谌海兰
- 作品数：15 被引量：39H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教委科研基金国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术机械工程更多>>
- 氨基端前B型钠尿肽单克隆抗体的制备及其鉴定
- 2017年
- 目的通过经典单克隆抗体制备技术制备氨基端前B型钠尿肽(NT-pro BNP)单克隆抗体,将单克隆抗体进行特异性和亲和力鉴定,并用于免疫学检测试剂盒的开发。方法用带His-Trx-标签蛋白的NT-pro BNP免疫Balb/C小鼠制备单克隆抗体。使用PEG1500化学融合法将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。用不带标签的NT-pro BNP对获取的杂交瘤细胞进行反复多次克隆筛选,将稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株经腹腔注射Balb/C小鼠诱导产生腹水,经蛋白G亲和纯化后获得NT-pro BNP单克隆抗体并对其进行亲和力和特异性进行鉴定。结果成功进行细胞融合并获得4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,抗体分泌亚型为Ig G1,可特异性识别NT-pro BNP。经腹腔体内诱生法和蛋白G亲和纯化,获得高质量NT-pro BNP单克隆抗体,经ELISA检测抗体效价在1∶10~5以上。结论通过传统经典单克隆抗体制备技术成功制备NT-pro BNP单克隆抗体,为NT-pro BNP检测试剂盒的研发奠定了基础。
- 谌海兰陈特毕小云
- 关键词：单克隆抗体心力衰竭
- POCT血糖仪与静脉血糖比对分析
- 目的 将全院151 台POCT 血糖仪与检验科生化分析仪进行比对,检测临床正在使用的手持续式血糖仪是否合格.方法 使用肝素钠抗凝的静脉血分别用POCT 血糖仪检测全血血糖浓度和生化分析仪检测血浆浓度,比对偏倚是否符合卫计...
- 谌海兰
- Notch信号通过MAPK途径参与BMP9诱导的间充质干细胞C2C12成骨分化被引量：3
- 2013年
- 目的探讨Notch信号是否通过MAPK通路影响BMP9诱导C2C12细胞成骨分化。方法利用BMP9腺病毒处理C2C12细胞5d后,用PCR和Western blot检测MAPK通路中P38、Erk1/2和JNK总蛋白以及磷酸化水平。用Notch信号特异性抑制剂DAPT阻断Notch信号后,细胞化学染色分析ALP和钙盐沉积,以及早晚期成骨指标Runx2和OCN在RNA以及蛋白水平上的变化。同时检测BMPs靶基因Id1、Id2和Id3 RNA水平的表达和MAPK信号中P38、Erk1/2和JNK总蛋白以及磷酸化水平变化。结果 BMP9能上调Hey1和Notch信号的配、受体表达;BMP9不影响P38、Erk1/2和JNK总蛋白的表达,但能上调其磷酸化水平;DAPT能抑制BMP9诱导C2C12细胞的ALP活性以及钙盐沉积;影响Runx2和OCN成骨标志物的表达;阻断Notch信号后Id1、Id2和Id3表达受到抑制,P38、Erk1/2磷酸化水平下调,而JNK磷酸化水平无明显变化。结论 Notch信号通过MAPK途径参与了BMP9诱导的C2C12细胞的成骨分化。
- 谢佳瑛胥文春张晓艳谌海兰唐敏
- 关键词：NOTCH信号通路MAPK途径成骨分化
- GEM 3000与雅培I-STAT血气分析仪结果比对分析被引量：2
- 2016年
- 目的确保相同标本在不同的血气分析仪上的检测结果具有可比性,对医院使用GEM Premier3000血气分析仪(简称GEM 3000)与雅培I-STAT血气分析仪(简称雅培I-STAT)进行比较,保证使用于临床的血气分析仪能正确反映病人的血气情况。方法 22台血气分析仪,其中雅培I-STAT 11台,GEM 3000 11台。采用相同的血气质控物对两款血气分析仪进行检测,以美国CLIA’88为标准对参加比对的仪器进行评价,并与检验科参加过全国卫生和计划生育委员会室间质评的血气分析仪进行比对,计算两种型号血气分析仪之间的偏倚。结果发现胸心外科1台GEM 3000的氧分压在2号和3号标本中检测结果偏高(分别是113 mm Hg、172 mm Hg),超过了允许的最大范围,比对不符合要求。对不符合比对要求的血气分析仪进行校准并再次比对,合格后给予临床使用。结论临床检测中尽量使用相同型号的血气分析仪,若型号不同,应定期进行比对,保证结果具有可比性。
- 谌海兰陈特徐华建毕小云
- 关键词：血气分析仪GEM
- 不同肾小球滤过率估算方程在术前肾癌患者中的临床应用研究被引量：4
- 2017年
- 目的评价7种不同估算肾小球滤过率(eGFR)方程在术前肾癌患者肾功能监测方面的应用价值。方法选取2012年1月至2015年9月该院泌尿外科肾细胞癌术前住院患者386例,以99mTc-DTPA肾动态显像测定肾小球滤过率(GFR)作为参考标准(rGFR),与7种eGFR做比较。用Spearman相关性分析和Bland-Altman一致性分析评价"金标准"GFR(rGFR)与eGFR的相关性;计算系列诊断性能指标及受试者工作特征曲线(ROC)评价各估算方程在不同影响因素下的诊断能力。结果 7种eGFR与rGFR的结果具有相关性(P均<0.001)。从诊断性能来看,eGFR1和eGFR2较好;而通过各估算方程ROC曲线发现,eGFR5、eGFR2和eGFR1的ROC曲线下面积相对较高。结论 7种eGFR方程在术前肾癌患者肾功能评价方面存在一定差异。CKD-EPI公式诊断价值最大,其次为瑞金公式,但是对于大于70岁的患者不适用。
- 吴燕谌海兰侯玉磊毕小云徐华建胥飚陈特
- 关键词：肾肿瘤肾小球滤过率肾功能
- 无融合标签人胱抑素C重组蛋白的制备
- 2012年
- 目的构建人胱抑素C(CysC)基因的原核表达质粒pCold TF-CysC,表达并制备去标签蛋白的CysC。方法用人CysC的全长编码基因插入原核表达载体pCold TF并测序鉴定。将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导、镍柱纯化后获得带有His标签的重组蛋白TF-CysC。利用GST-HRV 3C蛋白酶去除该融合蛋白的TF标签,再经分子筛一步法同时去除TF标签、3C蛋白酶获得CysC,SDS-PAGE鉴定其纯度。用该CysC免疫新西兰大白兔,制备抗血清,并用间接ELISA及Western blot鉴定。结果测序结果与Genbank中人CysC序列一致,实现了CysC可溶性高表达。纯化的无标签CysC纯度大于95%,分子质量约为13.3 ku,与预期相符。免疫家兔后,获得的抗血清效价达到1∶4×106以上,能特异性识别市售CysC蛋白。该蛋白稳定性良好,在4℃保存一个月未见明显下降。结论成功应用原核表达系统,获得了可用作免疫诊断试剂标准品的CysC,为进一步建立CysC的免疫检测方法奠定了基础。
- 陈特刘宇思谌海兰陈曦王虹张雪梅胥文春
- 关键词：胱抑素C原核表达蛋白纯化
- 利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案治疗高龄非霍奇金淋巴瘤患者的疗效被引量：9
- 2014年
- 目的评价利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案治疗高龄非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者的疗效。方法将2010年10月至2013年10月入院的76例老年NHL患者随机分为两组;CHOP方案组36例,利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案组40例。采用回顾分析方法,比较两组患者6个疗程后的临床疗效并记录其不良反应。结果 CHOP组患者的完全缓解率为25.00%,总有效率为55.56%;利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案组分别为45.00%,77.50%,两组总有效率差异具有统计学意义(χ2=4.133,P<0.05);两组治疗方案毒副反应发生率差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗前的IgA、lgG、IgM水平均无统计学差异(P>0.05),治疗后水平均较治疗前显著下降(P<0.05),且两组间无统计学差异(P>0.05)。结论利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案治疗高龄NHL临床疗效较好且不良反应未增加,但还应实时监测患者的免疫功能。
- 谌海兰
- 关键词：利妥昔单克隆抗体CHOP方案非霍奇金淋巴瘤
- 无标签NT-proBNP重组蛋白的获得及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2012年
- 目的通过原核表达,获得不带标签的NT-proBNP重组蛋白,并用其免疫新西兰大白兔,制备兔抗NT-proBNP抗体。方法从重组菌pET-32a(+)-NT-proBNP提取重组质粒,通过PCR扩增出目的 DNA片段,插入pCold TF载体,转化入大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白。经镍柱亲和纯化、HRV 3C蛋白酶酶切、镍柱亲和纯化,制备不带标签的纯蛋白质,并用临床商品化试剂盒验证其抗原性。用该蛋白质免疫新西兰大白兔制备抗体,western blot鉴定其特异性。结果成功获得高纯度的不带标签的NT-proBNP蛋白,该蛋白质能被商品化的试剂盒识别。用该蛋白质免疫新西兰大白兔成功制备出高效价高特异的抗体。结论成功制备高纯度的无标签NT-proBNP蛋白及其多克隆抗体,为NT-proBNP在临床上的广泛应用奠定了基础。
- 谌海兰陈曦徐绣宇谢佳瑛刘宇思赵家宁曾令斌陈特张雪梅尹一兵胥文春
- 关键词：N末端B型钠尿肽原原核表达蛋白质纯化多克隆抗体
- 即时检验床旁血糖仪与生物化学静脉血糖仪对比分析被引量：6
- 2016年
- 目的分析监测血糖的即时检验(POCT)床旁血糖仪与检验科大型生物化学分析仪(简称生化分析仪)检测结果,以监测临床正在使用的POCT床旁血糖仪是否符合国家卫生和计划生育委员会(简称卫计委)相关使用要求。方法选择重庆医科大学附属第一医院POCT床旁血糖仪(罗氏卓越和强生稳步)和生化分析血糖仪(罗氏Modular-DDPP模块检测仪),对静脉血分别检测全血血糖浓度和血浆血糖浓度,每台血糖分析仪检测50份标本。对比检测标本的偏倚是否符合卫计委的要求,当血糖浓度<4.2 mmol/L时,至少95%的检测结果误差应在±0.83 mmol/L的范围内;当血糖浓度≥4.2 mmol/L时,至少95%的检测结果误差应在±20%范围内。结果笔者所在医院36个科室151台POCT床旁血糖仪检测结果与生化分析仪检测结果对比,有2个指标超过比对要求的最高限,不达标,应进行更换。POCT床旁血糖仪达标率为98.67%。结论血糖仪在使用过程中存在损耗,应根据卫计委相关要求定期与生化分析仪检测结果进行对比,对于对比不达标的血糖仪应进行校准或更换,并应与生化分析仪检测结果进行对比,对比合格后方可用于临床患者自我监测。
- 谌海兰毕小云
- 关键词：血糖仪生化分析仪血糖检测
- 三种血清标志物联合检测在早期肝细胞肝癌中的诊断价值被引量：7
- 2017年
- 目的探讨血清高尔基体蛋白73(GP73)、α-L岩藻糖苷酶(AFU)和甲胎蛋白(AFP)联合检测对早期肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法收集2016年3月至2017年3月该院肝病患者222例,根据疾病类型分为早期HCC组(74例)、晚期HCC组(27例)、肝硬化组(74例)、慢性乙型肝炎组(47例),另选取同期体检健康者49例作为健康对照组。分别测定各组血清AFP、AFU和GP73水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价3项指标单独和联合检测对早期HCC的诊断价值。结果早期HCC组GP73、AFU和AFP水平均明显高于肝硬化组、慢性乙型肝炎组和健康对照组(P<0.05)。在肝癌筛查时,AFP单独诊断的ROC曲线下面积(AUC)为0.910(95%CI:0.864~0.936),两项指标联合时GP73和AFP联合诊断的AUC最大[0.925(95%CI:0.889~0.950)],灵敏度最高(95.0%)。在鉴别诊断早期HCC与肝硬化时,单独诊断以GP73的AUC最大[0.842(95%CI:0.746~0.879)],特异度最高(86.5%);两项指标联合时GP73和AFU联合诊断的AUC最大[0.901(95%CI:0.788~0.907)]。结论 GP73与AFP联合检测可以提高HCC筛查的诊断效能,GP73和AFU联合诊断能够提高早期HCC诊断效能,对于早期HCC和肝硬化的鉴别诊断具有重要意义。
- 陈特毕小云徐华建谌海兰侯玉磊李德涛张莉萍吴燕
- 关键词：肝细胞高尔基体蛋白73Α-L岩藻糖苷酶甲胎蛋白
