蔡鹏程
- 作品数：20 被引量：49H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 适当浓度的过氧化氢诱导人支气管上皮细胞发生钙振荡(英文)
- 2013年
- 包括过氧化氢(H2O2)在内的活性氧通过引起细胞内钙的变化而造成细胞损伤。然而,不同浓度的H2O2可以导致细胞内不同的钙变化,并激活不同的信号通路。细胞内钙振荡是其中的一种钙信号变化形式,钙振荡可以调控转录因子NF-κB的活性。该研究探讨可以诱导支气管上皮细胞内钙振荡发生的H2O2浓度。体外培养人支气管上皮细胞,采取钙离子荧光探针Fura-2标记细胞,并使用离子成像系统,观测不同浓度的H2O2(0～1 000μmol/L)作用下细胞内钙浓度的变化。结果发现,低于50μmol/L的H2O2仅仅引起"钙火花";50～500μmol/L的H2O2导致细胞内钙振荡的发生;而1 000μmol/L的H2O2引起细胞内持续的高钙;同时也证实150μmol/L的H2O2诱发明显的钙振荡,而钙振荡随后引起了NF-κB活性的升高。该研究提示,适当浓度的H2O2可以诱发支气管上皮细胞内钙振荡的发生,推测可能是活性氧导致慢性气道炎症损伤的一个机制。
- 杨卫兵王永全叶青蔡鹏程朱莉萍叶红马万里
- 关键词：活性氧钙振荡支气管上皮细胞
- 靶向转酮醇酶样基因1 siRNA表达载体的构建及鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的构建针对转酮醇酶样基因1(TKTL1)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并检测其沉默效应。方法采用人U6 SnRNA启动子,分别把被9 bp序列间隔的19 bp长短的TKTL1靶序列的反向重复序列,置于pEGFP-C1-U6质粒载体中,构建成TKTL1短发夹环RNA,产生重组质粒pEGFP-C1-U6/TKTL1,分别用PstⅠ和SalⅠ酶切鉴定及测序分析,并将重组质粒转染人结肠癌细胞株LoVo,通过RT-PCR检测TKTL1基因表达水平的变化。结果酶切鉴定与DNA测序分析证明,TKTL1基因的siRNA表达载体构建正确,RT-PCR结果表明转染重组质粒的LoVo细胞TKTL1基因的表达水平明显降低。结论成功构建了针对TKTL1基因的siRNA表达载体,转染LoVo细胞后可显著抑制TKTL1基因表达。
- 张德太杨菊红胡丽华蔡鹏程
- 关键词：SIRNA
- TIM4在湿疹和RA患者外周血单核细胞的表达水平研究
- 2016年
- 目的:研究TIM4在湿疹和类风湿性关节炎(RA)患者外周血单核细胞的表达水平。方法:采用流式细胞技术分别检测30例健康体检者、30例湿疹患者、30例RA患者及30例IgE升高患者TIM4阳性细胞占外周血单核细胞的比例,检测各组嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞占白细胞的比例并对其与TIM4水平的相关性进行分析。结果:与对照组相比,湿疹患者组,RA患者组的TIM4阳性细胞占外周血单核细胞比例均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),而IgE升高组差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,湿疹患者组的嗜酸性粒细胞比例显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),而RA患者组、IgE升高患者组差异均无统计学意义(均P>0.05)。各组TIM4比例与嗜酸性粒细胞比例相关性分析中,只有对照组差异有统计学意义(P<0.05),其他各组差异均无统计学意义(均P>0.05)。各组TIM4与单核细胞、TIM4与淋巴细胞差异均无统计学意义(均P>0.05)。另RA组的TIM4比例与患者年龄相关(P<0.05),其他各组均无相关性。结论:TIM4在湿疹、RA患者外周血单核细胞表达水平较正常升高,提示TIM4与这类疾病存在相关性。
- 魏燕蔡鹏程胡丽华
- 关键词：湿疹类风湿性关节炎IGE嗜酸性粒细胞
- 哮喘患者外周血单个核细胞TIM-3及Galectin-9的表达与临床意义被引量：4
- 2016年
- 目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白3（TIM-3）和半乳糖凝集素-9（Galectin-9）基因在急性发作期哮喘患者外周血单个核细胞的表达及临床意义。方法收集2014年1月～10月门诊急性发作期哮喘患者60例（排除不符合者15例，确定入选45例）及30例健康体检者（对照组），以实时定量RT-PCR法分别对哮喘患者及体检者外周血单个核细胞（PB—MCs）中的TIM-3，Galectin-9和IFN-γ的表达情况进行同步测定，初步探讨TIM-3，Galectin-9在哮喘发病中的潜在作用。结果急性发作期哮喘患者PBMCs中TIM-3，Galectin-9及IFN-γ mRNA水平均分别高于健康对照组（U=458．5，P=0．019；U=437．5，P=0．010；U=260，P〈0．001），二者间的差异均有统计学意义。结论TIM-3／Galectin-9可能参与了哮喘的发生、发展，TIM-3或（和）Galectin-9有可能为治疗哮喘提供一个新的靶点。
- 梁涛张杨许依婷王宁蔡鹏程王晓蓓胡丽华
- 转酮醇酶1在人结肠癌细胞株LoVo增殖中的作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨转酮醇酶1(TKTL1)在体外培养的人类结肠癌细胞株(LoVo)生长增殖中的作用。方法构建针对TKTL1 mRNA的小干扰RNA(siRNA)质粒,将该质粒转染LoVo细胞;采用实时定量RT-PCR检测转染前后LoVo细胞转酮醇酶基因家族中转酮醇酶(TKT)、TKTL1、转酮醇酶2(TKTL2)mRNA表达水平的变化,通过流式细胞术和MTT法检测转染前后LoVo细胞周期和细胞增殖的改变。结果转染组(携带有pEGFP-C1-U6/TKTL1)、质粒对照组(携带有pEGFP-C1-U6/UC)和未转染组(未转染细胞)中TKT和TKTL2 mRNA的表达水平差异无显著性意义(P>0.05)。转染组细胞中TKTL1的表达水平与质粒对照组和未转染组相比,明显下调,且转染组LoVo细胞总转酮醇酶活性明显下降,细胞增殖明显被抑制,LoVo细胞被阻滞在G0/G1期。结论TKTL1在人类结肠癌细胞(LoVo细胞系)的生长增殖中起重要作用,TKTL1可能成为肿瘤治疗的新靶点。
- 杨菊红胡丽华张德太蔡鹏程
- 关键词：小干扰RNALOVO细胞
- 武汉地区支气管哮喘患儿过敏原特异性IgE分析被引量：10
- 2009年
- 目的:探讨武汉地区支气管哮喘儿童特异性过敏原分布及规律。方法:应用德国欧蒙公司生产过敏原特异性IgE检测试剂盒(中国组合),采用免疫印迹法对216例武汉地区支气管哮喘儿童进行吸入性和食入性过敏原的血清学检测;并按年龄分为婴幼儿组(52例)和儿童组(164例)。对各组过敏原状况进行分析比较。结果:216例患儿中吸入性过敏原呈阳性162例(75%)。其中尘螨152例(70.3%)最高,屋尘89例(41.2%)、真菌组合78例(36.1%)分列其后;儿童组对吸入性过敏原及3种常见吸入性过敏原的阳性率比婴幼儿组高(P<0.05)。食入性过敏原呈阳性52例(24%),以虾蟹34例(15.7%)、海鱼26例(12%)、淡水鱼18例(8.3%)分居前3。不同年龄组阳性率差异无统计学意义。结论:过敏是哮喘发病重要因素,引起武汉地区儿童支气管哮喘的过敏原以吸入性过敏原为主并且阳性率随年龄增长而升高;尘螨是最重要的过敏原,食物性过敏原对哮喘的影响亦需重视。
- 武其文蔡鹏程陈治中吴晓慧孔玲玲胡丽华
- 关键词：支气管哮喘儿童
- 阿霉素对HepG2细胞G6PD表达和活性的影响被引量：2
- 2007年
- 目的探讨化疗药物阿霉素(ADM)在体外对HepG2细胞6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)表达和活性的影响。方法将0.5μg/mlADM作用于HepG2细胞,MTT法检测HepG2细胞的生长抑制情况;Beutler改良法测定胞内还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,速率法测定G6PD活性,实时荧光定量RT-PCR法观察G6PD mRNA表达水平的变化。结果24h实验组的抑制率为46.1%。ADM作用4h和24h后,G6PD mRNA的表达增强,G6PD活性高于未加药对照组(P(0.05)。4h实验组GSH含量低于对照组(P(0.05)。结论ADM在体外能明显抑制HepG2细胞生长,能诱导HepG2细胞G6PD mRNA表达增加、活性增强;其机制可能与G6PD参与肿瘤细胞内抵抗氧化压力有关。
- 蔡鹏程张德太杨菊红胡丽华
- 关键词：阿霉素HEPG2细胞还原型谷胱甘肽
- 支气管哮喘易感区域5q31-33内Tim-3基因单体型分析被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨染色体上支气管哮喘易感区域5q31-33内Tim-3基因多态性与支气管哮喘的关系。方法:应用限制性片段长度多态性技术方法,分析了118个儿童变应性哮喘核心家系Tim-3基因4个SNPs(rs10053538、rs10515746、rs13170556和rs9313441)的基因型;采用基于家系传递不平衡检验(TDT),分析基因分型数据;应用TRANSMIT软件构建单体型并进行单体型关联分析。结果:①基于家系的TDT分析显示,Tim-3基因的4个SNPs由杂合子父母传递给患病子代的等位基因频率不比预期值高,与哮喘无关(P>0.05)。②Transmit多个位点单体型分析结果显示由Tim-3基因rs10053538、rs13170556、rs9313441构建的单体型与支气管哮喘有关联(Global 2=10.83,P<0.05)。父母传递给患病子女GGG单体型的观察值小于期望值,差异显著(2=8.24,P<0.01)。结论:中国汉族人群中,位于染色体5q31-33区域的Tim-3基因本身或其附近的基因可能与儿童变应性哮喘的易感性相关。
- 武其文胡丽华蔡鹏程崔天盆陈凤花
- 关键词：基因TIM-3儿童变应性哮喘单核苷酸多态性
- 基于家系的Tim-1基因启动子多态性与儿童过敏性哮喘的关联研究被引量：4
- 2010年
- 目的:以家系资料为基础,利用遗传不平衡原理探讨染色体5q31-33区Tim-1基因启动子3多态性-2562G>A、-416C>G和-232G>A与湖北地区汉族儿童过敏性哮喘的关系。方法:应用限制性片段长度多态性技术分析了118个儿童过敏性哮喘核心家系Tim-1基因-2562G>A、-416C>G和-232G>A多态性位点的基因型;采用基于家系的传递不平衡检验(TDT)分析基因分型数据;应用TRANSMIT软件构建单倍型并进行单体型关联分析。结果:①118个核心家庭TDT分析显示-2562G>A、-232G>A位点由杂合子父母传递给患病子代的等位基因频率没有偏离50%,差异无显著性(P>0.05),-416C>G位点由杂合子父母传递给患病子代的G等位位点的观察值明显高于期望值(P<0.05)。②TRANSMIT单体型传递不平衡分析显示父母传递给患病子女GCA和GGA单体型的观察值与期望值差异有显著性(P<0.05);Globalχ2检验结果显示Tim-1的单体型与儿童过敏性哮喘有关联(χ2=17.26,P<0.01)。结论:Tim-1基因启动子的-416C>G位点与中国湖北地区汉族儿童过敏性哮喘易感性相关,由其构建的单体型也与哮喘相关。Tim-1基因遗传多态性可能在哮喘的发病中起重要的作用。
- 武其文浦春蔡鹏程胡丽华
- 关键词：TIM-1儿童过敏性哮喘单核苷酸多态单体型
- TIM4在过敏性哮喘患者单核细胞和哮喘小鼠模型肺组织表达增高被引量：5
- 2015年
- 目的探讨T细胞免疫球蛋白粘蛋白域4(T cell immunoglobulin domain and mucindomain 4,TIM4)在过敏性哮喘中的表达及与疾病之间的关系。方法随机选取了30例过敏性哮喘患者和30例健康对照的全血标本,流式细胞术检测了TIM4在单核细胞的表达水平,库尔特计数法检测了嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞占白细胞的比例。免疫组织化学法检测了哮喘小鼠模型和对照小鼠肺组织TIM4的表达水平。结果哮喘患者组TIM4阳性细胞占外周血单核细胞的2.51%,显著高于健康对照组的0.68%;哮喘患者组的嗜酸性粒细胞比例(3.88%)显著高于健康对照组(1.23%);但TIM4表达水平与嗜酸性粒细胞,单核细胞与淋巴细胞之间未见相关性。哮喘小鼠模型气道上皮细胞TIM4的表达水平高于小鼠对照组。结论TIM4在过敏哮喘中的表达水平升高,可能参与了过敏性哮喘的免疫失衡机制。
- 蔡鹏程魏燕胡丽华
- 关键词：过敏性哮喘嗜酸性粒细胞
