罗寿青
- 作品数:7 被引量:6H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 人可溶型巨噬细胞集落刺激因子受体(sM-CSFR)基因在大肠杆菌中的克隆、表达与生物学活性研究
- 罗寿青刘彦信
- 关键词:亮氨酸拉链
- 一种人FLT3配基同源异型蛋白在组织中的分布被引量:1
- 1999年
- 目的研究人FLT3配基膜外区缺失139bp的同源异型蛋白在组织中的分布特点。方法采用聚合酶链或逆转录聚合酶链反应法对FLT3配基在人肝脏、脑、骨髓、肌肉、肾脏、正常人外周血及4种白血病细胞系中的分布进行了研究,并利用DNA测序法鉴定PCR产物。结果除脑中未见FLT3配基表达外,在肝脏、肌肉、骨髓、肾脏、胎肝、正常人外周血细胞及白血病细胞系中均可检测到FLT3配基,而膜外区缺失139bp的FLT3配基同源异型蛋白只分布于骨髓、胎肝中。结论FLT3配基膜外区缺失139bp的同源异型蛋白分布于造血组织中,可能与造血调控有关。
- 李会良蔡英林许静李文平马正宇罗寿青郭亚林
- 关键词:FLT3配基造血组织
- 集落刺激因子-1受体介导的信号转导途径
- 1998年
- 集落刺激因子_1(CSF_1)主要在G1期调节细胞的极早期和迟早期反应 ,是细胞增殖、分化所必需的生长因子 .CSF_1与其受体 (CSF_1R)的结合导致后者的磷酸化从而激活其内部酪氨酸激酶的活性 ,激活的受体直接与细胞浆内的效应蛋白联系 ,诱导多条信号转导途径 .CSF_1可以通过Ras和Ets相关蛋白诱导c_myc基因的表达 ,也可以激活c_fos/jun家族基因的表达 ;CSF_1R激活STAT1和STAT3参与信号转导 ,但JAKs似乎不能在CSF_1R介导的信号传递中发挥作用 ;CSF_1R激活PI3_K ,PI3_K可通过一条独立于Ras/Raf的MAPKK相关途径作用于下游蛋白 ;CSF_1R可以使PC_PLC发挥增强信号传递的效应 .此外 ,CSF_1R还可介导信号传递的负调节 ,CSF_1R的自身转化 (turnover)及磷酸酶SHPTP1的脱磷酸化作用是信号传递负调节的主要机制 .
- 罗寿青郑德先
- 关键词:受体信号转导磷酸化CSF-1
- M-CSFR家族受体的配基结合区的研究进展
- 2000年
- 本文综述了M-CSFR家族受体M-CSFR、Kit、PDGFR等与其相应配基M-CSF、SCF及PDGF等相结合的区域的研究进展;讨论了该家族受体的二聚化区域;并提及K-受体的结合方法——Scatchard分析。
- 赵睿罗寿青郑德先
- rhM-CSFsR在大肠杆菌中的表达及其配基结合活性分析被引量:4
- 1999年
- 从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)胞外具有结合活性区域的cDNA,经平端连接将其克隆到原核表达载体pET-28a的His-Tag下游,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,重组的人可溶型M-CSFR(rhM-CSFsR)在宿主菌中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的38%.重组蛋白经Ni2+组氨酸结合树脂螯合层析柱纯化,获得了纯化的rhM-CSFsR,经SDS-PAGE显示为单一区带,其表观分子量为34kD.用酶联免疫吸附分析(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)证明rhM-CSFsR有明显的M-CSF专一结合活性,Kd值为7.8nmol/L,只有一个M-CSF结合位点.本实验结果显示原核表达的rhM-CSFsR具有明显的配基结合活性,提示M-CSFR的糖基化程度对于其配基结合活性不是必不可少的。
- 罗寿青郑德先饶青刘彦信马正宇吴克复
- 关键词:巨噬细胞集落刺激因子受体
- 巨噬细胞集落刺激因子受体的配基结合区的分析
- 2000年
- 从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR技术分别扩增巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)胞外区的 D1-3, D2-3和 D3功能区,并在大肠杆菌中成功地表达了各相应的重组蛋白.酶联免疫吸附分析(EIA)证明重组D1-3结合M-CSF的能力是重组D2-3的3倍,前者的Kd为 11 nmol/L,后者的为 39 nmol/L.而重组的 D3则完全没有结合能力.这些数据提示 D2-3是与其配基结合的主体位点,D1为其配基结合的辅助位点,可能对配基结合位点的刚性也有贡献.
- 罗寿青郑德先刘彦信饶青吴克复
- 关键词:巨噬细胞集落刺激因子受体结合活性M-CSF
- srhM-CSFR在昆虫细胞中的表达及其配基结合活性分析被引量:1
- 2000年
- 从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9.经过 2轮筛选 ,获得了纯化的重组病毒 ,再用重组病毒感染昆虫细胞 ,Western印迹检测证明 srh M- CSFR得到了表达 ,它是分泌到上清液中的糖基化蛋白 .Western印迹分析了不同时间点的 srh M- CSFR表达情况 ,结果表明 srh M- CSFR的表达在 96~ 1 2 0 h时达到最大 .srh M- CSFR的产量约为 1 mg/L,EIA法进行配基结合活性分析表明 ,srh M- CSFR与 M- CSF结合的解离常数为 5nmol/L.
- 罗寿青郑德先刘彦信李董饶青吴克复
- 关键词:杆状病毒表达系统配基