陈丽虹
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 干扰八聚体转录结合因子4A对人牙髓细胞增殖与多向分化能力的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究八聚体转录结合因子4A（octamer—bindingtranscriptionfactor4A，Oct4A）在人牙髓细胞（humandentalpulpcells，DPC）的表达及对细胞增殖、成牙本质向和成脂向分化能力的影响。方法实时荧光定量PCR（reahimequantitativePCR，RT—qPCR）技术检测健康人DPC中Oct4A的表达；合成特异性针对Oct4A的siRNA（Oct4A干扰组），50nmol／LsiRNA经脂质体Lipofectamine。TMRNAiMAX转染DPC24、48、72、96和120h，以无义序列一siRNA转染的DPC作为阴性对照，细胞计数试剂盒法检测细胞增殖情况、RT—qPCR检测OctdA的mRNA水平以选取最佳转染时间；茜素红染色检测成牙本质诱导DPC14d后矿化结节形成情况，油红0染色检测成脂诱导DPC14d后脂滴形成情况，RT—qPCR技术检测成牙本质向分化标志物牙本质涎磷蛋白（dentinsial叩hosph叩rofein，DSPP）和成脂向分化标志物脂蛋白脂酶（1ipoproteinlipase，LPL）的mRNA表达变化；蛋白质印迹法检测DSPP和LPL的表达。结果Oct4A在第3代DPC中表达最高（2．10±0．10），为第1代DPC的2．10倍（与第1、7代相比P=0．000），之后随细胞传代表达下降；Oct4A—siRNA转染DPC72h，干扰效率达峰值（69．7％）；与正常细胞组及阴性对照组相比Oct4A干扰组细胞增殖能力显著下降，矿化结节和脂滴形成显著减少（P=0．000），分化标志物DSPP和LPL表达量显著下降（P=0．000）。结论瞬时干扰牙髓细胞中Oct4A的表达可以降低细胞增殖和成牙本质向、成脂向分化能力。
- 伍丽静刘路陈丽虹韦曦
- 关键词：细胞增殖细胞分化牙髓细胞
- miR-146a在人牙髓细胞中的表达及其作用研究被引量：4
- 2014年
- 目的检测miR-146a在正常及脂多糖(LPS)刺激的人牙髓细胞(hDPC)中的表达,探讨miR-146a对hDPC分泌炎性因子的影响及其机制。方法 (1)实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法测定正常及LPS刺激的hDPC miR-146a的表达水平。(2)Lipofectamine 2000脂质体分别转染化学合成的miR-146a类似物(miR-146a mimics)、miR-146a抑制剂(miR-146a inhibitor)及其相应无关序列小RNA对照,转染24 h后1μg/ml LPS刺激hDPC,4 h后实时荧光定量PCR检测白细胞介素6(IL-6)、IL-8 mRNA的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清IL-6、IL-8的分泌;Western blot法检测miR-146a下游靶标白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK1)及肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的蛋白表达水平。两组比较采用独立样本t检验,多组比较采用方差分析。结果 (1)经LPS刺激的hDPC miR-146a表达水平高于正常hDPC(12 h:t=8.488,P=0.014;24 h:t=39.661,P<0.001)。(2)转染miR-146a mimics的hDPC在1μg/ml LPS刺激下产生炎性因子IL-6、IL-8的水平低于阴性对照,差异有统计学意义(IL-6 PCR:P<0.001,IL-6 ELISA:P<0.001;IL-8 PCR:P<0.001,IL-8ELISA:P=0.011);过表达miR-146a后IRAK1及TRAF6蛋白水平明显下调(IRAK1:P=0.002;TRAF6:P<0.001)。结论 miR-146a在LPS刺激的hDPC中表达上调,转染miR-146a可下调其靶基因IRAK1及TRAF6表达并降低IL-6、IL-8分泌,推测miR-146a参与牙hDPC的炎症反应调控。
- 舒珊洪丽莉陈丽虹韦曦
- 关键词：MIR-146A牙髓细胞脂多糖炎症因子
- 锌指E盒结合同源框2在人牙髓组织和细胞的表达
- 2014年
- 目的:检测锌指E盒结合同源框2(ZEB2)在人牙髓组织和细胞中的表达,并初步探讨其意义。方法:制作牙髓组织石蜡切片,荧光原位杂交技术(FISH)检测ZEB2的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测正常及TGF-β1刺激下人牙髓细胞(hDPCs)中ZEB2 mRNA表达水平;制作hDPCs细胞爬片,FISH检测ZEB2的表达。结果:FISH结果显示ZEB2在牙髓组织中主要表达于成牙本质细胞层,在牙髓细胞呈弱阳性表达。RT-qPCR结果显示TGF-β1的作用促进ZEB2的表达,且具有浓度和时间依赖性,5ng/ml TGF-β1刺激ZEB2表达达最大(P<0.05);5ng/ml TGF-β1刺激后,ZEB2 mRNA在24h内表达逐渐上调,24h达峰值(P<0.05)。FISH结果示ZEB2在正常hDPCs胞质和胞核均呈弱阳性表达,TGF-β1刺激24h后ZEB2表达增强,胞核表达明显。结论:ZEB2在牙髓组织中主要表达于成牙本质细胞层,正常hDPCs中弱阳性表达,而TGF-β1可促进hDPCs中ZEB2表达,提示ZEB2可能通过参与TGF-β1信号通路调控hDPCs的成牙本质向分化过程。
- 陈丽虹舒珊陈丽红韦曦
- 关键词：TGF-Β1牙髓细胞成牙本质细胞
- 碱性成纤维细胞因子在人牙髓损伤修复过程中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的研究不同状态人牙髓组织中碱性成纤维细胞因子(b FGF)的表达特点,以及大肠杆菌脂多糖(LPS)刺激后人牙髓细胞(h DPC)中b FGF的表达水平,探讨b FGF在牙髓损伤修复过程中的可能作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫蛋白印迹方法(Western blot)分别检测正常、深龋及牙髓炎牙髓组织中b FGF m RNA和蛋白表达情况。实时荧光定量PCR测定1 mg/L LPS刺激h DPC 6、12、24、48 h后b FGF和热休克蛋白70(HSP70)表达水平的变化;Western blot和细胞免疫荧光染色检测LPS刺激h DPC后b FGF蛋白表达变化。结果实时荧光定量PCR和Western blot结果表明,深龋牙髓组织中b FGF水平显著上调,而正常和牙髓炎牙髓组织中b FGF表达无差异。实时荧光定量PCR检测到LPS刺激h DPC后,b FGF和HSP70 m RNA水平同步上调,在12 h达峰值;Western blot显示,LPS刺激h DPCs 12、24、48 h后b FGF蛋白表达水平均高于正常h DPC;细胞免疫荧光染色证实,LPS刺激12 h后h DPC中b FGF呈强阳性表达,而正常h DPC中b FGF呈弱阳性表达。结论 b FGF在深龋牙髓组织中高表达,且LPS刺激早期可上调h DPC内b FGF表达,推测b FGF可能参与牙髓组织防御修复反应,可能是细胞抗损伤的重要调节机制之一。
- 陈丽红陈丽虹蔡艳玲舒珊韦曦
- 关键词：碱性成纤维细胞因子脂多糖牙髓细胞
