程国富
- 作品数：197 被引量：698H指数：14
- 供职机构：华中农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金湖北省科技攻关计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 单克隆抗体PAP法对实验感染雏鸭体内鸭肝炎病毒的定位检测被引量：8
- 1998年
- 本实验运用单克隆抗体PAP法，对实验感染鸭肝炎病毒雏鸭的组织切片进行染色观察，旨在动态研究病毒在雏鸭体的分布以及病毒与组织病变的关系。研究结果显示，感染后3小时，雏鸭心肌、肝、脾、胰、腿部肌肉、大脑等组织的细胞浆内均出现了PAP染色的特异棕黄色产物。除胰脏组织切片的PAP反应性在感染后168小时达到最高外，上述其他组织的最高PAP反应性均在感染后24小时；对同期的不同组织切片比较观察发现，肝、腺、胰外分泌腺、肾小管上皮细胞及腿部肌肉细胞的PAP反应性比心肌及大脑神经元细胞的PAP反应性强。由此表明，鸭肝炎病在感染后3小时达全身化，并主要侵害肝、脾、肾、胰及腿部肌肉，继而引起相应的变化。辣根过氧物酶-抗辣根过氧化酶法（PAP）是目前公认的高灵敏性、高特异性的免疫组织化学染色方法之五。有资料表明，该方法不仅可用于各种病原微生物、肿瘤性抗原及其他生物性抗原物质的定位检测，还可同时进行H．E或细胞核染色，对相关的组织细胞的结构进行观察，因而，PAP法被广泛用于病理学、细胞生物学等领域的研究。近年来随着各种抗原物质的单克隆抗体的生产，尤其是鼠源性PAP单抗试剂的推广应用，PAP法的特异性、灵敏性大大提高，应用范围越来越广。据此，本研究在建立雏鸭病毒性肝炎疾?
- 程国富周诗其熊道焕胡薛英
- 关键词：单克隆抗体PAP法外分泌腺细胞浸润
- 猪圆环病毒Ⅱ型抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2009年
- 建立了检测猪圆环病毒2型血清抗体的间接ELISA方法，并初步应用于临床血清样品的检测。用PCR方法从PCV2 HBZX株中获得截短的核衣壳（capsid，Cap）基因，将该基因克隆到原核表达载体pET-32a（＋）中，构建重组表达质粒pET-Cap，将该重组质粒转化宿主菌Ecoli BL21-CodonPlus（DE3），用IPTG诱导，SDS-PAGE和Western—blot鉴定蛋白的正确表达，表达蛋白Cap分子质量为42ku，可与6×HIS抗体反应；KCI预染切胶纯化目的蛋白，以其为抗原建立检测PCV2感染猪血清抗体的间接ELISA方法。ELISA检测5份血清样品结果变异系数均小于10％。用该方法分别检测湖北、河南等地的91份临床血清样品，阳性率为25％～100％。上述结果表明，所制备的目的蛋白具有较高的纯度和良好的免疫原性，所建立的间接ELISA检测抗体方法，具有良好的重复性，初步临床试用效果良好。
- 李坤温国元罗青平商雨艾地云罗玲王红琳杨峻邵华斌程国富
- 关键词：猪圆环病毒2型原核表达间接ELISA
- NO及NOS在Ⅰ型鸭肝炎病毒致雏鸭肝损伤机制中的作用被引量：4
- 2012年
- 人工感染4日龄雏鸭病毒性肝炎模型,探讨一氧化氮合酶(NOS)和NO在Ⅰ型鸭肝炎病毒感染后的肝脏中的动态变化及与肝损伤的关系。120羽4日龄雏鸭随机分为试验组和对照组,试验组腿部肌注Ⅰ型鸭肝炎病毒,对照组注射等量生理盐水。感染后动态观察肝脏的病变、测定肝组织内NOS活性和NO的浓度以及肝组织内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的分布规律。结果显示,病毒感染后,雏鸭肝功能和肝脏结构都受到不同程度的损害;NO对肝脏的损伤在感染后3d内持续增强,从4d开始逐渐减弱;iNOS主要存在于雏鸭的巨噬细胞中,其含量在感染早期上升,后期逐渐下降;肝组织内NOS活性及NO的浓度变化与免疫组化显示结果一致。结果表明,鸭肝炎病毒感染的雏鸭肝脏的损伤程度与NOS、NO浓度变化一致,提示NO在鸭肝炎病毒导致的雏鸭肝损伤中起重要作用。
- 谷长勤谢长清毕丁仁胡薛英张万坡程国富
- 关键词：肝损伤NOSNO
- 某猪场猪瘟强毒、弱毒抗体水平的检测被引量：4
- 2002年
- 应用猪瘟单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验方法,对河南某猪场47份母猪血清进行猪瘟抗体检测,有5份血清呈猪瘟强毒抗体阳性,阳性率为10.6％,猪瘟弱毒抗体阳性率为95.7％,其群体保护率为93％。在9份仔猪血清中,猪瘟强毒抗体为阴性,猪瘟弱毒抗体阳性率为22％,只有17％的群体保护率。检测结果表明:该猪场可能有猪瘟强毒感染。
- 李育林胡薛英程国富林自欣
- 关键词：猪瘟酶联免疫吸附试验抗体检测
- 禽白血病病毒p27蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2013年
- 以纯化的禽白血病病毒p27重组蛋白作为免疫原,按常规方法免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,通过细胞培养和有限稀释法制备单克隆抗体,最终获得了3株能稳定分泌禽白血病病毒p27蛋白单克隆抗体的细胞株2F3、5C2和5C7。经生物学特性分析,3株杂交瘤细胞染色体数均为90条左右,通过ELISA、Western blot和间接免疫荧光等方法对所获得的3株单克隆抗体进行了鉴定,证明3株单克隆抗体细胞株所分泌的抗体效价高,而且均能够和禽白血病病毒p27蛋白特异性发生反应。说明该3株单克隆抗体均具有与禽白血病病毒p27蛋白发生反应的反应原性。3株单克隆抗体的成功获得为禽白血病病毒抗原表位的分析,病毒的检测以及试剂盒的研发奠定了基础。
- 谢华丽邵华斌杨峻程国富胡薛英谷长勤张万坡罗青平
- 关键词：禽白血病病毒P27蛋白单克隆抗体
- J亚群禽白血病病毒gp85基因的原核表达及间接ELISA方法建立被引量：7
- 2014年
- 为建立检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体间接ELISA方法,本实验根据已发表的ALV-J gp85基因序列设计一对特异性引物,以该病毒cDNA为模板进行PCR扩增,将目的基因克隆于pET-28a(+)载体中,原核表达的重组蛋白约为38 ku,经western blot分析表明,重组蛋白gp85具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA抗体检测方法,该方法对其它相关的禽类病原无交叉反应,其组内和组间的变异系数均低于13%,具有良好的重复性。对458份临床血清样品进行检测,同时用IDEXX的同类ELISA抗体检测试剂盒进行对比,总符合率达到96.29%。本研究为ALV-J的流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。
- 刘丽娜邵华斌程国富杨峻张琳谢华丽栗绍文罗青平
- 关键词：J亚群禽白血病GP85基因蛋白表达酶联免疫吸附试验
- 肉鸭高效健康养殖与安全饲料生产的关键技术研究
- 彭健齐德生程国富张妮娅齐智利胡薛英陈伟谷长勤万海峰宋念华
- 该项目属于动物营养和饲料科学领域。该项目围绕我国肉鸭产业饲料资源高效利用、肉鸭营养需要和早期营养调控、饲料品质安全保障体系建设、肉鸭粪污氮、磷减排和肉鸭养殖模式研究、主要疫病的综合防制及新型饲料添加剂的研发中所面临的关键...
- 关键词：
- 关键词：肉鸭饲料添加剂饲养管理疫病防治
- 一例混血犬复杂型乳腺癌的病理学诊断
- 杂型乳腺癌(Carcinoma Complex-type)是犬乳腺肿瘤中的一类,对这类肿瘤的临床报道不多.本研究对临床疑似病例进行诊断,丰富了兽医肿瘤诊断的临床病理学资料,为犬的乳腺肿瘤的临床诊断提供依据.根据乳腺肿瘤组...
- 李梦玲胡斌姚娇冯贺龙程国富胡薛英
- 关键词：组织病理学免疫组织化学染色
- 一种针对鸡坏死性肠炎的融合蛋白疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种针对鸡坏死性肠炎的融合蛋白疫苗及其制备方法，该融合蛋白疫苗是将产气荚膜梭菌NetB毒素、α毒素的C末端以及C端截断的Tpel毒素通过接头片段“A(EAAAK)4A”进行串联，并在大肠杆菌<I>BL21（D...
- 谷长勤赵慧玲谢长清程国富刘晓丽胡薛英张万坡
- 新型鸭肝炎病毒实验感染雏鸭的组织病理学被引量：29
- 2002年
- 以“新型鸭肝炎病毒”实验感染雏鸭 ,对感染雏鸭的组织病理变化进行了观察。结果表明 ,接毒后 2 4～ 48h为感染鸭死亡高峰 ,试验发病的死亡率为 80 %;感染雏鸭肝、脾、胰、肾的组织病理变化分别表现为出血性、坏死性肝炎 ,坏死性脾炎 ,胰局灶性坏死及肾小叶的异嗜性粒细胞浸润。肝、肾组织的脂肪染色结果表明 ,肝脏有脂肪蓄积 ,而肾脏未见有脂肪蓄积。
- 胡薛英苏敬良程国富周诗其
- 关键词：新型鸭肝炎病毒组织病理学雏鸭
