C6/IL-18细胞cyc lin D1,cyc lin B1,Bc l-2 mR-NA及蛋白的表达.结果:与亲代C6细胞相比,C6/IL-18细胞表现为G0/G1期细胞增多、G2/M期细胞减少,细胞增殖指数(PI)降低.C6/IL-18细胞的cyc lin D1和cyc lin B1,Bc l-2 mR-NA及蛋白表达降低.结论:外源性IL-18基因可降低C6细胞的增殖活性,其机制可能与Bcl-2,cyclin B1和cyclin D1表达下调有关.; 蒋常文闫蕴力马卫东高庆华申园郑力芬王彦玲周娜静; 关键词：细胞周期蛋白 C6胶质瘤细胞增殖指数

IL-18基因转染对大鼠C6胶质瘤细胞生长特性的影响被引量：6: 2005年; 探讨IL-18基因转染对大鼠C6胶质瘤细胞生长特性的影响。用MTT法和流式细胞术检测C6/IL-18细胞和C6细胞的增殖特性和细胞周期分布。免疫细胞化学检测C6/IL-18细胞和C6细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)、波形蛋白表达。结果显示,与C6细胞相比C6/IL-18细胞的增殖能力降低,G0/G1期细胞增多而G2/M期细胞减少;PCNA、波形蛋白表达降低。研究表明,IL-18基因具有抑制C6胶质瘤细胞增殖、降低其恶性程度的作用。; 蒋常文闫蕴力马卫东郑力芬翟丽东李文玲曹翠丽; 关键词：C6胶质瘤细胞细胞增殖基因治疗

急性白血病患者cyclin B1表达的临床意义: 目的：该研究旨在探讨cyclin B1在白血病发生、发展中的作用及对成人急性白血病患者预后的判断价值.结论：cyclin B1在成人急性白血病中有过度表达和异常周期分布,使急性白血病细胞的增殖发生异常,说明cyclin ...; 马卫东; 关键词：细胞周期素B1 白血病半定量逆转录-聚合酶链反应流式细胞术; 文献传递

顺铂增强替尼泊甙杀伤小细胞肺癌细胞系的作用: 2006年; 目的通过顺铂(CDDP)与替尼泊甙(VM-26)联合作用,探讨顺铂增强替尼泊甙对小细胞肺癌细胞株杀伤作用的机制。方法用MTT法,测定H446小细胞肺癌细胞24 h抑制率;AO/EB双荧光染色观察细胞活率;琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂条带;半定量RT-PCR及蛋白印迹检测DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)及特化蛋白1(SP1)的表达。结果CDDP与VM-26联合应用有明显的协同效应;二药合用与单独用药相比,细胞活率明显降低,DNA损伤程度增加。H446细胞经CDDP单独作用可以促进SP1、TopoⅡα和TopoⅡβmRNA及蛋白的表达;经VM-26单独作用后,TopoⅡα和TopoⅡβmRNA及蛋白表达降低,而SP1表达无明显改变;二药合用后可见TopoⅡαmRNA及蛋白的表达比单独应用CDDP下调,SP1 mRNA及蛋白的表达比单用VM-26升高,但与单用CDDP相比没有明显变化。结论CDDP通过上调SP1促进H446细胞中TopoⅡ表达,为TopoⅡ抑制剂类药物VM-26提供更多的作用靶点,能够明显提高对小细胞肺癌的抑制作用。; 翟丽东李雪梅闫蕴力李云生马卫东蒋常文周娜静; 关键词：小细胞肺癌顺铂替尼泊甙

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马卫东

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