谷海刚
- 作品数：23 被引量：83H指数：6
- 供职机构：埃默里大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学一般工业技术更多>>
- 神经干细胞移植对老年痴呆模型鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元和学习记忆能力的影响被引量：7
- 2008年
- 目的:基底前脑是老年性痴呆患者脑皮质下神经元丢失最严重的区域,实验拟验证经神经干细胞移植治疗后老年痴呆鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元的变化以及对其空间学习记忆能力方面的影响。方法:实验于2005-12/2006-07在广州医学院解剖学教研室完成。①动物:清洁级SD雄性大鼠28只,随机数字表法分为3组:正常对照组8只、模型对照组8只、细胞移植组12只。另取10只新生SD鼠用于神经干细胞的分离培养。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法:模型对照组、细胞移植组大鼠切断左侧穹隆海马伞,建立老年性痴呆动物模型。利用无血清培养技术获得鼠基底前脑神经干细胞,吸取2.5×1010L-1细胞悬液4μL,术后即刻细胞移植组损伤侧行细胞移植,坐标为前囟+0.6mm,外侧+0.6mm插入,腹侧-5.5mm。③实验评估:移植后4周,采用Y型迷宫对各组动物进行学习记忆能力检测。麻醉后取脑制备组织切片,ABC法免疫组化染色结合图像分析观察各组大鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元的变化。结果:①对空间学习记忆能力的影响:细胞移植组空间学习能力、记忆能力均显著高于模型对照组(P<0.05或P<0.01),基本达到正常水平(P>0.05)。②对小白蛋白阳性神经元的影响:与正常对照组比较,模型对照组损伤侧内侧隔核和斜角带核的小白蛋白阳性神经元数目分别减少62.5%和30.4%;细胞移植组降低幅度明显小于模型对照组(P<0.01)。与正常对照组比较,模型对照组损伤侧内侧隔核、斜角带核小白蛋白阳性神经元的面积、周长、灰度均显著降低(P<0.05或0.01);细胞移植组上述指标较模型对照组均显著增加(P<0.05或0.01)。③相关性分析:小白蛋白阳性神经元数目与大鼠在Y型迷宫中的学习次数呈显著负相关(r=-0.76^-0.79,P<0.01),与记忆能力呈显著正相关(r=0.78~0.84,P<0.01)。结论:神经干细胞移植对老年性�
- 谷海刚龙大宏李晓滨张贵平苏涛李佳楣冷水龙
- 关键词：神经干细胞老年性痴呆
- 神经生长因子缓释微球移植对AD模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元的保护作用被引量：1
- 2008年
- 目的观察神经生长因子微球对AD模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元的保护作用。方法采用双乳化技术制备神经生长因子缓释微球;切断SD大鼠左侧穹隆海马伞,基底前脑注射神经生长因子缓释微球;4周后,利用免疫组化法观察各组大鼠基底前脑ChAT阳性神经元变化。结果损伤组损伤侧的MS和VDB的ChAT阳性神经元大量减少,分别减少61.9%和51.4%;神经生长因子缓释微球治疗组损伤侧的ChAT阳性神经元得到明显的保护,MS和VDB细胞数分别下降20.60%和20.9%,明显高于损伤组损伤侧的ChAT阳性神经元存活数。结论神经生长因子缓释微球能够成功地将神经生长因子运载到脑内,神经生长因子缓释微球移植对AD模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元有明显的保护作用。
- 谷海刚龙大宏宋存先李晓滨
- 关键词：老年性痴呆基底前脑
- 神经生长因子基因重组逆转录病毒载体的构建与鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的构建神经生长因子(NGF)基因重组逆转录病毒表达载体,研究NGF在神经干细胞(NSC)中的表达情况。方法从大鼠海马组织提取总RNA,利用RT-PCR的方法获得编码大鼠β-NGF的基因片段,应用基因重组技术,将大鼠β-NGF基因片段克隆到逆转录病毒表达载体pLEGFP-N1中,通过脂质体Lipofectamine2000转染包装细胞PT67,经G418筛选后,收集阳性克隆病毒上清,用于感染神经干细胞(NSC),观察该NSC表达的NGF对PC12细胞突起生长的作用。结果限制性内切酶酶切分析鉴定表明为正确重组子,β-NGF基因在NSC中获得表达,该NSC的培养上清液可以促进PC12细胞突起生长。结论重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-NGF构建成功,β-NGF基因可在NSC中表达并具有生物学活性。
- 何峻峰龙大宏李佳楣冷水龙谷海刚宣爱国潘学兵
- 关键词：神经生长因子逆转录病毒载体神经干细胞基因重组阿尔茨海默病
- 新生大鼠基底前脑神经干细胞的分离、培养
- 2003年
- 谷海刚龙大宏
- 关键词：新生大鼠基底前脑神经干细胞
- 按摩对羊肠淋巴干压力及流量的影响被引量：1
- 1999年
- 目的测定羊肠淋巴干的正常压力、流量及按摩对压力、流量的影响。方法山羊活体肠淋巴干插管，插管后３０ｍｉｎ测定正常压力，再以３０次·ｍｉｎ－１的频率按摩小肠直至压力不再上升时为止。测量后收集３０ｍｉｎ的淋巴流量，计算其每分钟流量，对压力与流量的相关性进行分析。结果分析用ｔ检验。结果山羊肠干的压力为９．１±２．１５ｃｍＨ２Ｏ；按摩小肠最终压力为３９．５６±１０．１７ｃｍＨ２Ｏ，两者差异具有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。按摩后３０ｍｉｎ的淋巴流量为２．０２±０．６８ｍｌ，每分钟流量为０．０６７４±０．０２ｍｌ·ｍｉｎ－１。淋巴流量与按摩小肠最终压力具有高度相关性（ｒ＝０．９５９，Ｐ＝０．０１）。结论按摩对山羊肠淋巴引流具有明显影响。
- 王树兴王华张剑凯杨文亮谷海刚秦长岭李朝辉张大弓司文章贺琪姜威锋
- 关键词：淋巴管按摩
- 脑源性神经营养因子体外诱导神经干细胞向神经元分化被引量：7
- 2008年
- 目的观察脑源性神经营养因子(BDNF)对新生SD大鼠海马神经干细胞在体外分化为神经元的作用。方法取新生SD大鼠海马组织,以无血清培养技术培养获得神经干细胞,在BDNF诱导下让其在体外分化,7d后,通过免疫荧光技术结合图像分析技术来观察分化所得神经丝(neurofilament,NF)抗原阳性神经元的比率及其最长突起的长度。结果BDNF组分化所得细胞NF阳性率为13.66%,神经元突起长度为(146.27±26.30)μm,对照组分化所得细胞NF阳性率为9.38%,神经元突起长度为(117.00±23.98)μm,两组结果有显著性差异。结论BDNF能提高新生SD大鼠海马神经干细胞体外定向分化为神经元的比率,并且能刺激新生神经元突起的生长。
- 罗媚龙大宏谷海刚何峻峰冷水龙杨丹迪
- 关键词：神经干细胞海马脑源性神经营养因子分化神经元
- BSA-PLGA缓释微球的制备及优化条件的探索被引量：6
- 2008年
- 目的以牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白、聚乳酸-聚乙二醇酸(PLGA)为包裹材料,探索微球的制备方法并优化制备工艺。方法采用复乳-溶剂挥发法制备BSA-PLGA微球,显微测量微球粒径,以微量BCA法测定微球的蛋白含量并计算包封率,进行体外释放,测定微球的累积释放量。探索BSA投药量、PLGA用量、PVA浓度、超声功率等因素对微球包封率、突释量的影响。结果通过正交实验设计,优化了微球的制备工艺,其优化条件是BSA投药量为10mg、PLGA用量为250mg、PVA浓度为1.5%、超声乳化功率为60周。结论通过控制不同的因素,可以得到较高包封率、较小突释、适当载药量和粒径的BSA-PLGA微球。
- 黄婉丹龙大宏谷海刚
- 关键词：牛血清白蛋白微球
- 生长因子缓释制剂在神经系统退变性疾病中的应用
- 2006年
- 利用缓释系统包载生长因子,既能保护生长因子的生物活性,又可以使其缓慢释放。从载体材料与生长因子的简单混合到生长因子缓释微球系统,生长因子缓释技术不断更新并得到广泛应用。就生物可降解生长因子缓释制剂在神经系统退变性疾病中的应用做一综述。
- 谷海刚宋存先
- 抗神经生长因子局部植入在哮喘发病中的作用被引量：7
- 2013年
- 目的将神经生长因子(NGF)缓释微球和抗NGF缓释微球局部植入哮喘大鼠肾上腺,探讨抗NGF在哮喘发病中的可能作用机制。方法雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、哮喘组、NGF干预组和抗NGF干预组,分别干预后予行为学、肺功能、肺组织切片HE染色、肾上腺髓质细胞超微结构(电镜)、肾上腺组织中NGF和苯乙醇胺N-甲基转移酶(PNMT)表达(免疫组织化学法)、血清中NGF、皮质醇、皮质酮、肾上腺素、去甲肾上腺素的浓度(ELISA法)检测。结果行为学示哮喘组大鼠均有不同程度喘鸣、搔抓、烦躁、大小便失禁、攻击性增强等行为,抗NGF组症状相对较轻。肺功能检测示哮喘组、抗NGF、NGF组大鼠均存在气道高反应,抗NGF组较哮喘组气道阻力降低,动态肺顺应性升高。肺组织HE染色示哮喘组存在支气管收缩、炎症细胞浸润、支气管上皮细胞脱落,抗NGF组上述征象不明显。电镜观察见哮喘组、NGF组肾上腺髓质细胞出现空泡样变,嗜铬颗粒分布不均,数量和浓度较对照组降低;NGF组肾上腺髓质细胞膜可见突起;抗NGF组基本接近正常组。抗NGF组PNMT和NGF平均灰度值与哮喘组相比均有明显差异。各组间不同指标浓度水平:(1)肾上腺素:对照组>抗NGF组>哮喘组>NGF组;(2)去甲肾上腺素:NGF组>哮喘组>抗NGF组>对照组;(3)皮质醇:无显著差异;(4)皮质酮:对照组>抗NGF组>哮喘组>NGF组。结论局部植入抗NGF微球能减轻哮喘大鼠肺组织炎性细胞浸润、改善肺功能。其作用机制可能为抗NGF逆转了NGF启动的肾上腺髓质细胞转分化过程。
- 李园园胡成平冯俊涛谷海刚邓彭博王胜峰贺若曦
- 关键词：哮喘神经生长因子肺功能肾上腺素皮质酮
- 神经干细胞在老年性痴呆模型鼠基底前脑内的成活和迁移被引量：3
- 2008年
- 为探讨神经干细胞移植入老年性痴呆模型鼠基底前脑的成活和迁移情况,本研究利用无血清培养技术,加表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维生长因子(FGF-2)刺激生长,在体外进行神经干细胞的克隆培养,用5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)标记,采用免疫组化和免疫荧光法研究神经干细胞的增殖特性和多向分化潜能,用免疫组化和免疫荧光双标技术观察神经干细胞移植后在老年性痴呆模型鼠基底前脑的成活和迁移。结果显示:克隆细胞球呈nestin和BrdU阳性反应。免疫荧光双标检测,贴壁的细胞为BrdU+GFAP阳性反应或者BrdU+NF阳性反应。移植后3周、4周,移植的针道附近以及整个基底前脑散在有许多BrdU+NF和BrdU+GFAP免疫荧光双标细胞。本研究结果提示,基底前脑神经干细胞能够分化为神经元和星形胶质细胞;基底前脑神经干细胞移植后能够在老年性痴呆模型鼠基底前脑内存活和迁移,可以与脑组织整合,并且能够分化成为神经元和星形胶质细胞。
- 谷海刚龙大宏李晓滨冷水龙罗媚
- 关键词：表皮生长因子碱性成纤维生长因子神经干细胞
