陆春雪
- 作品数：52 被引量：78H指数：5
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>
- 鹦鹉热嗜衣原体CPSIT_0018融合蛋白原核表达载体的构建、表达及其在Hela细胞中的定位被引量：1
- 2014年
- 目的构建鹦鹉热嗜衣原体(Cps)CPSIT_0018原核表达载体,表达并纯化该融合蛋白,观察其在感染的Hela细胞中的定位。方法采用PCR技术从Cps 6BC基因组中扩增CPSIT_0018基因,并构建pET30a-CPSIT_0018原核表达载体,然后转化到宿主菌E.coli BL21中,IPTG诱导His-CPSIT_0018融合蛋白表达,进一步用该融合蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,间接免疫荧光法分析His-CPSIT_0018蛋白在Hela细胞中的分布特征。结果成功构建了pET30a-CPSIT_0018原核表达载体,并表达和纯化较稳定的重组蛋白;在Cps感染的Hela细胞中CPSIT_0018的分布与主要外膜蛋白MOMP相似,而与包涵体膜蛋白IncA的分布模式不同。结论成功克隆表达了His-CPSIT_0018,该蛋白定位在Cps包涵体内。
- 贺庆芝曾怀才陆春雪胡艳群陈芝喜王川吴移谋
- 关键词：克隆表达细胞定位
- 抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定被引量：4
- 2014年
- 目的:制备小鼠抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体并鉴定其生物学特性。方法:重组MIP蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,间接ELISA法筛选阳性克隆并进行有限稀释克隆化,建立分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步采用ELISA法鉴定单克隆抗体的效价、类别及抗MIP蛋白特异性,IFA法鉴定单克隆抗体的衣原体种属特异性及中和能力。结果:建立了2株能稳定分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1R6H6、2L9D2),ELISA法测得培养上清效价均为1:1 600,免疫球蛋白类型分别为IgG2a和IgG1;2株单克隆抗体不仅能特异性的识别MIP重组蛋白,而且能特异性识别沙眼衣原体血清型A、D、L2所编码的内源性MIP蛋白,但不识别其他衣原体优势蛋白及MoPn、AR39和6BC;体外中和试验表明,2株单克隆抗体均能有效中和衣原体的感染性。结论:获得了有活性的能特异性识别MIP蛋白的单克隆抗体,为深入研究MIP蛋白的结构和功能奠定了基础。
- 陆春雪彭波陈超群周洲彭江南钟光明吴移谋
- 关键词：沙眼衣原体单克隆抗体
- 淋病奈瑟菌nspA与ltB融合基因的表达及其免疫活性被引量：1
- 2010年
- 目的表达LTB-NspA重组融合蛋白,鼻饲免疫雌性Balb/c小鼠,分析重组融合蛋白的免疫活性,为研制抗淋球菌蛋白疫苗提供实验依据。方法转化并鉴定pET30a/ltB-nspA原核重组质粒后,在E.coliBL21中表达重组融合蛋白。鼻饲途径免疫雌性Balb/c小鼠,检测NspA特异性体液免疫和细胞免疫水平。结果 LTB-NspA融合蛋白组生殖道黏膜产生的NspA特异性sIgA水平和血清IgG水平随免疫时间呈上升趋势,第6周sIgAA450nm达0.689,明显高于NspA组和LTB、蛋白溶解液(solution buffer)对照组(P<0.01);第6周血清中产生的特异性IgGA450nm值达0.734,明显高于LTB和Solution Buffer对照组(P<0.01);LTB-NspA组脾淋巴细胞刺激指数(SI)为1.63,明显高于LTB和Solution Buffer对照组(P<0.01);LTB-NspA组小鼠脾淋巴细胞经特异性抗原NspA刺激后,培养上清中IFN-γ和IL-4含量明显升高,分别达142.23pg/ml和86.14pg/ml,明显高于LTB和Solution Buffer对照组(P<0.01)。但LTB-NspA与NspA两组间血清IgG水平、SI、IFN-γ和IL-4水平差异不显著(P>0.05)。结论 LTB-NspA重组蛋白诱导小鼠产生了较高水平的特异性体液免疫和细胞免疫;首次证实黏膜佐剂LTB可辅佐NspA诱导小鼠产生高水平的生殖道黏膜免疫。
- 胡耀华胡四海戴志兵王健黄智勇张愉快余敏君陆春雪
- 关键词：淋病奈瑟菌重组蛋白免疫活性
- 鹦鹉热嗜衣原体半胱氨酸脱硫酶CPSIT_0959的结构和相关功能初步研究
- 目的 预测鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci,Cps)半胱氨酸脱硫酶CPSIT_0959的模拟结构,检测其酶活性并探索其功能,进而为阐明Cps的致病机制提供新思路.方法利用SWISS-MODEL...
- 陈彦波陆春雪谢亚锋米静冉鸥吴移谋
- 沙眼衣原体pORF5蛋白激活NALP3炎性复合体和p38MAPK通路诱导THP-1细胞分泌IL-1β和IL-18
- 目的探讨沙眼衣原体pORF5蛋白对IL-1β和IL-1 8等促炎性细胞因子的诱生作用,并初步分析其分子机制。方法采用分子生物学方法制备、纯化沙眼衣原体pORF5蛋白,用36μg/mL不同浓度刺激THP-1细胞,并于0h、...
- 曹文娟杨晓玉戴文婷粟盛梅陆春雪周洲唐双阳刘良专李忠玉
- 文献传递
- 蛋白质组学筛选沙眼衣原体感染依赖性免疫优势抗原被引量：3
- 2018年
- 目的:采用蛋白质组学方法筛选沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)感染依赖性免疫优势抗原。方法:将纯化的Ct D型标准株EB经紫外线照射制备UV-EB,然后将未经处理的活EB和紫外线处理的UV-EB分别感染体外培养的He La细胞,间接免疫荧光法检测紫外线对EB的灭活效果;分别将低剂量活EB滴鼻感染小鼠或将较高剂量UV-EB经肌肉接种免疫小鼠,首先检测两种接种方式下Ct在体内的增殖情况,然后收集两组小鼠的血清,分别与Ct D型全基因组908个开放读码框编码的GST-Ct融合蛋白进行ELISA反应,蛋白质组学筛选仅与活EB感染组小鼠血清反应且反应频率高的Ct感染依赖性免疫优势抗原;最后用筛选到的抗原体外刺激Ct生殖道感染小鼠的脾细胞,ELISA法检测细胞因子IFN-γ的产生情况。结果:经紫外线灭活的UV-EB体外不能感染He La细胞,肌肉接种免疫小鼠后也不能在小鼠肌肉组织内增殖,而活EB滴鼻感染组小鼠的肺组织中可检出大量的Ct;活EB滴鼻感染组小鼠与UV-EB肌肉接种免疫组小鼠的血清抗Ct抗体滴度差异无显著统计学意义;将两组小鼠血清分别与Ct全基因组编码的蛋白反应,通过蛋白质组学方法共鉴定出60个抗原能被至少1份小鼠血清识别; 22个抗原能同时被两组或任一组血清以≥50%的频率识别,为Ct免疫优势抗原,其中5个抗原仅被活EB滴鼻免疫组血清优势识别,即为Ct感染依赖性免疫优势抗原;该类抗原体外刺激小鼠脾细胞,能诱导良好的Th1型细胞免疫回忆应答。结论:筛选获得了Ct D型感染依赖性免疫优势抗原,为Ct亚单位疫苗研究提供了新的研究靶标。
- 陆春雪彭波陈超群孙豫辉栾秀丽伍海英孙珍洁彭昕珂吴移谋
- 关键词：沙眼衣原体蛋白质组学
- 衣原体纳米疫苗的研究进展被引量：2
- 2022年
- 衣原体疫苗接种的最终目的是刺激机体体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫应答的有机结合,以发挥抗感染保护作用、减少炎症病理的形成。衣原体抗原成分单独接种或与佐剂联合应用均不能全面激发机体的免疫应答。纳米粒子因具有降低毒副作用、靶向输送、缓释、避免被酶降解、提高活性和稳定性等独特优势,为衣原体疫苗设计提供了新策略。应用于医学领域的纳米材料种类繁多,衣原体纳米疫苗已取得一定程度的进展,本文主要对纳米粒子脂质体和多聚体微粒在衣原体疫苗中的研究进展作简要概述。
- 谢丽娟谢小平孙珍洁陆春雪
- 关键词：衣原体纳米疫苗脂质体
- 衣原体调控宿主细胞凋亡的机制研究进展
- 2014年
- 衣原体是一类专性细胞内寄生的原核微生物,常引起性传播疾病、失明和肺炎等疾病。衣原体可能已经进化出调控宿主细胞的若干机制,通过改变宿主细胞蛋白位置,干扰宿主细胞凋亡信号通路等来抑制细胞凋亡,维持其自身的存活,核转录因子NF-κB也涉及到衣原体感染细胞凋亡抑制;衣原体可以经半胱氨酸蛋白酶依赖途径等机制诱导细胞凋亡,进而感染邻近细胞。
- 冉欧陆春雪吴移谋
- 关键词：衣原体细胞凋亡凋亡抑制凋亡诱导
- 表皮葡萄球菌对氟喹诺酮类药物摄入的研究被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨耐药表皮葡萄球菌中是否存在主动外排系统,以揭示表皮葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法 应用荧光法检测表皮葡萄球菌耐药株和敏感株对环丙沙星、司帕沙星的累积量以及加入利血平和碳酰氰间氯苯腙(CCCP)后对环丙沙星、司帕沙星累积量的变化情况。结果 表皮葡萄球菌临床株和敏感株中加入CCCP后菌体内环丙沙星、司帕沙星的累积量变化不大,而利血平可以使SR79菌体内环丙沙星的累积量显著上升。结论 表皮葡萄球菌中可能存在针对亲水性氟喹诺酮药物的主动外排系统。
- 何汉江谭立志李丽华周芸陆春雪曾焱华
- 关键词：表皮葡萄球菌氟喹诺酮类药物主动外排系统
- 抗淋病LTB-PorB核酸疫苗与蛋白疫苗联合应用增强免疫应答的研究被引量：2
- 2010年
- 目的:初步探讨抗淋病LTB-PorB核酸疫苗与蛋白疫苗联合免疫的免疫增强效应,为研制抗淋病疫苗提供实验依据。方法:大量制备核酸疫苗(pcDNA3.1(-)/ltB-porB)及重组蛋白疫苗(rLTB-PorB);通过鼻饲途径将核酸疫苗和蛋白疫苗采用核酸初免-蛋白加强(DNAprime-protein boost)联合免疫以及分别单独免疫雌性BALB/c小鼠,同时设PBS及空质粒(pcDNA3.1(-))对照组,检测各组体液免疫和细胞免疫应答水平。结果:免疫后第56天,联合免疫组小鼠生殖道sIgAA450(1·083±0·179)、血清IgG A450(1.023±0.116)、脾淋巴细胞诱生的IL-4[(357.58±34.44)/pg/ml]和IFN-γ[(261.85±29.92)/pg/ml]水平均明显高于各对照组(P<0.01),小鼠脾淋巴细胞增殖率(SI:2.12±0.29)较对照组显著增高(P<0.05);核酸疫苗组、蛋白疫苗组和联合免疫组血清IgG亚类IgG2a/IgG1比值分别为1.678、0.455和0.693。结论:LTB-PorB核酸疫苗和蛋白疫苗联合免疫组诱导的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答水平明显优于单独的核酸疫苗组和蛋白疫苗组,且以诱导Th2倾向性免疫应答为主。
- 戴志兵胡四海刘清南陈敏王玉峰张愉快余敏君朱翠明李忠玉陆春雪
- 关键词：淋病核酸疫苗蛋白疫苗联合免疫
