谢林
- 作品数：23 被引量：28H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 仿生学在移植免疫研究中的应用
- 2007年
- 世界正在进入仿生学时代。在生命科学领域中进行仿真学研究,将极大地促进人类对生命现象的认知,并揭示其普遍规律。运用仿生学原理在天然模型面前扬其利,避其害,将为科学工作者提供一个崭新的科研思维平台。从仿生角度洞悉并破解移植免疫奥秘将是一个具有广阔前景的创新源泉。
- 朱珉王璐谢林陈刚陈实
- 关键词：仿生学耐受
- 采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G_1的真核细胞系
- 2006年
- 目的建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(solublehumanleucocyteantigenG1,sHLA-G1)的真核细胞系。方法采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%。RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白。结论通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系。
- 曾梦华房崇芸王树森朱珉谢林王璐李荣吴雄文陈实
- 改良法分离睾丸支持细胞体外诱导异种淋巴细胞凋亡被引量：4
- 2007年
- 目的改进睾丸支持细胞(Sertoli 细胞)的分离方法及培养条件,探讨 Sertoli 细胞体外诱导异种淋巴细胞凋亡的作用机制。方法取2～4周龄的 SD 大鼠睾丸,采用 V 型胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶二步消化法制备 Sertoli 细胞。用免疫组织化学法(SABC 法)检测 Sertoli 细胞中Fas 配体(FasL)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)、clusterin 的表达;流式细胞仪检测 Sertoli 细胞诱导异种淋巴细胞凋亡情况。结果在分离培养纯化过程中,Sertoli 细胞占培养细胞总数的90%以上,生长状况良好,能稳定表达 FasL、TGF-β_1和 clusterin,并且能够诱导异种淋巴细胞发生凋亡。结论应用本实验方法能够稳定获得大量高纯度的 Sertoli 细胞,并且能够发挥其免疫豁免的功能,从而用于细胞联合移植。
- 尹注增曾梦华谢林李荣黄亚冰朱珉陈刚陈实
- 关键词：淋巴细胞SERTOLI细胞改良法
- Sertoli细胞对同种异体调节性T细胞/辅助性T细胞17分化平衡的调节作用被引量：4
- 2014年
- 目的研究Sertoli细胞对同种异体免疫反应过程中调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)平衡的影响。方法体外分离并培养Sertoli细胞、T淋巴细胞和骨髓来源的DC细胞,将Sertoli、DC细胞分别与同种异体T细胞混合培养,光镜及电镜下观察Sertoli细胞形态,采用Western blot检测Sertoli细胞中人类主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ、B7-H1蛋白的表达,收集培养上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测Sertoli细胞培养上清内的转化生长因子(TGF)-β1、IL-17A等细胞因子水平;流式细胞术观察混合培养细胞分化结果。结果成功在体外培养Sertoli细胞;Western blot结果显示,Sertoli细胞与同种异体Nave CD4+T细胞(CD4+CD62L+CD25-)在体外混合培养时,其表面的MHC-Ⅱ类分子和B7-H1分子的表达量增加;ELISA结果显示,与同种异体Nave CD4+T细胞混合培养72h后,培养上清液中的TGF-β1浓度较单纯Sertoli培养组显著升高[(823.10±59.07)pg/mL vs.(174.89±23.51)pg/mL,P<0.01];流式细胞术结果显示,与同种异体Sertoli细胞共同培养的体系内,Nave CD4+T细胞(CD4+CD62L+CD25-)被诱导分化为CD25+Foxp3+Treg细胞的比例显著增加,从<1.0%增长至27.6%;用Sertoli细胞与Treg细胞混合培养上清液孵育DC细胞/Nave CD4+T细胞,可明显减少培养液中IL-17A的浓度,使其从(361.58±80.27)pg/mL降低至(137.54±52.19)pg/mL(P<0.05);同时IL-17A+T细胞亚群百分比也显著降低(27.2%降至17.9%)。结论Sertoli细胞体外培养产生的抗炎细胞因子和免疫抑制细胞因子能诱导Nave CD4+T细胞分化为CD25+Foxp3+Treg细胞,Sertoli细胞可能通过调节同种异体Treg/Th17分化平衡,诱导免疫耐受。
- 陈莲一谢林
- 关键词：SERTOLI细胞免疫耐受调节性T细胞辅助性T细胞17
- 建立同种大鼠心脏移植超急性排斥反应动物模型被引量：2
- 2006年
- 目的建立大鼠心脏移植超急性排斥反应的实验动物模型。方法以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者。供、受者间连续进行3次皮肤移植,使受者预致敏。再进行颈部异位心脏移植。采用微量淋巴毒试验监测受者体内抗供者抗体滴度的变化。结果预致敏后的受者体内抗供者抗体滴度明显升高。7只受者心脏移植后有6只移植心在24h内被排斥,病理学证实为超急性排斥反应。结论供、受者间连续3次皮肤移植预致敏后,再行心脏移植可以建立稳定的同种移植超急性排斥反应模型。
- 李荣郭晖王大卫谢林曾梦华王树森王璐陈实
- 关键词：心脏移植动物移植物排斥
- 肾移植后HLA-DQ抗体的临床意义探讨
- 目的探讨移植后HLA-DQ抗体的临床意义和其在慢性移植肾功能不全中的作用。方法从2010.1到2011.12在我院规律随访者中随机选取123例初次肾移植受者,包括移植肾功能正常的对照组67例和慢性移植肾功能不全组56例。...
- 朱兰谢林黄伟林正斌明长生陈刚
- 同种大鼠胚胎胰组织移植后在异体内的增殖和分化
- 2006年
- 目的研究同种大鼠胚胎胰组织移植后在异体内重新血管化并再生长发育的可能性。方法将妊娠14．5 d(E14．5)和妊娠15．5 d(E15．5)的Lewis大鼠胚胎胰移植到成年健康Lewis大鼠的肾包膜下,分别在移植后3周和6周开腹观察移植胰的发育情况,并取标本作病理切片观察,采用免疫组织化学染色半定量和定位。结果(1)E14．5和E15．5的胚胎胰移植入肾包膜下3周后,体积均增大约10-15倍,外分泌部分腺泡导管分化发育,B细胞大量增殖,形成胰岛,组织周围有新生血管,且胰岛素分泌功能正常。(2)胚胎胰植入肾包膜下6周后,E14．5的胚胎胰内分泌部分进一步增殖;E15．5的胚胎胰则未见增殖,外分泌部分均有纤维化表现,内分泌部分与外分泌部分有分离趋势。结论(1)E14．5与E15．5的胚胎胰移植于同种大鼠肾包膜下均可在异体内再血管化,并发育为近似正常的胰腺组织。(2)E14．5和E15．5胎龄的大鼠胚胎胰都是比较适合移植的。
- 王璐黄亚冰郭晖王树森谢林曾梦华李荣陈实
- 关键词：胚胎组织移植再血管化
- 可溶性HLA-G1抑制人自然杀伤细胞NK92对猪内皮细胞PED的黏附被引量：1
- 2006年
- 目的研究可溶性HLA-G1(HLA-G5)对人自然杀伤细胞(NK细胞)黏附到猪血管内皮细胞(PED)的抑制作用,从而降低人NK细胞对猪血管内皮细胞杀伤杀伤活性。方法利用核转染技术将pcDNA3-HLA-G5转入LCL721.221细胞株。以RT-PCR、Dot-ELISA技术分别在基因水平和蛋白水平检测HLA-G5的表达;以人类NK细胞系(NK92)效应细胞,猪内皮细胞系(PED)为靶细胞,检测NK92在静止和流动状态下对PED的黏附作用;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HLA-G5抑制NK细胞的杀伤活性。结果与未加入HLA-G5的对照组相比,NK92在静止和流动状态下对PED的黏附功能明显降低(P<0.01),且对HLA-G5组PED的杀伤效率均有明显下降(P<0.01)。结论HLA-G5可以通过抑制NK92对PED的黏附功能,来减轻NK92对PED的杀伤作用。
- 王树森房崇云曾梦华谢林李荣王璐朱珉吴雄文陈实
- 关键词：自然杀伤细胞异种
- 肾移植术后新生HLA-DQ抗体的临床意义被引量：6
- 2014年
- 目的 探讨临床肾移植术后新生HLA-DQ抗体的产生规律及临床意义.方法 入选2012年1月至2013年12月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院长期随访的175例初次肾移植受者,移植前微量淋巴毒和群体反应性抗体（PRA）均为阴性,入组时间在肾移植术后6～18年（平均10年）.根据入组时移植肾功能分为3组：（1）移植肾功能正常的对照组（n=94）：血肌酐＜120 μmol/L;（2）慢性移植肾功能减退组（n=54）：血肌酐持续＞150μmol/L达6个月以上,但尚未透析;（3）移植肾失功能组（n=27）：患者恢复血液透析.所有病例在入组时收集血清,采用流式PRA或Luminex方法进行HLA抗体初筛,抗体阳性者进一步行Luminex单抗原包被的微球法检测分别针对HLA-A、B、DR、DQ位点的抗体水平.结果 （1） HLA抗体的出现与慢性移植肾功能不全密切相关.慢性移植肾功能减退组HLA抗体阳性的出现率为48％（26/54）,移植肾失功能组为52％（14/27）,而对照组的HLA抗体阳性率只有17％ （16/94） （P＜0.01）.（2）在3组HLA抗体阳性的病例中,相比于HLA-DR、HLA-Ⅰ类抗体,HLA-DQ抗体的出现频率均最高,在对照组、慢性移植肾功能减退组、移植肾失功能组分别为14/16、24/26及14/14,此外,HLA-DQ抗体的平均荧光强度也最高.（3） HLA-DQ抗体在对照组的HLA抗体阳性病例中以单独出现为主（10/16）,而在慢性移植肾功能减退组和移植肾失功能组都多数伴随有HLA-DR抗体和Ⅰ类抗体（17/26、14/14）,显示单独出现的HLA-DQ抗体与慢性移植肾功能不全没有直接相关性,而DQ抗体合并DR和（或）Ⅰ类抗体同时出现与慢性移植肾功能减退和失功能有关（均P＜0.05）.结论 从移植肾功能状态而言,HLA-DQ抗体往往先于其他位点的抗体出现.在临床移植肾功能尚稳定时,早期发现HLA-DQ抗体对预警免疫系统的特异性激活及后者所致的慢性移植肾功能减退�
- 朱兰陈刚谢林汪芯王大卫林正斌明长生陈孝平陈知水
- 关键词：肾移植移植物排斥慢性移植肾功能不全
- Sertoli细胞调节同种异体Treg/Th17分化平衡的作用
- 谢林郭晖张利民邢帅张学刘键桦
