贾志强
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
- 供职机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NGFβ/HIF-1α双重转染的骨髓间充质干细胞对神经元轴突再生的作用被引量：3
- 2014年
- 目的观察神经生长因子β(nerve growth factorβ,NGFβ)/低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)双重转染的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对神经元轴突再生微环境的改善作用,为完善微环境中轴突再生的理论提供资料。方法分别构建携带编码NGFβ、HIF-1α的慢病毒载体,用最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)转染BMSCs后,Western blot检测转染后的BMSCs表达NGFβ、HIF-1α的情况。培养SD大鼠皮质神经元并将其与转染后的BMSCs用Transwell双层培养板构建共培养体系。将共培养体系在厌氧培养罐中培养48 h后,用ELISA方法检测神经元培养上清液中NGFβ、HIF-1α、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平,并用Image pro-Plus软件测量神经元轴突的长度。实验分组:A组:单独培养神经元;B组:BMSCs与神经元共培养;C组:NGFβ转染的BMSCs与神经元共培养;D组:HIF-1α转染的BMSCs与神经元共培养;E组:NGFβ/HIF-1α双重转染的BMSCs与神经元共培养。结果 Le-RFP-NGFβ和Le-GFP-HIF-1α基因转染BMSCs转染率分别为84.83%和89.63%。Western blot检测显示,转染后的BMSCs能表达目的蛋白NGFβ和HIF-1α。共培养体系ELISA检测结果显示,C组和E组的NGFβ的表达量明显高于A、B组(P<0.05);D组和E组的HIF-1α的表达量明显高于A、B组(P<0.05)。D、E两组的VEGF表达量高于A、B两组(P<0.05)。Image pro-Plus测量神经元轴突长度结果显示,C、D、E组大于A、B两组(P<0.05),E组大于C、D组(P<0.05)。结论与NGFβ/HIF-1α双重转染BMSCs共培养的神经元轴突生长情况良好,在共培养环境中对神经元存活发挥重要作用的NGFβ、HIF-1α、VEGF等因子高表达。
- 庄培袁吕刚范仲凯李永明张玉强贾志强
- 关键词：骨髓间充质干细胞低氧诱导因子-1Α轴突再生
- 选择性线粒体分裂抑制剂抑制大鼠急性脊髓损伤后的细胞凋亡被引量：3
- 2014年
- 目的检测mdivi-1预处理对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后线粒体膜电位,凋亡诱导因子(AIF)释放及细胞凋亡的影响。方法大鼠随机分为:假手术组(Sham组)、单纯脊髓损伤组(SCI组)、二甲基亚砜预处理组(DMSO组),mdivi-1预处理组(mdivi-1组)。采用Allen's方法制备ASCI模型。JC-1标记法检测线粒体膜电位(MMP),Western blot方法检测线粒体及细胞核内AIF,TUNEL法检测细胞凋亡。结果与Sham组相比,SCI组线粒体中AIF先降低后升高,最低点是8h(P<0.01),而细胞核中AIF却呈相反趋势(P<0.01),术后8 h MMP明显降低(P<0.01),凋亡细胞数目明显增多(P<0.01)。与SCI 8 h组相比,mdivi-1组MMP明显升高(P<0.01),线粒体中AIF明显增多(P<0.01),细胞核中AIF明显降低(P<0.01),凋亡细胞数目明显减少(P<0.01)。结论 Mdivi-1具有保护大鼠ASCI后MMP,抑制线粒体中AIF的释放和细胞凋亡的作用。
- 李刚范仲凯贾志强赵兴长李昊天邢恩福吕刚
- 关键词：急性脊髓损伤线粒体膜电位凋亡诱导因子细胞凋亡
- 选择性线粒体分裂抑制剂对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞的保护作用及其机制被引量：2
- 2014年
- 目的：检测选择性线粒体分裂抑制剂-1（Mdivi-1）对大鼠急性脊髓损伤（ASCI）后神经细胞线粒体中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、细胞色素C（Cyt-C）及神经细胞凋亡的影响。方法成年雌性SD大鼠36只，体质量250~300 g，随机分为假手术组（Sham组）、单纯脊髓损伤组（SCI组）、Mdivi-1预处理组（1.20 mg/kg，Mdivi-1组），各12只。Sham组只暴露脊髓，不打击。SCI组和Mdivi-1组采用Allen’s方法制备脊髓损伤模型。Mdivi-1组在脊髓打击之前15 min尾静脉给予Mdivi-1，而SCI组给予等量二甲基亚砜（DMSO）。Sham组在暴露脊髓8 h后立即处死，SCI组和Mdivi-1组均于脊髓损伤后8 h处死；然后取出脊髓节段T9~T11，用分光光度计检测各组脊髓组织线粒体中MDA和GSH的含量，Western Blot法检测线粒体及胞浆内Cyt-C表达情况，荧光TUNEL法观察神经细胞凋亡情况。结果与Sham组相比，SCI组线粒体中Cyt-C和GSH明显减少，但线粒体中的MDA，胞浆中Cyt-C及神经细胞凋亡数目明显增多（P＆lt;0.01）；与SCI组相比，Mdivi-1组线粒体中Cyt-C和GSH明显增多，但线粒体中MDA，胞浆中Cyt-C以及神经细胞凋亡数目明显减少（P＆lt;0.01）。结论 Mdivi-1具有减轻ASCI后神经细胞线粒体氧化损伤，抑制线粒体中Cyt-C的释放及神经细胞凋亡的作用，促进了脊髓功能恢复。
- 李刚范仲凯贾志强张振宇赵兴长吕刚
- 关键词：脊髓损伤丙二醛谷胱甘肽细胞色素C类
- 急性脊髓损伤后线粒体形态结构与线粒体膜电位的变化被引量：7
- 2014年
- 目的探讨大鼠急性脊髓损伤后线粒体形态结构和线粒体膜电位的变化。方法 SD大鼠36只,随机分为对照组(假手术组)和脊髓损伤组(SCI组),每组又分为处理后4 h、8 h、16 h组(各6只)。SCI组采用Allen's打击法,制作大鼠脊髓损伤模型,对照组只暴露脊髓,不打击。透射电镜观察线粒体形态结构的改变;在各时相提取伤段脊髓组织线粒体,JC-1法测定线粒体膜电位的变化。结果 SCI组脊髓组织伤后4 h线粒体体积略增大,嵴排列稍紊乱;8 h线粒体体积增大,嵴稍肿胀;16 h线粒体结构不清,嵴断裂、排列紊乱,部分线粒体膜破裂,有空泡化。脊髓损伤后4 h,线粒体膜电位开始明显下降(P<0.01),随着时间的延长,线粒体膜电位处于下降趋势。结论大鼠急性脊髓损伤后线粒体的形态结构发生明显改变,伤段脊髓线粒体膜电位明显下降,出现功能障碍。
- 贾志强王岩松李刚范仲凯张振宇李昊天孙平吕刚
- 关键词：脊髓损伤线粒体线粒体膜电位
- 线粒体分裂抑制剂对大鼠急性脊髓损伤后线粒体形态与功能的影响被引量：3
- 2015年
- 目的 旨在检测选择性线粒体分裂抑制剂-1（Mdivi-1）预处理对大鼠急性脊髓损伤（ASCI）后线粒体形态,线粒体膜电位（MMP）及线粒体ATP含量的影响。方法 成年雌性SD大鼠72只,体重250~300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组（n=24）：假手术组（Sham组）、单纯脊髓损伤组（SCI组）和Mdivi-1预处理组（1.20 mg/kg,Mdivi-1组）,每组24只。SCI组和Mdivi-1组大鼠采用Allen’s方法制备ASCI模型,Mdi-vi-1组和SCI组大鼠在脊髓打击之前15 min经尾静脉分别给予Mdivi-1或等容量二甲基亚砜（DMSO）。每组大鼠再分为两个亚组,分别于脊髓暴露或者打击后的3和12 h处死,取出脊髓T9-11,采用透射电子显微镜检测线粒体形态,用荧光显微镜和荧光分光光度计检测MMP变化,用荧光分光度计检测线粒体ATP含量的变化。结果 与Sham组相比,SCI 3 h组时,线粒体数目明显减少（〈0.01）,截面积明显增大（〈0.01）,但MMP和线粒体ATP含量无明显变化;SCI 12 h组时,线粒体数目明显增多（〈0.01）,截面积明显减小（〈0.01）,但MMP和线粒体ATP含量明显减低（〈0.01）。与SCI组相比,Mdivi-1 3 h组时,线粒体数目、截面积及MMP和线粒体ATP含量无明显变化;而Mdivi-1 12 h组时,线粒体数目明显减少（〈0.01）,截面积明显增大（〈0.01）,MMP和线粒体ATP含量明显升高（〈0.01）。结论 选择性线粒体分裂抑制剂-Mdivi-1能有效抑制ASCI后线粒体分裂和MMP降低,增加线粒体中ATP的合成,从而保护了线粒体功能。
- 李刚张明超贾志强王继权孙平褚鑫范仲凯吕刚
- 关键词：急性脊髓损伤线粒体形态线粒体膜电位三磷酸腺苷
- 依布硒啉对大鼠急性脊髓损伤后线粒体的保护作用被引量：4
- 2014年
- 目的探讨依布硒啉对大鼠急性脊髓损伤后线粒体氧化损伤、细胞色素C释放及神经细胞凋亡的影响。方法将60只健康SD大鼠按随机数字表法分为5组,每组12只。采用Allen’s法制脊髓损伤(SCI)模型,假手术组仅行椎板切除,SCI模型组行椎板切除+打击,甲基泼尼松龙组打击后给予甲基泼尼松龙腹腔注射处理(30 mg/kg),依布硒啉组打击后给予依布硒啉腹腔注射处理(10 mg/kg),生理盐水组打击后给予等体积0.1%二甲基亚砜的生理盐水溶液腹腔注射处理。术后24 h取受损脊髓,检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量、细胞色素C表达及神经细胞凋亡情况。结果依布硒啉组较SCI模型组脊髓组织线粒体中MDA含量明显降低,GSH明显升高,Western blot检测细胞色素C的释放量减少,TUNEL法检测神经细胞凋亡数目明显减少(均P<0.01)。结论依布硒啉能够改善SCI后线粒体氧化损伤,减少线粒体细胞色素C释放,抑制神经细胞凋亡,对SCI起到保护作用。
- 贾志强王岩松李刚范仲凯张晨冲贺帅吕刚
- 关键词：脊髓损伤线粒体丙二醛谷胱甘肽细胞色素C类依布硒啉
