秦红刚
- 作品数：7 被引量：13H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- RNA干扰抑制新城疫病毒复制的研究
- 新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科、副黏病毒亚科、禽腮腺炎病毒属,由其引发的新城疫(ND)是一种急性、高度接触性禽类传染病,被国际动物卫生组织列为A类动物传染病。ND的预防...
- 秦红刚
- 关键词：新城疫病毒RNA干扰SHRNA
- 文献传递
- SYBR Green Ⅰ荧光RT—PCR检测新城疫病毒的研究
- 2008年
- 司昌德秦红刚孟庆文闫丽辉刘加森韩凌霞姜骞曲连东
- 关键词：新城疫病毒PCR检测SYBR鸡传染性支气管炎鸡传染性喉气管炎
- 多靶点串联miRNA表达载体的构建及其抑制禽流感病毒复制
- 高致病性禽流感是我国严重危害养禽业发展的Ⅰ类烈性传染病,也已成为我国以至世界范围公共卫生事业的重要课题;由于其病毒高突变性和高度的宿主适应性,给利用药物和疫苗防控禽流感的策略带来巨大挑战.RNAi可以作为一种有效的工具用...
- 孟庆文刘丹李文超秦红刚曲连东
- 关键词：高致病性禽流感抗病毒治疗
- 文献传递
- 鸡Mx基因的表达及其抗血清的制备被引量：5
- 2009年
- Mx蛋白已被证明具有抗A型流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的生物活性。本研究通过PCR扩增,将Mx基因克隆至pMD18-T载体;经测序验证后将Mx基因克隆到原核表达载体pProExHTa和pcDNA3.1中。以构建的重组质粒pProExHTa-Mx转化大肠杆菌BL21,进行诱导表达,以切胶纯化方式回收了Mx融合蛋白,加佐剂乳化,免疫新西兰白兔制备抗血清;SDS-PAGE和western blot分析表明:Mx基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式稳定表达,表达产物的相对分子量约80 ku,与预期值相符;抗血清能与Mx蛋白发生特异性反应。以真核表达重组质粒pcDNA3.1-Mx转染293T细胞,间接免疫荧光试验结果表明:原核表达蛋白免疫动物制备的抗血清与真核表达的Mx蛋白发生良好的免疫反应,表明用原核表达的Mx蛋白具有真核表达Mx蛋白相似的免疫学活性。抗血清的制备为鸡Mx蛋白的功能研究、Mx蛋白在转基因动物机体中表达的检测奠定了基础。
- 谭复善李文超崔雷刘丹秦红刚孟庆文
- 关键词：MX基因原核表达抗血清
- 慢病毒介导的转基因鸡研究进展
- 近几年来,重组慢病毒介导的转基因鸡方法成功的报道,是转基因禽类方法学研究所取得的最显著的进展.本文就慢病毒载体介导的转基因鸡的研究进行论述.
- 孟庆文秦红刚曲连东
- 关键词：转基因慢病毒介导
- 文献传递
- 靶向PB2基因的特异性siRNA抑制禽流感病毒(AIV)复制被引量：3
- 2008年
- 根据siRNA设计原则,设计并合成5对靶向禽流感病毒(AIV)PB2基因的siRNA(PB2374,PB2665,PB2936,PB21031和PB21233),将其转染MDCK细胞,分别于转染前和转染后感染H5N1禽流感病毒A/Goose/Guang dong1/96株;在转染后24h、48h和72h分别收集上清液;通过血凝试验(HA)和Real-time PCR检测siRNA抑制AIV增殖的效果。血凝试验结果表明:所设计的5对siRNA中,PB2374抑制AIV增殖的效率为68%～71%,PB2963抑制AIV增殖效率为78%～81%;Real-time PCR检测到PB2374转染组PB2基因的转录水平与对照组比较降低3～3.3倍,PB2963转染组PB2基因的转录水平降低3.9～4.2倍。无论siRNA是先于还是迟于AIV感染,这两对siRNA都能明显地抑制AIV的增殖;本研究结果为开发抗AIV治疗制剂和动物机体抗AIV研究奠定了基础。
- 刘丹亓文宝孟庆文秦红刚李文超司昌德刘家森曲连东
- 关键词：AIMSIRNA
- 靶向新城疫病毒L基因(功能区)的siRNA抑制新城疫病毒的复制被引量：4
- 2008年
- 本研究以新城疫病毒(NDV)L蛋白的功能区(P1595、P2103和P3277酶活性中心结构区)序列为RNAi的靶位点,设计、构建了3个特异性的siRNA的真核表达质粒pSi-L6、pSi-L7和pSi-L9,转染到CEF细胞后接种NDV,间接免疫荧光实验结果显示:pSi-L6、pSi-L7和pSi-L9均能抑制NDV抗原蛋白的表达;Real-timePCR检测到转染pSi-L6、pSi-L7和pSi-L9的CEF细胞中L基因的转录水平分别降低79.1%、93.9%和91.3%,P基因的转录水平分别降低73%、86.3%和89.8%;病毒滴度测定表明转染pSi-L6、pSi-L7和pSi-L9质粒的细胞培养上清中病毒的滴度分别低2.19、3.16和5.24倍。本研究中3个特异性的siRNA均能抑制NDV的复制、增殖,表明P1595、P2103和P3277这3个区域对于L蛋白发挥RNA依赖的RNA聚合酶的功能具有重要作用。
- 秦红刚孟庆文刘丹李文超韩凌霞姜骞刘家森曲连东
- 关键词：NDVRNAI
