菜少丽
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 高通量脂肪酶稳定性测定法-ANS法的建立被引量：2
- 2011年
- 根据蛋白质变性后结构变化的特点和荧光探针8-苯胺基-1-萘磺酸（8-Anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS）的特性,建立了一种快捷而准确的脂肪酶热稳定性（Tm）测定的新方法——ANS脂肪酶稳定性测定法,即将脂肪酶在25℃-65℃的不同温度下保温30 min后,加入到ANS反应体系（0.2 mg/mL酶蛋白,0.05 mmol/L ANS,20 mmol/L Tris-HCl（pH 7.2）,100-500 mmol/L NaCl）中。在激发波长378 nm,发射波长465 nm下测定荧光值。通过GraphPad Prism软件分析得出脂肪酶的Tm。利用该方法测定了野生型扩展青霉脂肪酶及其突变体的Tm值,结果与传统的NaOH滴定和平板透明圈法的测定结果相似。同时,利用该方法可在96孔板上快速完成数十个样品的Tm测定,从而成为一种快速、可靠、可用于高通量的酶稳定性的测定方法。
- 冯蔚宗林俊涵菜少丽邹有土陈国仁黄平林雅静王冰冰林琳
- 关键词：脂肪酶热稳定性
