陈宗德
- 作品数:52 被引量:133H指数:7
- 供职机构:郑州大学基础医学院干细胞研究中心更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划河南省医学科技创新人才工程项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学交通运输工程化学工程更多>>
- 人血管内皮生长因子mRNA靶向siRNA表达载体的构建和表达被引量:3
- 2007年
- 目的:构建人血管内皮生长因子(VEGF)mRNA靶向siRNA表达载体,观察其表达情况。方法:设计人VEGF靶向的发夹样siRNA,依据设计,合成2条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSUPERneo-GFP载体,转化扩增后得到重组载体pSUPERneo-GFP-siVEGF,进行序列测定。用脂质体转染法将重组载体转染食管癌细胞株Eca109,采用RT-PCR检测转染细胞VEGF mRNA的表达水平。结果:经过酶切鉴定与测序,pSUPERneo-GFP-siVEGF构建成功。稳定转染该重组体的Eca109细胞VEGF mRNA表达水平明显降低。结论:成功构建了针对VEGF mRNA的siRNA载体,转染细胞后可显著抑制VEGF mRNA的表达。
- 丁培杰杨书钦曹明瑞臧文巧陈宗德赵国强
- 关键词:RNA干扰VEGF
- 溶血性链球菌制剂的抗瘤作用及机理研究被引量:2
- 1992年
- 本试验检测了溶血性链球菌制剂(HSP)的抗瘤活性。当对小鼠移植ECA细胞前三天及后三天各ip0.5mgHSP一次,荷瘤小鼠生存期明显延长。在荷瘤鼠中经HSP或CP诱导的中性粒细胞的抗瘤活性与未经诱导鼠的相比,差异有显著性(P<0.01),与非荷瘤鼠经HSP诱导的中性粒细胞抗瘤活性相比,差异也有显著性(P<0.05)。HSP、BCG、CP都能促进C_(57)BL/6小鼠腹腔巨噬细胞分泌细胞因子,巨噬细胞培养上清促进胸腺细胞增殖的最适剂量约为1:32,其中以HSP致生效果较好。
- 杨俊杰张绍祖何俊森张先敏陈宗德李凌波
- 关键词:溶血性抗癌药药理
- 干细胞的端粒酶活性研究进展被引量:7
- 2004年
- 龚光明秦洁陈宗德曹孟德
- 关键词:干细胞端粒酶
- 厌氧棒菌苗诱导小鼠产生内源性肿瘤坏死因子的条件及其特性
- 1992年
- 本文采用正交设计,初步探讨了厌氧棒菌苗(CP)诱导内源性肿瘤坏死因子(TNF)活性的条件。结果表明:仅用CP一种调节剂,按照一定方式对小鼠进行三次刺激.便可使其血清具有显著的内源性TNF活性。有TNF活性的部分经SDS—PAGE和凝胶过滤测得分子量分别约为60,000dal和55,000dal;醋酸纤维膜电泳显示为α球蛋白;TNF活性经56℃处理30分钟仍稳定,70℃,10分钟即丧失;在pH6~9之间、活性稳定。
- 王盛典张绍祖何俊森张先敏陈宗德李凌波
- 关键词:肿瘤坏死因子正交设计
- 应用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌体内表达基因被引量:17
- 2005年
- 为寻找新型抗结核药物靶标 ,采用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌的体内诱导基因。首先构建了结核分枝杆菌基因组质粒表达文库 ,库容量为 1 0 2× 1 0 5CFU。再用经过结核分枝杆菌和大肠杆菌的裂解产物吸附过的结核病人血清 ,通过原位免疫印迹来筛选基因组表达文库 ,共获得 1 6个阳性克隆。对阳性克隆进行测序和生物信息学分析 ,发现该 1 6个阳性克隆可能包含 2 2个开放阅读框 (ORF)。按照功能将其分为 7类基因 :脂类代谢 2个、信号途径 5个、PE/PPE蛋白家族 2个、中间产物与能量代谢 6个、细胞壁与细胞处理 1个、假想蛋白 4个和与牛型分枝杆菌定向进化同源的 2个 ,其中部分基因可能与毒力相关 。
- 李霆高志勇王恒冯尔玲陈宗德李新月黄留玉黄翠芬
- 关键词:结核分枝杆菌药物靶标毒力
- 某地区枯水期饮用水及水源水致突变性研究被引量:1
- 2001年
- 龚光明阮丽荣陈宗德胡军付庆苏堤
- 关键词:枯水期饮用水水源水致突变性
- 氨基脲敏感胺氧化酶对弓形虫感染小鼠组织器官毒性作用研究被引量:4
- 2008年
- [目的]以真核单细胞微生物弓形虫为实验对象研究氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)的细胞毒性作用。[方法]通过腹腔注射和脂肪组织感染途径小鼠感染来自腹腔液传代弓形虫,6d后,取脂肪组织制备组织切片并进行HE染色,观察脂肪组织病变及弓形虫在脂肪组织的存在情况,并采用酶联分光光度法检测小鼠脏器组织SSAO的活性。根据弓形虫P1基因设计引物,通过PCR方法检测脂肪组织、肝脏、脾脏、肺和脑各组织弓形虫的感染情况。[结果]腹腔注射组小鼠脂肪细胞病变严重,且发现有大量弓形虫存在,脂肪组织注射组小鼠非注射处脂肪组织结构基本正常,且没有检测出弓形虫感染,而其他组织器官检测到大量弓形虫感染。与其他组织器官相比较,小鼠脂肪组织中SSAO的活性最高。[结论]脂肪细胞由于表达大量SSAO其分解底物后对真核生物的细胞感染具有毒性作用,这可能与SSAO所致血管内皮细胞损伤从而引起的动脉粥样硬化的产生与发展有着内在的联系。
- 朱沙樊剑鸣陈宗德苏堤杨璇
- 关键词:细胞毒性组织切片弓形虫
- EGF和bFGF联合诱导人脐血MSCs向神经细胞分化过程中端粒酶活性的变化被引量:9
- 2004年
- 目的 :检测重组人表皮生长因子 (EGF)和碱性成纤维生长因子 (bFGF)联合诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化过程中端粒酶活性的变化 ,以探讨人脐血MSCs的增殖性和安全性 ,为其临床应用提供实验和理论依据。方法 :采集健康自然分娩产妇志愿捐献的脐血 ,密度梯度离心分离单个核细胞 ,接种于含体积分数为2 0 %胎牛血清的DMEM/F12中 ,对照组不加细胞因子 ,实验组加入EGF和bFGF ,终浓度均为 10 μg/L ,剩余细胞用液氮冻存。培养 2 4h后倾去全部液体以去除未贴壁细胞 ,以后每 3d全量换液 1次。分别收集培养 1d、4d、7d、10d、14d、2 1d的贴壁细胞和冻存细胞 ,将细胞密度调整一致 ,采用反转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)方法检测脐血MSCs培养前后各时间段的巢蛋白 (nestin)和神经丝亚单位M(NF -M)mRNA表达 ;采用端粒重复序列扩增 -酶联免疫吸附实验 (TRAP -ELISA)法检测人脐血MSCs向神经细胞分化过程中的端粒酶活性变化。结果 :RT -PCR检测发现 ,未培养的脐血细胞nestin、NF -MmRNA均呈阳性表达 ;培养后NF -MmRNA的表达随培养时间延长而增强(P <0 .0 1) ;实验组与对照组相比 ,细胞因子能明显促进NF -MmRNA的表达 (P <0 .0 1)。而nestinmRNA的表达随培养时间延长而下降 (P <0 .0 1) ,至第 7d已不能检出 ;
- 秦洁曹孟德许予明邢莹陈宗德鄢文海韩雪飞许燕龚光明
- 关键词:脐血神经分化端粒酶
- 某地区饮用水及水源水致突变性研究被引量:5
- 2002年
- 目的 探讨某地区丰水期和枯水期的饮用水及水源水的致突变性。方法 采用AMES试验。结果 各水样中有大量的碱基移码型的直接致突变物和少量的需经代谢活化的碱基移码型的直接致突变物。各水样中的需经代谢活化的碱基置换型致突变物比不需代谢活化的碱基置换型致突变物多。黄河水枯水期的结果大于丰水期 ,有明显的季节性差别。结论 各水样在净化过程中不能除去这些有机致突变物 ,反而增加了新的致突变物。
- 卢新亚李倩如胡军陈宗德龚光明付庆苏堤
- 关键词:AMES试验致突变性丰水期枯水期水源水
- TTV在不同类型肝炎患者中的检测
- 2002年
- 目的 研究输血传播病毒 (TTV)在郑州地区甲型、乙型、丙型、非甲~非戊型肝炎患者中的感染情况 ,寻找非甲~非戊型肝炎的病因。方法 采用巢式聚合酶链反应 (nested -PCR)方法对不同人群的血清标本进行检测。结果 TTVDNA在 11例甲型肝炎患者中检出 1例 ( 9.1%) ;在 5 6例乙型肝炎患者中检出 13例 ( 2 3.2 %) ;在 14例丙型肝炎患者中检出 1例 ( 7.1%) ;在 40例非甲~非戊型肝炎患者中检出 18例 ( 4 5 %)。结论 TTV在非甲~非戊型肝炎患者中的感染率明显高于其他肝炎人群 ,可能是非甲~非戊型肝炎的主要致病因子。
- 刘宏伟陈香宇陈宗德赵凤兰
- 关键词:输血传播疾病肝炎