陈江源 作品数:8 被引量:61 H指数:5 供职机构: 武汉工业学院生物与制药工程学院 更多>> 发文基金: 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 理学 更多>>
油酸通过未折叠蛋白反应调节肠粘膜上皮细胞胆固醇转运相关蛋白的表达 油酸是食用油的主要成分。已有研究表明,在肠粘膜上皮细胞中,与其它脂肪酸相比,油酸是一种公认的具有强的诱导富含甘油三酯脂蛋白合成与分泌的脂肪酸,它通过促进胞膜胆固醇向内质网运输,增加胆固醇及其酯的分泌,此外,在无外源胆固醇... 陈江源关键词:油酸 肠粘膜上皮细胞 未折叠蛋白反应 蛋白表达 高胆固醇血症 内质网 噬菌体基因Ⅴ蛋白基因的合成、重组表达及功能分析 被引量:1 2012年 目的:研究丝状噬菌体基因V蛋白(gene V protein,GVP)基因的合成、重组表达及其功能。方法:根据GVP的基因序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计合成了8个寡核苷酸片段,利用重叠延伸PCR合成GVP基因序列,将其与原核表达载体pET-28a-c(+)质粒重组,转化大肠杆菌,获得GVP蛋白阳性表达菌株,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,产物经Ni+-NTA琼脂糖凝胶层析纯化,获得目的蛋白GVP,DNA结合实验检测其功能。结果:成功合成出GVP基因,重组体在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导获得高效表达,DNA结合实验表明GVP与单链DNA间解离平衡常数Kd=7.27×10-5mol/L。结论:重组构建并高效表达的GVP蛋白具有较高单链DNA结合能力,可用于食品病原微生物特定单链DNA分子的浓缩和分离。 张大川 房国梁 李琦 陈江源 王岚 李睿 刘烈炬 刘志国关键词:大肠杆菌BL21(DE3) 溶血性链球菌LAMP检测方法的建立 被引量:9 2010年 目的:研究溶血性链球菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,实现对溶血性链球菌的快速检测。方法:针对溶血性链球菌的scpA基因设计4条特异性LAMP内外引物进行LAMP扩增;优化扩增反应条件;采用包括溶血性链球菌在内的6种不同菌株进行LAMP的特异性检测,并酶切鉴定;对溶血性链球菌菌液以无菌水进行10倍系列梯度稀释后,进行LAMP扩增检测其灵敏度;将菌掺入牛奶样本并进行LAMP检测。结果:本法可快速灵敏地检测出溶血性链球菌,反应特异性高,检出限为16.7CFU/mL,而牛奶样本的检出限则达10CFU/mL。结论:LAMP法可用于食品溶血性链球菌的快速检测。 尹欢 李琦 陈江源 马寅众 李睿 刘志国关键词:溶血性链球菌 检出限 环介导等温扩增法快速检测阪崎肠杆菌 被引量:12 2010年 目的:研究阪崎肠杆菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,简称LAMP)方法,实现对食品中阪崎肠杆菌的快速检测。方法:针对阪崎肠杆菌16S rRNA基因(16S rDNA)及外膜蛋白A(OmpA)基因设计LAMP引物,扩增后通过电泳或加入显色剂SYBR-GREENⅠ检测。结果:LAMP法能有效特异地检测出阪崎肠杆菌;以16S rRNA引物检测阪崎肠杆菌的最低检出限为32CFU/mL,用OmpA引物检测阪崎肠杆菌的最低检出限达3CFU/mL,扩增产物加入SYBR-GREENⅠ在紫外条件下可见荧光,与电泳检测具有同样的灵敏度。结论:LAMP法可实现对阪崎肠杆菌的快速检测,在食品检测中具有广阔的应用前景。 马寅众 陈江源 房国梁 李琦 李睿 周帼萍 刘志国关键词:阪崎肠杆菌 环介导等温扩增 胆酸钠多克隆抗体的制备及其快速检测方法研究 2012年 目的:探索用胶体金免疫层析法快速检测胆酸钠含量。方法:用碳二亚胺法合成的免疫抗原胆酸钠-BSA,免疫新西兰白兔,制备抗胆酸钠多克隆抗体。用酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定特异性抗体效价。制备胆酸钠—OVA抗原—胶体金复合物,组装检测试纸。结果:胆酸钠抗体的效价为1∶80 000,建立的胶体金快速测定法对胆酸钠的检测限为12μg/mL。结论:试纸条法是快速检测胆汁酸含量的有效方式,在临床检测方面具有广阔的运用前景。 陈江源 刘洁 蔡建中 付云洁 刘志国关键词:多克隆抗体 ELISA 胶体金 试纸条 肠炎沙门氏菌的LAMP检测方法的建立 被引量:13 2013年 建立肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,实现对肠炎沙门氏菌的快速检测。通过针对肠炎沙门氏菌血清型特异性基因lygD设计LAMP内外引物对,优化LAMP扩增反应条件,采用包括肠炎沙门氏菌在内的10种不同菌株进行LAMP引物特异性检测;通过系列梯度稀释肠炎沙门氏菌菌液进行LAMP扩增,计算检出限;并对鲜鸡蛋模拟样本进行LAMP检测。结果表明LAMP法可快速特异地检测出肠炎沙门氏菌;细菌培养液检出限为2.33×101cfu/mL,鲜鸡蛋模拟样品为2.67×101cfu/mL。该方法反应灵敏度高,可用于食品中肠炎沙门氏菌的快速检测。 袁发浒 尹欢 李琦 陈江源 刘烈炬 刘志国关键词:肠炎沙门氏菌 环介导等温扩增 检出限 ELISA法测定热加工食品中的丙烯酰胺 被引量:15 2011年 该研究建立了热加工食品中丙烯酰胺的间接竞争ELISA检测方法。首先用戊二醛法合成丙烯酰胺-BSA免疫抗原,注入兔体内以产生抗丙烯酰胺多克隆抗体。结果显示,在包被抗原为1.5μg/mL,抗体稀释度为1∶16000倍的优化条件下,间接ELISA法检测范围为50μg/L~1280μg/L,IC50为检测限为350μg/L,最低检测限为50μg/L。加标回收率为92.6%~95.5%。该检测方法准确快速,特异性强,适用于热加工食品中丙烯酰胺的快速检测。 付云洁 李琦 陈江源 王岚 李睿 周帼萍 刘志国关键词:丙烯酰胺 多克隆抗体 ELISA 环介导等温扩增法鉴定检测冬虫夏草 被引量:12 2011年 目的建立冬虫夏草的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,实现对冬虫夏草的快速检测。方法针对冬虫夏草的CS2 serine protease(csp2)基因设计LAMP内外引物对;利用CTAB法提取冬虫夏草DNA;优化扩增反应条件;采用包括冬虫夏草在内的6种不同虫草进行LAMP扩增,并对阳性产物酶切鉴定以检测其特异性,通过对模板DNA的10倍梯度稀释检测其灵敏度;紫外灯下观察凝胶电泳或加入荧光染料SYBR Green I的扩增产物。结果设计的LAMP引物可以特异地针对冬虫夏草的csp2基因进行LAMP扩增,产物可被限制性内切酶Taq1酶切,且有较高的灵敏度,检出限达6 pg/mL。结论 LAMP法可以实现对冬虫夏草的快速鉴定检测,在中药鉴定中有着广阔的应用前景。 李奎 李琦 袁媛 陈江源 黄璐琦 刘志国关键词:冬虫夏草 环介导等温扩增 检出限