蔡少鑫 作品数:15 被引量:41 H指数:3 供职机构: 福建省立医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 福建省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Hint2促进乳腺癌细胞株MCF7对紫杉醇注射液的敏感性 被引量:1 2013年 目的探讨高表达三联组氨酸核苷酸结合蛋白2(Hint2)增强人乳腺癌细胞株MCF7对紫杉醇注射液敏感性的影响。方法构建高表达Hint2的载体pCMV-HA-Hint2并转染MCF7细胞,通过免疫荧光和Western blot方法检测Hint2的表达,采用噻唑蓝(MTT)法检测高表达Hint2后MCF7细胞对紫杉醇注射液的敏感性,采用流式细胞AnnexinV方法检测细胞凋亡。结果 pCMV-HA-Hint2转染36 h后,细胞的Hint2基因表达明显增加,5μmol.L-1的紫杉醇注射液处理24 h后,Hint2高表达组细胞活性为33.78%,而对照组细胞活性为44.12%。结论 Hint2高表达能显著增加MCF7细胞对紫杉醇注射液的敏感性。 蔡少鑫 陈成 杨熹 邓豫 李兆明 李小兰 胡俊波关键词:紫杉醇注射液 乳腺癌 高表达蛋白hSav1对人胚肾HEK293增殖能力的影响 2010年 目的 观察高表达人Salvadorl(hSav1)蛋白对人胚肾293(HEK293)细胞增殖的影响.方法 构建含有绿色荧光蛋白(GFP)的hSav1质粒GFP-N1-hSav1;将构建好的GFP-N1-hSav1质粒在脂质体Lipofectamine 2000的介导下转染HEK293细胞,荧光显微镜下观察质粒转染效率;分别在转染后12、24、36、48 h通过噻唑蓝(MTT)比色法计算细胞增殖抑制率,抑制率=[(对照-空白)-(给药-空白)]/(对照-空白)×100%;转染后36 h加入5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU),通过其掺入比率来显示hSav1对细胞增殖的影响.结果 质粒GFP-N1-hSav1构建成功,转染效率为70%-80%左右,蛋白hSav1明显高表达;MTT结果显示转染质粒后12、24、36、48 h,高表达蛋白hSav1组的细胞增殖抑制率分别为2%、5%、15%、23%,而阴性对照分别为2%、3%、2%、2%;BrdU结果显示,在HEK293细胞中高表达蛋白hSav1后细胞增殖抑制率为(27.3±3.8)%,阴性对照组的细胞增殖抑制率为(12.9±5.3)%,差异有统计学意义(P〈0.05).结论 在人胚肾HEK293中高表达蛋白hSav1可明显抑制细胞增殖能力. 李兆明 董硕 刘韦成 蔡少鑫 罗学来 李小兰 陶德定 严群 龚建平 胡俊波关键词:细胞增殖 人胚肾细胞 Six1蛋白对在结肠癌细胞株HT-29增殖能力影响的实验研究 被引量:2 2016年 目的研究高表达Six1对人结肠癌细胞株HT-29增殖能力的影响。方法运用慢病毒构建高表达Six1的HT-29稳定细胞株,应用Western blot方法、MTT比色法、BrdU法检测Six1的蛋白表达。结果成功构建Six1表达的HT-29Six1+细胞,实验组HT-29Six1+细胞Six1蛋白表达量为对照组HT-29con的4.3倍;采用MTT法,以第1天的吸光度A值作为参照标准,HT-29Six1+组高于HT-29con组(第2天为2.35±0.68 vs 1.03±0.67,第3天为6.33±0.60 vs 2.44±1.01,第4天为14.70±1.40 vs 4.60±1.30,第5天为20.60±2.40 vs 9.25±1.60),从第3天开始,差异有统计学意义(P<0.05)。采用BrdU法HT-29Six1+组的比例高于HT-29con组[(45.97±1.21)%vs(29.56±1.05)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HT-29Six1+细胞株稳定高表达Six1,高表达Six1可以增强HT-29细胞的增殖能力。 蔡少鑫 陈炆颖 王乐 杨常顺 李伟华关键词:HT-29 结肠癌 DACH1对非小细胞肺癌细胞生长的影响及其机制研究 第一部分 目的:检测非小细胞肺癌组织中DACH1的表达情况及其临床意义,并探索其表达变化的可能机制。 方法:1.从oncomine数据库中获得DACH1在肺癌组织中的mRNA表达情况;从Biomax(美国)公司购得人... 蔡少鑫关键词:非小细胞肺癌 表观遗传学 细胞生长 文献传递 Six1通过PI3K通路抑制肺癌细胞A549的增殖和迁移 被引量:2 2014年 目的研究Six1基因对人肺癌细胞A549增殖和迁移能力的影响及其作用机制。方法将Six1的特异小干扰RNA序列转染入A549细胞中,应用Western印迹法检测Six1在A549细胞中的蛋白水平的表达情况,应用MTT法和细胞计数观察低表达Six1对A549细胞增殖的作用,应用划痕实验和transwell侵袭小室实验检测A549细胞迁移能力的变化情况,应用Western印迹法检测PI3K信号通路蛋白的表达变化。结果在A549细胞中,特异的小干扰RNA使Six1在蛋白水平表达降低,低表达Six1的A549细胞系增殖和迁移能力下降,p-AKT的蛋白表达降低。结论在A549细胞系中Six1通过PI3K通路抑制A549细胞的侵袭和转移能力。 陈炆颖 蔡少鑫 洪如钧 林明 陈愉生关键词:肺癌 PI3K通路 三联组氨酸核苷酸结合蛋白2启动子报告基因质粒的构建和活性鉴定 2016年 目的三联组氨酸核苷酸结合蛋白2(Hint2,histidine triad nucleotide binding protein 2)在肝癌组织中低表达并与临床病理分期和病人预后密切相关,为研究Hint2的基因表达调控,构建人Hint2启动子荧光素酶报告基因质粒并鉴定活性。方法提取人基因组DNA,以其为模板,将含有Hint2启动子的不同长度的片段插入荧光素酶质粒p GL3-basic,后与β-半乳糖苷酶共转染He La细胞,转染后24h通过β-半乳糖苷酶实验检测转染效率,通过荧光素酶实验检测转录活性。结果质粒p GL3-h1(-6--463,457bp),p GL3-h2(-6--1255,1249bp)构建成功后,与β-半乳糖苷酶共转染人子宫颈癌He La细胞。转录活性=荧光素酶值/β-半乳糖苷酶值,结果显示p GL3-basic荧光素酶值/β-半乳糖苷酶值为147.3272,而p GL3-h1为67936,p GL3-h2为64234.19。空质粒与p GL3-h1,p GL3-h2之间差异具有统计学意义,而p GL3-h1,p GL3-h2之间差异不具有统计学意义。结论 Hint2位于转录起始位点上游-6至--463之间的启动子区域具有强转录活性。 许呈扬 蔡少鑫关键词:启动子 荧光素酶 三联组氨酸核苷酸结合蛋白2对结肠癌细胞SW620侵袭迁移的影响 2016年 目的 观察上调三联组氨酸核苷酸结合蛋白2(Hint2)表达对结肠癌细胞SW620侵袭迁移能力的影响,探讨Hint2表达调控SW620侵袭迁移的可能机制.方法 用慢病毒pLVX-IRES-ZsGreen1-Hint2载体转染293T后构建Hint2过表达SW620^Hint2+细胞株;Western blot检测细胞Hint2的表达水平,Transwell侵袭迁移实验以及划痕实验检测结肠癌细胞侵袭数目和迁移距离,分析其与Hint2表达的关系.结果 成功构建Hint2过表达的SW620^Hint2+细胞;SW620^Hint2+组细胞Hint2蛋白表达量为SW620组的3.1倍;SW620^Hint2+组穿透基质胶的细胞数显著少于SW620组[(52.33±5.05)%比(112.83±10.11)%,P<0.05].SW620^Hint2+组迁移的细胞数显著少于SW620组[(51.17±11.64)%比(111.17 ±11.64)%,P<0.05].划痕实验24 h后SW620^Hint2+组细胞迁移的平均距离显著短于SW620组[(0.37 ±0.03) mm比(0.71±0.04)mm,P<0.05].细胞Hint2的表达水平与其侵袭及迁移能力呈负相关(r=-1.000,P<0.01).结论 成功构建后的SW620^Hint2+细胞株稳定过表达Hint2,其侵袭及迁移的能力明显下降,由此提示Hint2的上调可能参与结肠癌细胞转移和迁移能力的负性调控。 周飙寰 王欢 蔡少鑫 杨常顺 王乐 李伟华关键词:结肠癌 迁移 完全腹腔镜残胃癌根治术26例临床分析 被引量:1 2020年 目的探讨完全腹腔镜近端残胃癌根治术的安全性、可行性及近期疗效。方法回顾性分析福建省立医院2016年1月至2019年6月收治因胃良性病变曾行远端胃大部切除、BillrothⅡ式吻合术后的残胃癌病人,行腹腔镜近端残胃癌根治术,腔内Roux-en-Y吻合术重建消化道的26例病人临床资料。结果26例病人中肿瘤位于残胃底贲门9例,位于残胃空肠吻合口17例。病人均顺利完成腹腔镜残胃切除D2淋巴结清扫术及腔内Rouxen-Y食管空肠吻合重建消化道。手术时间(152.3±21.3)min,重建消化道时间(38.6±12.5)min,术中出血量(55.1±21.8)mL。平均清扫淋巴结(28.1±7.4)枚。上切缘距食道贲门连接线中位距离2.5(2.1,4.6)cm,距肿瘤上界中位距离5.5(4.1,6.2)cm,上切缘均未见阳性。辅助切口平均长度(4.1±0.8)cm。术后肛门排气时间(29.5±11.2)h,流质进食时间(19.1±8.6)h,术后住院时间(7.8±1.9)d。术后并发症:Clavien-Dindo分级Ⅰ级发生率为3.8%(1/26),辅助切口感染1例。Ⅱ级发生率为7.7%(2/26),其中炎性肠梗阻1例,腹腔感染1例,予保守治疗痊愈。无Ⅲ级以上并发症,无吻合口漏、出血、梗阻及手术相关死亡。26例病人均存活获得随访,平均随访时间9.2个月。食管空肠吻合口大小(4.6±0.5)cm,Roux-en-Y滞留综合征发生率为7.7%(2/26),反流性食管炎11.5%(3/26),无吻合口狭窄、未见肿瘤复发或转移者。结论应用完全腹腔镜技术行近端残胃癌术根治因胃良性病变行远端胃大部切除术后(BillrothⅡ式吻合)的病人安全可行,具有术中出血量少,术后恢复时间短等优点,并有满意的近期效果。 杨常顺 杨凤兰 蔡少鑫 周立远 林奕东 沈祈远 李伟华关键词:残胃癌 ROUX-EN-Y吻合 姜黄素调控乳腺癌细胞增殖与转移机制研究 被引量:6 2013年 目的研究姜黄素对人乳腺癌细胞MDA-MB-453中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其对肿瘤细胞增殖和转移的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法和细胞计数观察姜黄素抑制MDA-MB-453细胞增生作用;采用transwell侵袭小室测定姜黄素对MDA-MB-453转移的影响;采用Real-time PCR和Western blot印迹法检测常氧和乏氧状态下姜黄素对MDA-MB-453细胞系中HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平的影响,同时采用Real-time PCR和ELISA法检测姜黄素对HIF-1α下游靶基因血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平和蛋白表达水平的影响。结果姜黄素对MDA-MB-453细胞体外生长和转移具有抑制作用;常氧、乏氧状态下加入姜黄素后,MDA-MB-453细胞系中HIF-1α的mRNA水平无变化,但蛋白水平明显降低,VEGF mRNA水平和蛋白水平均明显降低。结论姜黄素通过HIF-1α调控MDA-MB-453细胞系增殖和转移。 蔡少鑫 陈成 杨熹 李小兰 李兆明 胡俊波关键词:姜黄素 乳腺癌 缺氧诱导因子-1Α 细胞增殖 细胞转移 磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基p55PIK表达载体的构建及单克隆株的筛选 被引量:2 2010年 目的构建表达载体pEGFP-N1-p55PIK,在人胚胎肾细胞株HEK293中筛选其稳定表达的细胞株。方法 PCR扩增p55PIK基因全长,经过Xho1和Xma1酶切、T4DNA连接酶连接、DH5α转化,酶切和测序鉴定以确定构建质粒正确。转染人胚胎肾细胞株HEK293,G418筛选稳定表达p55PIK的单克隆细胞株,应用Western blot方法检测p55PIK蛋白的表达。结果 pEGFP-N1-p55PIK质粒经PCR、酶切、测序鉴定正确,经过G418筛选后获得稳定细胞株,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白在HEK293细胞中的表达,Western blot检测结果显示稳定转染pEGFP-N1-p55PIK的细胞中p55PIK表达水平增高。结论正确构建表达载体pEGFP-N1-p55PIK,并在HEK293细胞中成功筛选出稳定表达p55PIK的细胞株,为进一步探讨p55PIK的功能提供了良好的工具。 左学良 王桂华 蔡娟 邓豫 董硕 蔡少鑫 李小兰 陶德定 胡俊波关键词:磷脂酰肌醇3-激酶 基因表达 克隆细胞