马克军
- 作品数：9 被引量：25H指数：3
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 兔BK通道β亚基多克隆抗血清的制备被引量：1
- 2005年
- 目的:用小鼠制备抗兔BK通道β亚基的抗血清。方法:采用RT-PCR扩增编码兔BK通道β亚基胞内段的基因。在大肠杆菌中表达GST-β亚基融合蛋白。以从PAGE凝胶上切下的融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗血清。用ELISA和Westernblot鉴定抗血清的特异性。结果:用RT-PCR扩增出约300bp的兔BK通道基因。序列分析显示,扩增的序列与已发布的新西兰大白兔骨骼肌BK通道的序列完全一致。在E.coliDH5α成功地表达Mr约为37000GST-β亚基融合蛋白。ELISA和Westernblot检测证明,针对GST-β亚基融合蛋白的抗血清,不仅可特异性地识别GST-β,也可识别源于兔组织的β蛋白。抗血清的最高滴度达1∶128000。结论:克隆了编码兔BK通道β亚基胞内段的基因,并成功地获得可特异性识别新西兰大白兔BK通道β亚基的高滴度抗血清,为BK通道的进一步研究提供了物质基础。
- 王亚蓉魏经国孙强马克军张孝勇张艳霞韩骅
- 关键词：BK通道抗体
- 高胆固醇对兔oddi括约肌BK通道β1亚基蛋白表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:研究高胆固醇作用下兔oddi括约肌(SO)钙依赖性钾通道β1亚基蛋白水平的变化。方法:制备鼠抗兔SO细胞钙依赖性钾通道β1亚基抗血清,进行免疫组化染色,观察高胆固醇对oddi括约肌钙依赖性钾通道β1亚基蛋白表达的影响。结果:免疫组化染色显示,高胆固醇组SO细胞钙依赖性钾通道β1亚基的蛋白表达降低,半定量分析显示,高胆固醇兔oddi括约肌BKca通道β1亚基蛋白表达水平与对照组比较有统计学意义。结论:高胆固醇可下调兔oddi括约肌BKca通道β1亚基蛋白表达的水平,从而影响BKca通道的功能。
- 杜滂魏经国崔光彬王亚蓉张孝勇马克军
- 关键词：胆固醇Β1亚基ODDI括约肌
- 兔大电导钙敏感性钾离子通道β亚基的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2007年
- 目的:克隆新西兰白兔大电导钙敏感性钾离子通道(BKCa)β亚基基因,观察其组织分布,并对其进行生物信息学分析.方法:采用3′及5′cDNA末端快速扩增(RACE)及RT-PCR技术从兔Oddi括约肌(SO)组织获得BKCa通道β亚基的全长cDNA序列.并应用生物信息学方法分析该基因的同源性、蛋白结构域及跨膜拓扑结构.结果:兔BKCa通道β亚基基因cDNA全长为1168bp,开放读窗长度为576bp,编码191个氨基酸.生物信息学分析表明该基因核酸序列及氨基酸序列与人类及其它哺乳动物有很高的同源性;拓扑结构为两次跨膜蛋白,具有4个功能结构域,含有1个磷酸化位点及2个N-糖基化位点.结论:首次成功地从兔SO组织克隆出BKCa通道β亚基基因,获得新GenBank号DQ821756,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.
- 张孝勇崔光彬杜滂马克军王亚蓉韩苇颜真张英起魏经国
- 关键词：CDNA末端快速扩增ODDI括约肌生物信息学
- 构建医学影像学教学新体系的探索被引量：5
- 2008年
- 医学影像学是一门实践性很强的学科,医学模式的巨大变化及军事变革对人才培养要求的改变,要求学员从知识记忆型向知识学习、能力塑造、素质培养全方位型转变;其中学生的实践工作能力、独立学习能力及未来发展能力的塑造最为重要。通过对教学内容体系及教育支撑体系的改革,逐步形成＂框架构建、分层填充、递进拓展＂三段交互式教学模式,充分体现了重框架、重基础、重能力、重发展的教学理念,适应了卫生服务体系和卫生服务模式的深刻变革对军事医学本科生的要求。
- 陈宝莹王玮魏龙晓马克军王亚蓉
- 关键词：医学影像学教学模式素质教育
- 高胆固醇血症兔Oddi括约肌细胞钾离子通道活性的改变被引量：2
- 2007年
- 目的:研究高胆固醇血症(hypercholesterolemia,HC)兔胆管Oddi括约肌(SO)收缩反应及钾离子通道活性的变化情况,并探讨其机制.方法:将24只新西兰雌兔随机分成两组,HC模型组和对照组各12只,分别取两组SO组织制备成离体肌环,观察SO肌环对KCl及钾离子通道阻断剂盐酸四乙铵(TEA)和4-氨基吡啶(4-AP)的收缩反应,并采用Western blot技术,检测两组兔SO组织中钾离子通道的表达情况.结果:60mmol/LKCl所诱发的HC组和对照组SO肌环的收缩力分别为1.23±0.08g和1.52±0.11g,HC组的收缩反应明显高于对照组(t=5.89,P<0.05).以1mmol/L为浓度梯度累积加入TEA,从3mmol/L至8mmol/L,HC组SO肌环对TEA的相对收缩反应在各个浓度点均明显低于对照组(t=2.72,P<0.05).以2mmol/L为浓度梯度累积加入4-AP,从8至18mmol/L,HC组SO肌环对4-AP的相对收缩反应在各个浓度点均较对照组显著降低(t=4.71,P<0.05).蛋白免疫印迹半定量分析显示HC组SO组织BKCa通道相对光密度为0.36±0.06,对照组为0.84±0.03,HC组BKCa通道蛋白表达量明显降低(t=3.18,P<0.05).结论:HC兔SO肌环的收缩反应增强,SO细胞BKCa及KV通道活性降低,BKCa通道蛋白表达量降低,这可能是导致HC兔发生SO功能紊乱的原因之一.
- 张孝勇马进杜滂马克军王亚蓉魏经国
- 关键词：高胆固醇血症ODDI括约肌钾离子通道
- 高胆固醇血症兔Oddi括约肌张力的变化机制被引量：8
- 2004年
- 目的:观察高胆固醇血症(hypercholesterolemia,HC)兔离体Oddi括约肌(sphincter of oddi,SO)张力的变化,探讨其作用机制. 方法:新西兰雌兔24只随机分成两组:对照组和HC模型组各12只,分别取两组SO制备成离体肌环,观察SO的自主收缩运动及其对KCl和Ca2+的收缩反应,以及对硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)和硝苯吡啶(nifedipine, Nif)的舒张反应. 结果:HC组的自主收缩频率高于对照组(P<0.05,t=2.86), 自主收缩波幅较对照组降低(P<0.05,t=2.48).以10 mmoL/L 为浓度梯度累积加入KCI至90 mmoL/L,HC组对中低浓度KCl(10-40 mmoL/L)收缩反应高于对照组(P<0.01, t=4.01);两组最大收缩力无显著差异,且均可被3 μmoL/L Nif完全缓解.用60 mmoL/L KCl预收缩SO肌环后加入SNP (0.1 nmoL/L-1 mmoL/L),在各个浓度点HC组的舒张反应均明显低于对照组(P<0.01,t=5.12).SO肌环在无钙Krebs液中温育5 min后复钙引起两组明显收缩反应所需的Ca2+浓度分别为0.1和1.0 mmoL/L,HC组显著低于对照组(P<0.01,t=4.91);复钙2.5 mmoL/L诱发两组肌环的收缩反应均可被3μmoL/LNif完全缓解.用60mmoL/L KCl预收缩SO肌环后加入Nif,两组对Nif(0.1 nmoL/L-3 μmoL/L) 的舒张反应在各个浓度点均无明显差别.在Krebs液中先加入3μmoL/L Nif,再加入KCl,CaCl2,两组肌环均未发生收缩反应. 结论:在离体条件下,HC可导致SO张力异常,SO处于易激惹状态,其机制与SO细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)过载有关,而该过载状态与L型电压依赖性钙通道(L-type Voltage-dependent calcium channels,L-VDCs)无关.
- 张孝勇魏经国马进王莎马孝武马克军王亚蓉
- 关键词：高胆固醇血症ODDI括约肌肌张力胆系疾病
- 高胆固醇兔胆管括约肌细胞钙代谢与钙振荡变化关系被引量：1
- 2005年
- 目的:在急性分离的胆管括约肌(sphincterofOddi,SO)细胞上,观察高胆固醇血症对SO细胞内钙振荡的影响变化及其机制.方法:新西兰雌兔24只随机分成两组:对照组和高胆固醇血症模型组各12只,以fluo-4/AM荧光指示剂负载急性分离的SO细胞,应用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞钙振荡的变化.结果:高胆固醇血症组兔的SO细胞钙荧光强度振荡的幅度为6.11±3.1,正常组兔为3.61±0.94.当加入硝苯地平及EDTA后试验组钙荧光强度振荡幅度减小到2.24±0.72,下降了64%.当加入thapsigargin后,模型组钙荧光强度振荡幅度减小到3.8±1.9,下降了38%.结论:高胆固醇兔L-型电压依赖钙通道异常开放通过CICR途径所致SO细胞[Ca2+]1代谢紊乱是钙振荡物理学特征改变的分子生物学基础.
- 马克军魏经国王亚蓉张孝勇王春梅黄晓峰陈丹
- 关键词：高胆固醇钙代谢钙振荡
