肖敏
- 作品数：26 被引量：110H指数：7
- 供职机构：解放军第306医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 传染性非典型肺炎患者T淋巴细胞核仁区嗜银蛋白测定的临床意义被引量：2
- 2004年
- 目的 研究外周血T淋巴细胞核仁区嗜银蛋白(AgNORs)染色对传染性非典型肺炎(SARS)的临床意义。方法 确诊SARS患者14例非SARS肺炎和正常对照各8例,抽取外周血,PHA刺激外周血T淋巴细胞培养,KL型肿瘤免疫图像分析系统分析AgNORs区面积与细胞核仁区的百分比(I.S％),计算活化T细胞的百分率。结果I.S％和活化率分别为:8名正常对照组为7.38％±0.75％和63.64％±11.65％,8例非SARS肺炎患者为8.98％±0.91％和57.14％±12.49％,14例SARS患者为4.13％±3.24％和10.64％±8.30％,出院后1个月随访患者5例为10.80％±0.33％和65.89％±12.13％。病情危重的患者活化细胞率为0,提示T细胞功能几乎完全丧失;处于恢复期的患者T细胞免疫功能仍未恢复到正常;治愈出院1月后随访患者的T细胞免疫功能恢复到高于正常水平。结论 AgNORs测定对SARS患者的诊断、病情监测、出院和康复评价有一定的指导意义。
- 敬华肖敏陈兴明李丹王玉珍曾柏轮王萍
- 关键词：传染性非典型肺炎预后
- EHECO157:H7紧密粘附素胞外特异性片段(intiminC)的表达纯化及免疫检测的初步应用被引量：2
- 2008年
- 目的:克隆表达并纯化肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7紧密粘附素胞外特异性片段(intiminC),摸索其免疫检测的初步应用。方法:设计引物采用PCR法自EHEC O157:H7基因组扩增紧密粘附素胞外特异性片段的编码基因eaeC,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-21a(+)-eaeC,经测序鉴定后转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,PAGE检测。目的蛋白经包涵体洗涤,使用含谷胱甘肽氧化还原系统的复性缓冲液进行稀释并结合透析复性后,再用阴离子交换柱Resource Q和分子筛柱Superdex200进行纯化。将所得高纯度目的蛋白包被ELISA酶标板,对实验动物的免疫血清进行检测。结果:PCR法自EHEC O157:H7基因组扩增出了约570 bp的目的片段;原核表达质粒pET-21a(+)-eaeC经酶切及测序鉴定与设计序列一致。转化E.coliBL21(DE3)后IPTG诱导目的蛋白表达率约35%;PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约20×103,破菌后电泳证实目的蛋白均以包涵体形式表达。包涵体复性后目的蛋白纯化效果明显,高纯度的intiminC蛋白包被ELISA板,对实验室动物免疫血清的检测效果良好。结论:EHEC O157:H7紧密粘附素胞外特异性片段经基因克隆后获得了较好的表达,复性纯化后获得高纯度的目的蛋白intiminC,在此基础上建立的ELISA检测方法对实验室动物免疫血清的检测效果良好。为进一步的人血清抗体检测及EHEC O157:H7感染的流行病学研究奠定了基础。
- 罗云易勇毛旭虎邹全明肖敏敬华
- 关键词：克隆表达免疫检测
- 不明原因传染性肺炎爆发流行26例病原学及免疫指标观察被引量：1
- 2006年
- 敬华李丹肖敏贾丽萍陈兴明高娇许丽艳刘春雷刘文成
- 关键词：病原学检测非典型肺炎免疫功能传染性
- 免疫比浊分析结合免疫磁分离技术在福氏志贺菌自动快速定量检测中的初步应用
- 背景：
志贺菌又称痢疾杆菌，能侵袭结肠上皮细胞，引起人类细菌性痢疾。按抗原结构和生化反应的不同可分为痢疾(Sh.dysenteriae)、福氏(Sh.flexneri)、鲍氏(Sh.boydii)和宋内氏(Sh...
- 肖敏
- 关键词：福氏志贺菌免疫磁珠金黄色葡萄球菌免疫比浊SPA病原菌
- 文献传递
- EHEC0157：H7紧密黏附素及突变体与受体Tir的结合特性研究
- 2012年
- 目的表达纯化肠出血性大肠杆菌（EHEC）0157：H7的紧密黏附素（intimin）及突变体intiminN916Y，并构建其转位紧密黏附素受体（translocatedint intin receptor，Tir）结合片段（intiminbinding domain，Tir-IBD），通过BIACore技术检测紧密黏附素及突变体intiminN916Y与Tit．IBD蛋白质相互作用特性的变化，探索特定氨基酸的突变对其黏附结合功能的影响。方法设计引物采用PCR法自EHEC0157：H7基因组扩增Tir—IBD的编码基因tir-~d，TA克隆后构建原核表达质粒pET-21a（＋）-tir—ibd，经测序鉴定后转化最coliBL21（DE3），IPTG诱导表达，PAGE检测。目的蛋白经Ni．NTA亲和纯化后，再用阴离子交换柱ResourceQ和分子筛柱Superdex200进行纯化。同时按包涵体复性后纯化的方案制备紧密黏附素及突变体intiminNgl6Y，将所得高纯度目的蛋白Tir-IBD适当稀释后耦联BIACore3000配套的NTA芯片，在25℃和37℃条件下分别以紧密黏附素及突变体intim．inN916Y作为流动相进行BIACore检测。结果EHEC0157：H7基因组扩增出了约270bp的目的片段；原核表达质粒pET-21a（＋）-tir-ibd经酶切及测序鉴定与设计序列一致。转化EcoliBL21（DE3）后IPTG诱导目的蛋白表达率约15％；PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量（肘，）约10x103，破菌后电泳证实目的蛋白为可溶表达。Ni-NTA亲和纯化和阴离子交换纯化效果明显，高纯度的Tir-IBD蛋白耦联NTA芯片，在25℃和37℃条件下对紧密黏附素及突变体intiminN916Y与＇Fir．IBD相互作用的BIACore检测结果显示，intiminN916Y特定氨基酸的突变对其结合能力有明显影响并呈温度依赖性。结论EHEC0157：H7的紧密黏附素、突变体intiminN916Y及Tir-IBD经基因克隆后获得了较好的表达，纯化后获得高纯度的目的蛋白。在此基础上建立了蛋白相互作用的BIACore检测体系，证明intiminN916Y特定氨基酸的突变对其结合能力有明显影响并
- 易勇肖敏罗萍樊峥贾莉萍魏平陈兴明李丹刘春雷高峰王贵华司少艳毛旭虎邹全明敬华
- 关键词：蛋白质相互作用
- 免疫磁分离及免疫比浊分析对福氏志贺菌的自动快速定量检测
- 目的：以SPA包被的磁珠和富含SPA的金黄色葡萄球菌分别与福氏志贺菌的多抗血清结合，制备福氏志贺菌特异的多抗磁珠和抗体致敏的金黄色葡萄球菌作为协同凝集试剂与免疫比浊试剂，利用免疫比浊分析探索其在福氏志贺菌自动快速定量检测...
- 肖敏邹全明易勇毛旭虎罗萍聂棱贾莉萍魏平王惠敬华
- 关键词：福氏志贺菌细菌感染免疫学检验
- 文献传递
- 铁调素等铁代谢指标和相关红细胞参数在缺铁性贫血诊断中的价值被引量：15
- 2019年
- 目的:探讨铁调素(Hdpcidin)、总铁结合力(TIBC)、血清铁(SF)等相关红细胞参数在缺铁性贫血(IDA)及慢性病贫血(ACD)中的诊断和鉴别诊断价值.方法:选取我院2017年01月~2017年12月100例于我院就诊的贫血患者的临床资料,依据患者贫血类型分为缺铁性贫血(IDA)组例和慢性病贫血(ACD)组,另纳入50例同期健康体检人群作为对照组;比较三组患者血清Hdpcidin、TIBC、SF、血红蛋白(Hb)、红细胞平均体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、网织红细胞百分比(RET)、未成熟网织红细胞比率(IFR)差异;探讨血清Hdpcidin、TIBC、SF对鉴别缺铁性贫血和慢性病贫血的诊断价值,分析血清Hdpcidin与血清TIBC和SF的相关性.结果:共纳入IDA组和ACD组患者各50例、同期健康体检患者50例.IDA组和ACD组患者SF、Hb、MCH、MCHC水平均显著低于对照组;ACD组患者SF、Hb、MCV、MCH、MCHC水平均显著高于IDA组,ACD 组患者MCV水平与对照组比较无统计学差异;IDA组和ACD组患者TIBC、RET、IFR水平均显著高于对照组;IDA组患者TIBC、RET低于ACD组, IFR水平高于ACD组;ACD组患者Hdpcidin水平均显著高于对照组和IDA组;ROC曲线分析显示:血清Hdpcidin在鉴别IDA与ACD的最佳阈值为91.1ng/mL,其敏感性为88.32%,特异性为86.51%;血清TIBC在鉴别IDA与ACD的最佳阈值为59.01μmol/L,其敏感性为74.12%,特异性为72.35%;血清SF在鉴别IDA与ACD的最佳阈值为8.84μmol/L,其敏感性为72.63%,特异性为71.28%;相关性分析显示:IDA组患者血清Hdpcidin与TIBC呈显著显著负相关关系,与SF呈显著正相关关系;ACD组患者血清Hdpcidin与TIBC呈显著显著正相关关系,与SF呈显著正相关关系.结论:铁调素在鉴别缺铁性贫血及慢性病性贫血的鉴别诊断价值优于总铁结合力和血清铁,血液学指标结合血清铁调素能够更加准确的诊断贫血类型,值得临床推广.
- 陈兴明肖敏高娇李丹邴岩魏平董瑾敬华
- 关键词：缺铁性贫血慢性病贫血铁调素
- 外科手术前后C-反应蛋白测定的临床分析被引量：1
- 2004年
- 目的 分析手术前后监测 C 反应蛋白(CRP)的临床价值。 方法 选择骨科住院手术的病人160例,分析手术前后CRP监测结果,并与病人体温、白细胞总数(WBC)、血沉(ESR)的相关性、预防应用抗生素的情况进行分析。CRP测定采用免疫浊度法,日立 7060 全自动生化分析仪检测。 结果 手术前CRP检测率为52 50%,CRP (12 21±13 79) mg/L;术前升高30例,占35 71%,CRP为(25 41±15 87 ) mg/L。手术后次日 CRP ( 65 45±16 67 ) mg/L, > 20 mg/L 的 79 例,占94 05%;术后3~4 d CRP (49 46±15 78) mg/L,>20 mg/L的68例,占79 07%;术后5~6 d CRP(29 13±15 30) mg/L,>20 mg/L的43例,占41 35%;术后7 d以后 CRP (25 09±13 23) mg/L,>20 mg/L的17例,占34 00%。CRP与体温相关系数为0 7717(P<0 01),CRP与WBC相关系数为0 5822(P<0 01),CRP与ESR相关系数为0 3058(P<0 05)。术前应用抗生素预防和治疗感染143例,占89 73%,术后应用抗生素 149 例,达 93 12%。 结论 CRP对手术的应激反应敏感,与临床表现吻合较好;术后CRP恢复较慢,70%的病例是在术后第 6 天才下降到 20 mg/L以下;CRP与体温、WBC的相关性密切,可以相互印证;CRP临床价值的利用不够充分。
- 敬华杨晋德易勇陈兴明肖敏海涌马华松
- 关键词：C-反应蛋白手术白细胞体温
- 鲍曼不动杆菌协同凝集试剂的制备及初步应用被引量：1
- 2010年
- 目的:以富含SPA的金黄色葡萄球菌与鲍曼不动杆菌的多抗血清结合,制备特异的协同凝集试剂,探索其在鲍曼不动杆菌快速检测中的初步应用。方法:鲍曼不动杆菌免疫日本大耳白兔制备多抗血清并经吸收处理。富含SPA的金黄色葡萄球菌(No 1800株)经甲醛灭活后,与该多抗血清结合,制备协同凝集试剂,用各种临床分离菌株尤其是其它种类的不动杆菌与自制的协同凝集试剂反应,对该试剂的特异性和准确性进行评价。对临床新分离菌株,以本法和生物梅里埃公司的API 20E生化鉴定板对比,并结合细菌药敏结果判定自制协同凝集试剂的快速诊断效果。结果:鲍曼不动杆菌免疫日本大耳白兔获得了高质量的多抗血清,特异性好,凝集效价达1:320;抗体致敏的金黄色葡萄球菌,作为协同凝集试剂,能与待测鲍曼不动杆菌产生明显的凝集现象,灵敏度较血清凝集试验高16倍,而对其它种类的不动杆菌以及其它种属的细菌均无凝集现象。与传统的生化鉴定相比,协同凝集试验可提前1～2天得到细菌鉴定结果,结果准确性良好。结论:以鲍曼不动杆菌的多抗血清致敏富含SPA的金黄色葡萄球菌作为协同凝集试剂,对鲍曼不动杆菌具有特异、灵敏、快速的检测效果,可以作为常规诊断方法的有益补充。
- 易勇贾莉萍肖敏陈兴明刘春雷魏平王惠李丹许丽艳吕芊芊敬华
- 关键词：鲍曼不动杆菌金黄色葡萄球菌免疫血清协同凝集试验
- 乙肝病毒标志物检验结果的评价分析被引量：7
- 2008年
- 敬华肖敏
- 关键词：乙肝病毒标志物乙肝病毒表面抗原HBV感染者肝硬化患者乙型肝炎患者酶联免疫法
