郑兆鑫
- 作品数:101 被引量:250H指数:8
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 带有降钙素基因相关肽衍生物及其制备方法
- 本发明为一种带有降钙素基因相关肽(CGRP)衍生物及其制备方法。CGRP具有降血压等重要的生理功能,但是在动物体内易被降解,作用时间短。本发明设计了一段DNA序列和大肠杆菌质粒载体pGEX-4T-2的GST基因相连接,构...
- 郑兆鑫严维耀刘明秋邱媛媛
- 文献传递
- 鼠心钠素基因在大肠杆菌中的融合表达及产物的分离纯化被引量:2
- 1998年
- 将克隆有化学合成的鼠心钠素基因的质粒pXZ-α-ANP-590改建成质粒pLH280,转化大肠杆菌表达融合蛋白LacZ'-280-α-ANP.当带有此质粒的最适宿主菌JM101在37℃,270r/min摇床培养14h,融合蛋白表达量可达最高值.利用超声波破碎菌体;通过盐酸胍抽提融合蛋白;透析除去盐酸胍后用溴化氰裂解融合蛋白;SephadexG-25柱层析后收集样品;各峰样品冷冻干燥后进行放免活性测定.结果说明第一峰样品具有放免活性.HPLC分析和生物活性测定均证明此分离样品与标准心钠素样品基本一致.处理1L携带质粒pLH280的发酵液(D(600)=2.0)可得1.2mg有活性的α-ANP,较之携带质粒pXZ-α-ANP-590的发酵液(D(600)=2.0)的α-ANP产量提高了4倍.
- 罗红良严维耀郑兆鑫
- 关键词:LACZ基因融合蛋白表达大肠杆菌
- 化学合成的α-降钙素基因相关肽基因在大肠杆菌中的融合表达及产物分离纯化
- 1998年
- 化学法合成的α-降钙素基因相关肽基因从pXZ101表达质粒转移到pUC18质粒中测序鉴定后,克隆到pGEX表达载体上,在大肠杆菌C600中表达.融合蛋白经谷胱甘肽亲和层析初步纯化,用凝血酶切去融合蛋白,经SephadexG-50柱纯化后,用溴化氰裂解,再经SephadexG-25柱纯化后得到纯品CGRP.经ELISA反应及放射免疫鉴定具有生物活性;经末端氨基酸测定与设计的一致.动物活体实验证明,大肠杆菌中表达的蛋白有降压活性.
- 黄妤孙立春孙悦葛昕晖严维耀郑兆鑫
- 关键词:降钙素基因相关肽大肠杆菌
- O型口蹄疫病毒VP4蛋白一个保守性表位的精细鉴定被引量:1
- 2014年
- 口蹄疫病毒(FMDV)的结构蛋白VP4在7个血清型之间是非常保守的,对其抗原表位最小基序的测定有助于开发广谱性多肽疫苗.本研究采用生物合成肽法,利用豚鼠抗FMDV O型标准血清,对最新流行的FMDV O型毒株O/BY/CHA/2010的VP4蛋白进行了线性表位扫描作图研究.结果表明:在覆盖VP4蛋白全长序列的10个18聚肽中,发现1个能与豚鼠抗FMDV O型标准血清发生免疫印迹反应的抗原性肽VP4-3;B细胞表位鉴定确定了抗体识别VP4-3的最小基序是INNYYM;该表位位于VP4蛋白的三维结构表面;对7个FMDV血清型的122个毒株同源蛋白质进行序列比对,发现这一表位在7个FMDV血清型的120个毒株中是100%保守.
- 栾喜梅左小彤黄梦菡郑兆鑫黄强徐万祥刘明秋
- 关键词:口蹄疫病毒
- 棒状杆菌发酵基因工程研究进展
- 1995年
- 传统的育种方法由于本身的缺陷受到了基因工程育种的强有力挑战,基因工程技术应用于发酵工业创立了全新的发酵基因工程。传统发酵菌种棒状杆菌的分子生物学研究欣欣向荣,棒状杆菌的受体系统、载体系统以及DNA转移技术都已取得长足进展。对棒状杆菌的分子遗传机制的阐明使得构建表达载体并表达目的基因成为现实。利用基因突变和基因重组技术选育优良的棒状杆菌发酵菌种,业已取得明显成效。
- 雷呈祥严维耀郑兆鑫
- 关键词:基因工程棒状杆菌发酵工程
- 一种口蹄疫病毒抑制剂、其制备方法及应用
- 本发明属于遗传工程领域,具体涉及一种应用RNAi技术设计的口蹄疫病毒病抑制剂、其制备方法及应用。该抑制剂是含有表达抗口蹄疫病毒的siRNA的质粒、以减毒猪霍乱沙门氏菌为受体菌的重组活菌苗。本发明的重组活菌苗储存、使用方便...
- 刘明秋严维耀丛薇金虹郑兆鑫
- 穿梭表达载体的构建及产L-苯丙氨酸基因工程菌的选育
- 1996年
- 基因工程技术已经给发酵工程的发展注入了新的活力,使传统的发酵工业面貌一新。它不仅开创了许许多多新的发酵产品,而且也使不少传统发酵产品的产量、质量和生产技术有了新的飞跃。棒状杆菌中许多菌(如,谷氨酸棒杆菌和黄色短杆菌)是重要的工业生产菌。这类菌生长迅速、不产胞外蛋白酶、无内毒素、产品易分离纯化,已广泛用于各种氨基酸、核苷酸等的发酵生产。因此开展棒状杆菌的基因工程研究具有重要的理论意义和应用价值。
- 雷呈祥范长胜段峰海黄伟达沈水源严维耀郑兆鑫
- 关键词:棒状杆菌穿梭载体L-苯丙氨酸基因工程菌发酵
- 抗家畜口蹄疫病毒基因工程多肽疫苗及其制备方法
- 本发明属于遗传工程技术领域,具体为一种抗家畜口蹄疫病毒工程多肽疫苗及其制备方法。本发明的多肽疫苗以截短的β-半乳糖苷酶pWR280作为抗原载体蛋白,以化学合成法合成编码口蹄疫病毒VP1蛋白中具有抗原性的氨基酸肽段的DNA...
- 刘明秋严维耀郑兆鑫焦晔
- 文献传递
- 一种能抑制口蹄疫病毒复制与感染的siRNA及其制备方法和应用
- 本发明是一种能抑制口蹄疫病毒(FMDV)在动物细胞与个体中复制与感染的siRNA及其制备方法和应用。选取FMDV基因组序列的五个区段,即5NCR,VP4,VPg,POL,3NCR中高度保守的序列部分作为siRNA的靶序列...
- 郑兆鑫严维耀刘明秋陈维灶
- 文献传递
- 抗O型口蹄疫病毒DNA疫苗的建立被引量:8
- 2002年
- 目的 :研制抗“O”型FMDV的DNA疫苗。方法 :以“O”型口蹄疫病毒 (FMDV)Vp1免疫活性肽基因串联片段取代猪IgGH链可变区的CDR3区 ,并与真核表达载体pCDM8相连构建表达载体pCDM FH。用表达载体pCDM FHDNA对豚鼠及猪进行肌肉注射 ,检测该疫苗的免疫效果。结果 :该DNA疫苗可诱导出抗FMDV专一性的中和抗体及效应性T细胞。攻毒试验表明 ,DNA疫苗pCDM FH可使被免疫豚鼠及猪发病推迟 ,症状减轻。结论 :该DNA疫苗可激发明显的免疫应答及保护效果。
- 赵凯邹仕平张震宇郑兆鑫徐泉兴尤永进朱彩珠冯霞
- 关键词:FMDVDNA疫苗核酸疫苗IGG口蹄疫病毒