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烟曲霉β-葡萄糖苷酶的基因克隆、表达及酶学性质分析: 2013年; 探索获得优良的β-葡萄糖苷酶基因，对实现其工业化生产具有重要意义。烟曲霉Aspergillusfumigatus基因组中含有一个堙，基因（1752bp），编码的蛋白约65kDa，推测为属于糖苷水解酶家族的β-葡萄糖苷酶。将bgl基因克隆并构建了重组表达载体pGEX．bgl，转化大肠杆菌EscherichiacoliBL21（DE3），经IPTG诱导获得表达。重组蛋白经亲和层析纯化后，以七叶苷为底物进行了酶学分析，结果表明该酶的最适温度是45℃，最适pH在5．5～6．0之间，对七叶苷的‰值为17．7mmol／L。该酶在pH4～7范围内稳定；70℃保温2h后仍能保持60％的活性。金属离子和化学试剂对酶活性有不同程度的影响，Ca计对重组酶有轻微的激活作用，而SDS可强烈抑制其活性。由于其相对于真菌来源的其他葡萄糖苷酶稳定性较高，为进一步的研究与应用奠定了基础。; 谢贻欧阳浩淼黄日波陈东金城; 关键词：烟曲霉 Β-葡萄糖苷酶原核表达酶学性质

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谢贻