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郗鑫

作品数:7 被引量:37H指数:3
供职机构:华中农业大学动物医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 3篇会议论文
  • 1篇学位论文

领域

  • 7篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 7篇病毒
  • 6篇圆环病毒
  • 4篇猪2型圆环病...
  • 3篇犬病
  • 3篇伪狂犬病
  • 3篇伪狂犬病毒
  • 3篇克隆
  • 3篇狂犬
  • 3篇基因
  • 2篇重组伪狂犬病...
  • 2篇基因组
  • 2篇ORF2基因
  • 2篇E.COLI
  • 1篇全基因组
  • 1篇重组伪狂犬病...
  • 1篇猪圆环病毒
  • 1篇伪狂犬病病毒
  • 1篇狂犬病病毒
  • 1篇基因克隆
  • 1篇感染性

机构

  • 7篇华中农业大学

作者

  • 7篇郗鑫
  • 6篇琚春梅
  • 6篇陈焕春
  • 6篇曹胜波
  • 4篇刘正飞
  • 2篇李川
  • 1篇陈华平

传媒

  • 1篇中国农业科学
  • 1篇微生物学报
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇中国畜牧兽医...
  • 1篇中国畜牧兽医...

年份

  • 1篇2006
  • 3篇2004
  • 3篇2003
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
猪Ⅱ型圆环病毒ORF1基因克隆及在E.coli中的表达被引量:7
2004年
A pair of specific primers were designed and synthesized according to the published sequences of ORF1 gene of PCV 2. The complete DNA fragment of ORF1 gene was obtained by PCR from viral DNA of PCV 2 QD strain.Its nuclectide sequence was determined by the dideoxy mediated chain termination method.The results showed that the complete open reading frame (ORF) of ORF1 gene encoding 314 amino acids was 945 bp in length.A comparison of the nucleotide and amino acid sequences of ORF1 gene with that of other PCV strains showed that the identity of nucleotide with PCV 1 and PCV 2 were 83% and 96 4%~99 2% respectively,and identity of the deduced amino acid with PCV 1 and PCV 2 were 84% and more than 98% respecitively.The DNA fragment of ORF1 gene was subcloned into prokaryotic expression vector pET 28a and pGEX KG;while the specific non fusion and fusion proteins with GST of molecular weight 38 kD and 63 kD were expressed in E.coli BL 21 (DE3).Western blotting assay indicated that the polyclonal antibody against PCV 2 could recognize these two proteins.
郗鑫陈焕春李川刘正飞曹胜波琚春梅
关键词:PORCINECIRCOVIRUSGENECLONING
表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组伪狂犬病病毒的构建及鉴定被引量:9
2006年
目的以伪狂犬病病毒为载体,构建表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组病毒,并研究其生物学特性。方法将猪2型圆环病毒ORF2基因插入到伪狂犬病病毒gG缺失通用转移载体中,构建猪2型圆环病毒-伪狂犬病病毒重组中间转移质粒,然后将该质粒与伪狂犬病病毒TK-/gG-/LacZ+基因组共转染IBRS-2细胞,待发生细胞病变后收集病毒液进行重组病毒的筛选及生物学特性测定。结果利用检测PCV2ORF2基因和LacZ基因的PCR方法筛选到重组病毒TK-/gG-/ORF2+,同时用Southernblotting证实外源基因PCV2ORF2已成功插入到TK-/gG-/LacZ+亲本株的基因组中。间接免疫荧光试验(IFA)和Westernblotting结果显示重组病毒中PCV2ORF2基因获得了成功表达。对重组病毒的生物学特性研究表明,重组病毒与其亲本株在不同细胞上的增殖滴度相当,且重组病毒对小鼠无致病性,免疫小鼠后可诱导机体产生抗ORF2蛋白的特异性抗体。结论重组伪狂犬病毒构建成功,且表达的ORF2蛋白具有免疫原性。
琚春梅陈焕春郗鑫刘正飞曹胜波
关键词:猪2型圆环病毒ORF2基因伪狂犬病毒
猪2型圆环病毒ORF1基因克隆及在E.coli中的表达
以猪2型圆环病毒(Porcine circovirus type 2,PCV-2)QD株细胞感染物为模板,根据已报道的序列设计引物,PCR扩增和克隆到了ORF1基因的完整编码区段,并测定了核苷酸序列。克隆的ORF1基因全...
郗鑫陈焕春李川曹胜波琚春梅
文献传递
1猪2型圆环病毒ORF2基因的克隆及其重组伪狂犬病毒中间转移质粒的构建
猪圆环病毒(Porcine Circovirus,PCV)是近年来兽医界广泛关注的新发现的病毒之一。该病毒基因组为环状单链DNA,大小约为1.7kb,病毒粒子无囊膜,呈二十面体对称,直径约为17nm。1995年,国际病毒...
琚春梅陈焕春郗鑫刘正飞曹胜波
文献传递
猪2型圆环病毒ORF2基因的克隆及其重组伪狂犬病毒中间转移质粒的构建
本研究旨在克隆猪2型圆环病毒的ORF2基因,并以此构建猪2型圆环病毒-伪狂犬病毒重组中间转移质粒,为猪2型圆环病毒-伪狂犬病毒重组病毒的构建及二价基因工程疫苗的研制奠定基础.
琚春梅陈焕春郗鑫刘正飞曹胜波
关键词:猪2型圆环病毒ORF2基因克隆伪狂犬病毒
文献传递
猪Ⅱ型圆环病毒全基因组的克隆及感染性鉴定被引量:19
2004年
设计合成一对扩增猪Ⅱ型圆环病毒 (PCV 2 )全基因组的特异性引物 ,从 3份患断奶后仔猪多系统衰弱综合征 (PMWS)的死亡仔猪病料中 ,PCR扩增和克隆了 3株PCV 2全基因组序列。将所测序列与已公布的PCV毒株序列进行同源性比较 ,并绘制系统发育进化树。结果显示 ,所测毒株间的核苷酸同源性为 95 7%~ 99 4 % ,与其它毒株的同源性较高 ,达 95 1%以上 ;ORF1的核苷酸同源性高达 97 8%以上 ,氨基酸同源性大于 98% ;ORF2的核苷酸同源性较低 ,为 90 %~ 98%不等 ,推导的氨基酸序列同源性介于 87%~ 99 1%。进化树分析表明各分离毒株在进化上存在地域上的相关性。将克隆到的PCV 2基因组环化后 ,脂质体介导转染PK 15细胞 ,盲传 3代。间接免疫荧光检测表明 ,克隆到的基因组具有感染性。
郗鑫陈焕春陈华平曹胜波琚春梅
关键词:基因组克隆感染性PCV-2PMWS
猪2型圆环病毒感染性分子克隆构建及其ORF1基因的表达
猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科,是一种无囊膜的二十面体的单链环状DNA病毒.该病毒分为两种基因型,即PCV-1和PCV-2.前者出Tischer等1974年在PK-15(ATCC...
郗鑫
关键词:猪圆环病毒基因组感染性克隆
文献传递
共1页<1>
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