阳佑天 作品数:11 被引量:8 H指数:2 供职机构: 华南农业大学兽医学院 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株GP5蛋白ORF5基因的克隆与序列分析 被引量:1 2014年 为揭示广东地区猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)可能的流行规律,本研究采用RT-PCR的方法扩增5株来自广东地区猪场临床样品的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)分离株的GP5蛋白ORF5基因,将其克隆、测序后与国内外部分毒株相应基因进行核苷酸序列比较。结果表明,PRRSV-2011-GD2、PRRSV-2011-GD3、PRRSV-2013-GD1、PRRSV-2013-GD2和PRRSV-2013-GD3株与美洲型参考株(VR-2332)的核苷酸序列同源性分别为88.8%、99.5%、88.7%、88.7%和83.5%。系统进化树分析结果表明,PRRSV-2011-GD2、PRRSV-2011-GD3、PRRSV-2013-GD1、PRRSV-2013-GD2和PRRSV-2013-GD3株均属于美洲型。以上结果为更好地了解PRRSV的分子流行病学特征和抗原变异规律提供依据,同时为研制基因工程疫苗奠定了基础。 吴晓薇 刘晓慧 杨谦 熊蕊 郭凤柳 郭霄峰 阳佑天 陈茹关键词:猪繁殖与呼吸综合征 GP5蛋白 检测犬源狂犬病毒中和抗体ELISA方法的建立 被引量:4 2012年 为了有效监测犬免疫狂犬病疫苗后的保护效力,以狂犬病毒(Rabies virus,RV)糖蛋白的主要优势抗原表位区G3蛋白(RV G3)作为包被抗原,建立了一种检测狂犬病毒中和抗体效价的间接ELISA方法.通过优化反应条件,确定抗原最佳包被量为8 mg/L,血清的最佳稀释度为1∶100,酶标二抗的稀释度为1∶3 000.特异性试验表明,该抗原不与犬瘟热病毒、犬腺病毒、犬细小病毒阳性血清发生交叉反应;批内和批间重复性试验的平均变异系数都小于10%;敏感性达1∶1 280.此方法检测134份血清样品的结果与美国SYNBIOTICS试剂盒相比,总符合率达95.6%. 傅秋玲 郑佳琳 林颖仪 张莹 阳佑天 潘姣姣 吴晓薇 郭霄峰关键词:狂犬病毒 糖蛋白 中和抗体 间接ELISA 猪源狂犬病病毒基因序列分析 通过对新分离的猪源狂犬病病毒(GD-SH01)全基因进行序列分析,为了解析该毒株的来源及国内其它流行毒株的关系.将来自病猪的脑组织制备成乳液,颅内接种3天龄的乳鼠和6周龄的成鼠.结果显示,该毒株在乳鼠脑内传代5次后,病毒... 张莹 罗永文 刘祥茵 杨先峰 黄永亮 施赫赫 傅秋玲 阳佑天 郭霄峰关键词:狂犬病病毒 流行病学 全基因组 文献传递 狂犬病病毒G蛋白的过表达及对病毒的抑制 2018年 【目的】探究G蛋白在狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)复制中的作用,以揭示携带双G基因的重组RABV的Hep-dG与亲代毒株rHep-Flury在神经母细胞瘤(NA)细胞中滴度差异的原因,为RABV致病机制的研究奠定基础。【方法】通过病毒吸附、入侵、荧光定量PCR、Western-blot以及中和抗体阻断等试验,检测G蛋白过表达对IFN-β以及相关因子转录的影响。【结果】Hep-dG感染能显著上调NA细胞中IFN-βmRNA的表达,激活了下游因子STAT1的表达与磷酸化,在较低的感染复数(MOI=0.01)下,Hep-dG感染后24 h即可显著促进IFN-β基因的表达,36 h达到最高水平(P<0.001)。该病毒进入细胞后,产生了更多的病毒Leader RNA和RIG-I mRNA,且与IFN-βmRNA的表达高度一致。抗体阻断IFN-β后,Hep-dG在NA细胞中的病毒滴度显著上升(P<0.01),约为阻断前的7.9倍,且与亲代毒株rHep-Flury无显著差异。与阴性对照比较,5μg的pH-G质粒转染能刺激IFN-β的转录(P<0.05),表明真核表达RABV G蛋白能在一定程度上刺激IFN-β的转录。【结论】本研究初步揭示了G蛋白激活先天性免疫应答的原因和作用。RABV G蛋白的过表达,通过促进病毒Leader RNA的转录,激活了RIG-I介导的IFN-β通路,进而抑制了Hep-dG在NA细胞的繁殖。G蛋白的过表达也对干扰素通路起到一定的作用。 阳佑天 张琼 张博越 刘文俊 罗永文 赵静 梅明珠 张莹 罗均 郭霄峰关键词:狂犬病病毒 G蛋白 Β干扰素 病毒滴度 猪源狂犬病病毒N和G基因的序列分析 目的:通过对新分离的猪源狂犬病病毒(GD-SH01)N基因和G基因进行序列分析,解析它们与其它狂犬病病毒N和G基因的差异。方法:提取猪源狂犬病病毒(GD—SH01)的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增N基因和G基因,并... 张莹 刘祥茵 杨先峰 黄永亮 施赫赫 傅秋玲 阳佑天 郭霄峰关键词:狂犬病病毒 基因克隆 表达犬细小病毒VP2基因的重组狂犬病病毒生物学特性研究 目的:研究表达犬细小病毒VP2基因的重组狂犬病病毒生物学特性。方法:将本课题组构建成功的重组狂犬病病毒rHEP-Flury(vP2-3.0)、rHEP-F1ury(dG-VP2)进行基因鉴定和G蛋白、VP2蛋白表达的鉴定... 施赫赫 牛学锋 刘祥茵 黄永亮 阳佑天 罗永文 林颖仪 刘慧思 郭霄峰关键词:狂犬病病毒 基因重组 生物学特性 攻毒保护试验 狂犬病基因工程灭活疫苗(Hep-Flury-dG株)的免疫效力 <正>目的为了检测狂犬病基因工程灭活疫苗(Hep-Flury-dG株)注射犬只后的免疫效力。方法在广州市增城区某村进行狂犬病基因工程灭活疫苗(Hep-Flury-dG株)环境释放试验,登记该村所有家养犬的信息并存档,同时... 施赫赫 宋伟科 黄永亮 刘祥茵 代元元 傅秋玲 张莹 林颖仪 阳佑天 徐晓娟 王怡飞 郭霄峰关键词:狂犬病 基因工程疫苗 免疫效力 文献传递 一株通过基因修饰以优化表达后的狂犬病病毒糖蛋白及其单克隆抗体和应用 本发明公开了经修饰的狂犬病病毒的G蛋白基因G3,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;该G蛋白基因G3表达得到的经修饰的狂犬病病毒的G蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;所述狂犬病病毒为狂犬病病毒(rabi... 郭霄峰 张戴婷 郑佳琳 阳佑天 王怡飞文献传递 猪源狂犬病病毒N和G基因的序列分析 2012年 通过对新分离的猪源狂犬病病毒GD-SH01株N基因和G基因进行序列分析,解析它们与其他狂犬病病毒N和G基因的差异.提取猪源狂犬病病毒GD-SH01株的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增N基因和G基因,并与T载体连接,克隆至大肠埃希菌DH5α.测序后与国内外部分毒株的N基因和G基因进行核苷酸序列和氨基酸序列比对.与其他毒株相比,N基因核苷酸相似性为84.3%~98.0%;氨基酸相似性为92.5%~99.3%.G基因核苷酸相似性为80.4%~98.2%;氨基酸相似性为87.8%~99.6%. 张莹 刘祥茵 罗永文 杨先峰 黄永亮 施赫赫 傅秋玲 阳佑天 吴晓薇 郭霄峰关键词:狂犬病病毒 鸭肝炎病毒研究进展 被引量:1 2012年 鸭肝炎病毒是一种雏鸭急性、高度致死性的病毒性传染病的病原。本文综述了鸭肝炎病毒的历史与分布、病原特征及变异性,并举例和比较了鸭肝炎病毒的主要诊断方法,包括血清学检测和分子生物学检测,最后对其进行了展望。 阳佑天 郭霄峰 魏平华关键词:鸭肝炎病毒 病原特征