薛华
- 作品数：3 被引量：17H指数：3
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：四川省“十一五”农作物及畜禽育种攻关项目国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 甘蓝型油菜半胱氨酸蛋白酶cDNA的克隆及组织特异性表达分析被引量：6
- 2008年
- 采用SSH(Suppression subtractive hybridization)和Race-PCR(Rapid-amplification of cDNA ends)技术克隆得到来自甘蓝型油菜(Brassica napus L.)矮化突变体‘NDF-1’的一个差异表达基因编码区的全长cDNA序列,命名为Bncp5.该基因全长1224bp,含有1080bp的完整开放阅读框,编码359个氨基酸.该基因编码区与甘蓝中一个与衰老相关的半胱氨酸蛋白酶基因(登录号AF454960)同源性达97%,氨基酸序列同源性达到100%.Bncp5编码的蛋白相对分子质量为39.5×103,等电点为5.57.对其活性位点的分析表明其具备真核生物半胱氨酸蛋白酶的活性中心,且有很高的功能区段保守性,推测为一跨膜蛋白.相对定量PCR的检测结果表明,Bncp5在野生型和矮化突变体的根、茎、子叶和真叶中都有表达,但是表达量存在显著性差异.在野生型高秆油菜中,根的表达量最低,在真叶的表达量最高;在矮化突变体中,根、茎中的表达明显高于野生型,而在子叶和真叶中的表达量与野生型油菜的表达量基本一致.
- 张红岩薛华马欣荣赵云王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜矮化突变体半胱氨酸蛋白酶衰老
- 油菜矮秆突变WRKY转录因子cDNA克隆及表达分析被引量：8
- 2008年
- 以甘蓝型油菜为材料,利用已建立的抑制性消减文库(SSH),采用RACE技术克隆到1个植物WRKY转录因子相关基因,命名为BnD11,其cDNA全长1034 bp,含有810 bp的完整开放阅读框,编码269个氨基酸。该基因编码的氨基酸序列与拟南芥WRKY40氨基酸序列相似性为79%,与拟南芥中编码WRKY-DNA结合蛋白40基因的氨基酸序列相似性达78%,与其它多种植物的WRKY转录因子的氨基酸序列也有较高的相似性。半定量RT-PCR对BnD11进行组织特异性表达分析显示:在正常生长条件下,BnD11在野生型和矮秆油菜的各个组织中均有表达,但在矮秆突变的根、茎、茎尖的相对表达量明显高于野生型。研究表明,BnD11功能区段具有很高的保守性,可能参与了油菜的茎秆发育。
- 薛华张红岩李小艳赵云王茂林
- 关键词：甘蓝型油菜WRKY转录因子RT-PCR矮秆
- 甘蓝型油菜小核糖核蛋白BnSmD1编码区全长cDNA的克隆与表达分析被引量：4
- 2007年
- 通过筛选野生型油菜(Pet33-10)与无花瓣油菜(Apet33-10)反向消减文库(SSH)和运用RACE-PCR技术,获得了甘蓝型油菜小核糖核蛋白BnSmD1的全长编码区cDNA(GenBank登陆号DQ298446)。该基因长484 bp,含有一个长354 bp的阅读框。BnSmD1在N端拥有两个高度保守的结构域(Sm-1和Sm-2),羧基端则含有一个RG重复序列。Northern blot表达结果显示:BnSmD1在甘蓝型油菜的各个组织均有表达,但是它在早期花蕾中的表达明显高于同期的叶和茎。通过对BnSmD1在Apet33-10无花瓣品系与野生型有花瓣品系Pet33-10中各组织的表达差异进行比较,发现该基因在Apet33-10的早期花蕾中表达明显下降。因此,BnSmD1可能对植物的早期花发育起到了重要的作用,并很有可能影响花瓣的形成。
- 袁晓萌周云涛张红岩薛华周琳赵云
- 关键词：甘蓝型油菜BLOT抑制性消减杂交
