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农杆菌介导的猕猴桃ACO反义基因遗传转化被引量：1: 2013年; 以猕猴桃米良1号的当年生嫩枝及叶片为外植体,构建了双右边界双元载体pCAMBIA1300-actin-term-2,通过根癌农杆菌EHA105菌株介导,将ACO反义基因导入猕猴桃植株基因组。结果表明,愈伤组织预培养20 d,农杆菌侵染30 min,EHA105菌液浓度D=0.6,共培养5 d,经PCR法检测证明ACO反义基因已转入转化植株基因组中。; 刘艺朱杰苑平田宏现; 关键词：猕猴桃

猕猴桃ACC氧化酶反义基因转化猕猴桃的研究被引量：5: 2012年; 为建立猕猴桃ACC氧化酶反义基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕猴桃,从海沃德猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.var.deliciosa‘Hayward’)叶片中提取总RNA,反转录合成cDNA第一链,并以此为模板,扩增得到ACC氧化酶(ACO)基因片段约1 kb,经限制性内切酶图谱分析,组建亚克隆并进行测序,其开放阅读框长957 bp,编码319个氨基酸,与其他已公布的ACC氧化酶cDNA的核苷酸(AB003514.1)及氨基酸序列(BAA21541.1)同源率分别高达94.0%和95.6%,证明所克隆的cDNA序列的准确性。构建该基因的反义表达载体,并通过农杆菌介导的方法成功转化米良一号猕猴桃(Actinidia deliciosa cv.Miliang-1),得到再生苗。取14株经PCR检测,其中10株检测到ACC氧化酶基因目的条带,阳性植株占71.4%。实时荧光定量PCR分析结果显示,再生苗ACO基因的表达量低于野生型58%～81%。; 田宏现苑平王曼玲刘艺李菁夏新界谭晓风; 关键词：猕猴桃 ACC氧化酶农杆菌介导反义表达载体

高抗性耐贮转基因猕猴桃的选育及适应性研究: 红阳猕猴桃原产于四川省苍溪县，因其口感好，肉质细腻，具有极高的开发利用价值。但红阳猕猴桃因为抗病性差，果实贮藏期太短等原因，常给果农带来巨大的经济损失，不利于推广种植。为建立猕猴桃基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕...; 苑平; 关键词：猕猴桃抗病性能转基因技术品种选育

一种耐贮猕猴桃新品种的选育方法: 本发明公开了一种耐贮猕猴桃的选育方法，该方法包括（1）ACO基因的获得；（2）将ACO基因反向连接入双右边界双元载体，将载体转化入农杆菌中，通过叶盘转化法导入愈伤组织中，再通过筛选培养基获得抗性愈伤组织，经过分化培养基培...; 田宏现苑平刘艺; 文献传递

猕猴桃ACC氧化酶反义基因转化猕猴桃的研究: 为建立猕猴桃ACC氧化酶反义基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕猴桃,从海沃德猕猴桃(Actinidiachinensis Planch.var.deliciosa'Hayward')叶片中提取总RNA,反转录合成c...; 田宏现苑平王曼玲刘艺李菁夏新界谭晓风; 关键词：ACC氧化酶农杆菌介导反义表达载体猕猴桃; 文献传递

利用双T-DNA载体获得无筛选标记的转基因猕猴桃: 2013年; 以美味猕猴桃品种米良1号的当年生嫩枝及叶片为外植体,构建了1个双T-DNA载体pCAMBIA1300-actin-term-2,通过根癌农杆菌EHA105菌株作为介导,将aco反义基因导入米良1号猕猴桃中。通过后代植株的遗传分离,以期获得无潮霉素筛选标记的转基因植株。结果表明,愈伤组织预培养20 d,侵染30 min,EHA105菌液浓度Dnm=0.6,培养5 d,经PCR法检测证明aco反义基因已转入转化植株基因组中。; 刘艺周罗琴黄苛苑平朱杰田宏现

ACC氧化酶反义基因转化‘翠玉’猕猴桃被引量：1: 2019年; 为建立‘翠玉’猕猴桃基因功能研究技术平台并通过生物技术改良‘翠玉’猕猴桃,本研究以‘翠玉’猕猴桃叶片为实验材料,利用农杆菌介导法将ACC氧化酶(ACO)基因的反义链导入‘翠玉’猕猴桃,共获得14株潮霉素抗性植株。PCR鉴定结果显示,其中8株扩增获得了目的条带,初步统计阳性植株约为57.1%。随机挑选其中4株进行实时荧光定量PCR检测,结果表明,ACO基因的相对表达量是野生型植株的22%~41%。本研究为利用分子生物学手段改良‘翠玉’猕猴桃品种提供了工作基础。; 苑平苑平田宏现王曼玲王曼玲孔佑涵; 关键词：反义RNA技术农杆菌

米良一号猕猴桃遗传转化体系的建立被引量：9: 2012年; 为建立猕猴桃基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕猴桃,选用米良一号叶片和茎为外植体,通过优化培养基,建立了适合转化的高效再生系统,通过农杆菌介导将ACC(1-氨基环丙烷-1-羧酸)氧化酶基因成功转化米良一号,构建了根癌农杆菌介导米良一号遗传转化体系。结果表明,TD培养基为合适的愈伤诱导培养基,诱导率达100%,愈伤经3次继代培养转入分化培养基,分化率为90%。共获得29株潮霉素抗性植株,随机挑选14株经PCR检测,其中10株检测到ACC氧化酶基因目的条带,阳性植株占71.4%。; 田宏现苑平王曼玲刘艺李菁夏新界谭晓风; 关键词：猕猴桃根癌农杆菌

红阳猕猴桃遗传转化体系的建立被引量：4: 2012年; 以红阳猕猴桃叶片和茎段为实验材料,通过优化培养基,建立了一个高效的红阳猕猴桃遗传转化体系,利用农杆菌介导转化法把猕猴桃ACO基因(ACC oxidase gene)的反义链导入红阳猕猴桃,共获得47株潮霉素抗性植株.随机挑选其中14株进行PCR鉴定,其中9株成功扩增到了目的条带,初步统计阳性植株为64.3%左右.此研究为利用分子遗传基因工程手段培育优质延熟保鲜的转基因猕猴桃新品种打下了基础.; 苑平田宏现刘艺王曼玲李菁夏新界谭晓风; 关键词：红阳猕猴桃农杆菌

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苑平