赵文
- 作品数：12 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国医科大学实验动物部更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术计划项目辽宁省科技厅科技攻关项目沈阳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生一般工业技术化学工程更多>>
- 大／小鼠组织DNA两种提取方法的比较被引量：1
- 2015年
- 目的获取质量稳定的基因组DNA，快速鉴定模型动物基因型。方法以鼠尾组织为实验材料，采用苯酚／氯仿法和改良煮沸法提取鼠基因组DNA；分别用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量，采用PCR检测两种方法获得DNA的扩增效果。结果酚／氯仿提取法提取的基因组DNA质量优于改良煮沸法，但两种方法获得的DNA模板均能成功应用PCR扩增进行基因型鉴定，且改良煮沸法DNA提取具有无毒、简单、高效、便捷的优点。结论大批量转基因大／小鼠基因型鉴定可以优先选择改良煮沸法提取基因组DNA。
- 陈雪婷郎雪楠李兆阳张婀娜赵文董婉维周生来张梅英郑志红
- 关键词：DNA提取PCR基因型鉴定
- SD大鼠超数排卵的优化被引量：1
- 2015年
- 目的通过对鼠龄及激素剂量的控制研究其对SD大鼠排卵的影响。方法分别采用三种不同剂量PMSG／hCG组合（PMSG／hCG：20IU／20IU、25IU／25IU、30IU／30IU）对4、5、6周龄的SD大鼠进行超数排卵处理，以超数排卵总卵数、正常受精卵数、异型卵数作为评判标准，确定最佳超排剂量及鼠龄。结果20IU剂量时，三种周龄大鼠分别获取胚胎24．72枚、33．12枚、15．22枚，其中正常受精卵：21．58枚、29．1枚、13．1枚，异型卵：2．01枚、1．01枚、2．12枚；25IU剂量时，三种周龄大鼠分别获取胚胎37．63枚、43．62枚、20．78枚，其中正常受精卵22．67枚、38．6枚、18．5枚，异型卵：2．82枚、1．23枚、2．28枚；30IU剂量时，三种周龄大鼠分别获取胚胎51．69枚、61．36枚、30．2枚，其中正常受精卵47．2枚、60．8枚、25．6枚，异型卵：1．23枚、0．56枚、1．3枚。结论5周龄，激素剂量30Iu为大鼠超排的最适周龄及最佳激素剂量，为基因工程动物制备及胚胎冷冻实验提供技术保障。
- 张婀娜郎雪楠赵文陈雪婷董婉维周生来于洋王惟张梅英郑志红
- 关键词：超数排卵激素周龄SD大鼠
- 水溶性四氧化三铁纳米粒子制备及其在大鼠体内分布
- 2014年
- 目的 制备水溶性四氧化三铁纳米粒子并研究其在动物体内的分布.方法 采用高温分解法制备有机相Fe3O4磁性纳米粒子,然后采用2,3-二巯基丁二酸（DMSA）对磁性纳米晶体进行表面修饰,得到水溶性氧化铁纳米颗粒（Water-Soluble Iron Oxide Nanparticles,WION）,将WION通过尾静脉注射入SD大鼠体内,在不同时间处死大鼠,组织切片染色观察WION在大鼠体内的分布,对WION的生物相容性做初步探讨.结果 透射电子显微镜观察发现,晶体的表面通过疏水长链烷烃稳定,Fe3O4纳米晶体在环己烷中具有较好的分散性,颗粒并无聚集现象;尾静脉注射0.5 ml的WION溶液（l mg/ml）24 h后,WION主要集中在脾脏和肝脏,其次是肾脏和肺.结论 采用高温分解法成功制备了Fe3O4磁性纳米粒子,其具有良好的表面形貌.进一步采用2,3-二巯基丁二酸（DMSA）对其进行表面修饰,获得了分散性良好的水溶性氧化铁纳米颗粒（WION）.
- 赵文张婀娜赵强
- 关键词：磁性氧化铁透射电子显微镜
- 树莓酮对NASH大鼠血液中TNF-α、IL-1和IL-18表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察树莓酮对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠血液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-18(IL-18)的影响。方法 SD大鼠50只,分为5组:正常对照组(NC),模型组(M)树莓酮低剂量组(RKL)树莓酮中剂量组(RKM)和树莓酮高剂量组(RKH)。采用高脂饲料喂养复制NASH大鼠模型。在RKL组、RKM组和RKH组饲喂高脂饲料4周后,分别以浓度为5g/L,10g/L,20g/L的树莓酮溶液进行干预。给药4周后,处死大鼠,采集肝脏标本,HE染色作肝脏病理组织学检查;醋酸双氧铀柠檬酸铅染色,透射电镜观察肝脏组织超微结构变化;酶联免疫法(ELISA)测量血液中TNF-α、IL-1和IL-18的水平。结果与NC组比较,M组肝细胞出现明显脂肪变性,肿大,胞浆内充满脂肪空泡或脂滴,线粒体嵴消失等结构异常改变明显并且血液中TNF-α、IL-1和IL-18的水平显著升高(P<0.05)。与M组比较,RKL、RKM、RKH三个剂量组肝细胞异常结构均有不同程度的改善并且三个剂量组血液中的TNF-α、IL-1和IL-18水平均有不同程度降低(P<0.05)。结论树酶酮改善NASH的作用,可能与降低大鼠血液中炎症因子TNF-α、IL-1和IL-18的水平相关。
- 王光吴骁赵文
- 关键词：TNF-ΑIL-1IL-18
- 氨浓度检测的溯源验证实验
- 2015年
- 目的在采用纳氏试剂比色法进行动物室氨浓度检测时用国家标准物质进行验证,以保证实验室检测结果的准确性。方法取十份样品分别用氨标准样品与实验室配置的氨溶液进行平行实验,同时绘制氨标准曲线进行比对。结果实验室配置的氨溶液标准曲线与氨标准样品标准曲线的偏差为-1.79%。结论氨浓度检测受多种因素影响,为使检测结果准确性和一致性得以保证,应进行实验室验证、校准工作。
- 宗阿南吴腾飞杨葳王光赵文
- 关键词：氨浓度校准
- 应用Talen法制备apoE基因敲除大鼠模型
- 2015年
- 目的应用转录激活因子样效应因子核酸酶（Talen）法制备载脂蛋白E（apoE）基因敲除大鼠模型，为进一步研究apoE基因功能，动脉粥样硬化（AS）疾病发病机制及治疗方法奠定基础。方法设计并合成针对大鼠apoE基因的Talen序列，应用原核显微注射方法制备子代鼠。通过PCR．测序及TA克隆-测序法检测仔鼠中apoE的突变，经传代及兄妹交配获得纯合型仔鼠，并对其基因型进行鉴定。应用Westemblot方法检测apoE-/-仔鼠各组织中ApoE蛋白表达水平；血清学分析血脂总胆固醇（CHO）及甘油三酯（TG）含量；应用RT—PCR方法检测脂质代谢相关基因三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）的表达。结果经鉴定选取在第二外显子处缺失1bp，造成开放阅读框移码突变的大鼠为阳性F0代仔鼠，该鼠经传代及筛选，最终获得apoE-/-大鼠。Westernblot检测显示apoE-/-鼠在心、肝、肾、脑、卵巢组织中未见ApoE蛋白的表达，表明在该模型中成功实现了apoE基因的敲除。apoE-/-鼠血脂CHO、TG均高于野生SD大鼠，其中CHO水平呈现显著性差异（P〈0．05）。在apoE-/-鼠肝组织中ABCA1的表达降低，可能起到促进AS形成的作用。结论应用Talen法成功制备apoE基因敲除SD大鼠；经筛选获得了纯合型apoE-/-大鼠，该模型实现了apoE基因敲除，并表现为高血脂及As性状。
- 徐影琪李晓晶杨葳周生来于洋王惟张婀娜赵文张梅英郭大勇王宏宇郑志红
- 金黄仓鼠Apoa5基因表达载体的构建及在不同组织器官中的差异表达
- 2015年
- 目的构建金黄仑鼠载脂蛋白A5（Apoa5）基因表达载体以及在不同组织中的表达差异分析，为深入研究Apoa5基因在金黄仓鼠不同组织中功能奠定基础。方法提取金黄仓鼠肝脏组织总RNA，采用RT—PCR方法对金黄仓鼠Apoa5基因的cDNA进行克隆，构建Apoa5基因表达载体并将其转染293T细胞，分别采用RT—PCR和Westernblot方法检测mRNA及蛋白质表达水平。采用荧光定量PCR检测并分析Apoa5mRNA在8个组织中的表达量。结果经PCR检测鉴定，Apoa5基因表达载体构建成功，经测序分析金黄仓鼠Apoa5基因cDNA全长1243bp，编码366个氨基酸，与人、大鼠、小鼠等物种比对，核苷酸和氨基酸序列均具有较高的同源性，金黄仓鼠与人、大鼠、小鼠的氨基酸同源性分别为75％、84％、84％。转染293T细胞48h后，RT—PCR和Westernblot结果表明，Apoa5基因在mRNA和蛋白质水平都有表达。荧光定量PCR结果显示，Apoa5mRNA在肝脏表达量最高，在脑和睾丸中中度表达，在心、脾脏、肺、肾、卵巢组织中低度表达。结论成功构建Apoa5基因表达载体并分析其在不同组织中的表达差异，为制备Apoa5转基因金黄仓鼠动物模型以及研究Apoa5基因在金黄仓鼠脂类代谢中的功能奠定基础。
- 董婉维张婀娜郭晓冲魏政立杨葳周生来赵文郑志红
- 关键词：金黄仓鼠基因表达
- 单向气流饲育系统对控制实验动物屏障环境的作用分析被引量：5
- 2010年
- 我国目前建成的屏障系统实验动物设施气流组织方式多为乱流式,从净化原理分析,乱流的气流组织具有方向多变、常伴有逆流、涡流气体流动的特性,会在室内产生死角,设施动态运行后,实验动物皮屑、垫料碎屑及排泄物等有害物质不能完全及时地排出,易造成系统内微生物污染,并危及实验动物工作者的身体健康。
- 宗阿南郑心然赵文高文婷王禄增
- 关键词：实验动物屏障环境
- 屏障系统实验动物环境设施应用绿色能源的设想
- 2011年
- 以生命科学研究为重点的高等院校及科研单位,实验动物环境设施建设规模大、水平高,不少设施已超过2×104 m2。在实验动物环境设施建设中应用绿色能源是今后发展的方向。利用净化空气单向流气流方式代替传统的乱流气流方式配备IVC笼具的做法可以减少能源消耗;利用蓄积雨水在空调机组冷热交换等非生产用水时使用可以减少淡水消耗量;利用风塔为屏障系统实验动物环境设施非净化区送风降温可以节约大量能源。
- 杨义赵文宗阿南
- 关键词：环境设施绿色能源
- 关于实验动物屏障环境设施单向流的研究
- 2011年
- 就单向流气流分布特性、单向流的换气次数及气流速度、单向流的不均匀度及流线的平行度等3个方面进行了研究,剖析了单向流的关键三要素。提出以减少或避免涡流,减少室内菌、尘扩散,有利于污染物被迅速排除为目的 ,认为实验动物屏障环境净化空气应选择采用单向流流型。
- 宗阿南王光王丽清赵文杨义朗雪楠
- 关键词：单向流气流速度
