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植物染色体微切割过程中细胞质DNA污染及其控制的研究(英文)被引量：5: 2003年; 染色体微切割和微克隆已成为复杂基因组研究的有效途径 ,但是操作过程中的核外DNA的污染一直是令人担心的问题。通过研究植物染色体微切割 (微分离 )和微切割的染色体DNA扩增过程中细胞质DNA的污染问题 ,表明目前常用的植物染色体微切割过程中 ,细胞质DNA的污染几乎难以避免 ,并提出了一个改进的降低细胞质DNA污染的方法 ,对如何控制细胞质DNA的污染进行了详细的讨论。; 胡赞民王槐陈宇红石锐陈正华; 关键词：DNA扩增

一种快速分离目标染色体表达序列的方法: 本发明涉及一种分离目标染色体上表达序列的方法，其包含分离目标染色体；获得带有接头的目标染色体DNA；获得带有另一种接头的总细胞cDNA；将上述目标染色体DNA和总细胞cDNA进行同源杂交；进行抑制PCR扩增同源序列，获得...; 胡赞民姜淑梅石锐周若楠陈宇红胡军尹维波; 文献传递

定点整合抗虫基因到油菜叶绿体基因组并获得转基因植株被引量：26: 2002年; 以基因枪法进行了油菜叶绿体基因组的定点转化。载体 pNRAB携带抗壮观霉素的筛选标记基因aadA和抗虫基因cry1Aa10 ,基因的两侧被添加了可用于同源重组的叶绿体DNA序列。基因枪轰击过的油菜子叶柄经植株再生和壮观霉素筛选 ,获得了 36株抗性植株。PCR检测和Southern杂交显示 ,其中 4株的叶绿体基因组已被转化 ,外源基因已被定点整合进叶绿体基因组的rps7和ndhB基因之间。用转基因植株的叶片饲喂二龄小菜蛾 ,1周后幼虫死亡率达33%～ 47% ,存活幼虫的生长明显减慢。; 侯丙凯胡赞民党本元石锐陈正华; 关键词：抗虫基因油菜叶绿体基因组转基因植株

杨树叶绿体3′rps12基因,rps7基因和ndhB基因片段的克隆及序列分析被引量：7: 2001年; 通过烟草叶绿体相关序列设计引物 ,从杨树的叶绿体基因组中克隆出 2个相邻的DNA片段 .经分析发现 ,这 2个DNA片段包含核糖体蛋白 3′rps12、rps7基因和NADH脱氢酶第二亚基ndhB基因片段 .利用DNAMAN等软件 ,将扩增到的杨树叶绿体DNA片段与烟草、拟南芥、玉米和黑松的相关序列进行比较 ,证实所扩增的片段具有较高的保守性 ,尤其是在这 3个基因的编码区 ,同源性均在 90 %以上 .插入或缺失常发生在基因间隔区 ,同源性在 80 %左右 ;对其编码区所推导的氨基酸序列进行了比较 ,同源性均在 92 %以上 .首次克隆了杨树叶绿体的部分DNA序列 ,详细报道并分析了杨树 3′rps12、rps7基因和ndhB基因片段及其边界序列信息 .所报告的基因序列均已登录GenBank .; 周奕华侯丙凯石东乔肖宇红石锐胡赞民陈正华; 关键词：杨树叶绿体基因克隆

柚（Citrus grandis Osbeck）单染色体微克隆文库的构建: 采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离到柚（C.grandis Osbeck）的单染色体。将分离到的柚单条染色体去蛋白,用Sau3AI酶切,并在染色体DNA片段两端加上Sau3AI人工接头,进行两轮PCR扩增后,得...; 黄代青周奕华石锐胡赞民吕柳新; 关键词：单染色体微分离微克隆; 文献传递

小麦6B染色体微切割及其不同片段的DNA文库构建被引量：1: 2004年; 用Nd：YAG激光微束将处于有丝分裂中期的小麦(Triticum aestivum L．)6B染色体微切割为四段，并用微细玻璃针将每个片段分别回收。将分离的染色体片段DNA和Sau3A接头介导的多聚酶链式反应(LA-PCR)分别扩增。Southern杂交证明4个特定区域的DNA确实来自于小麦基因组。用一系列(42对引物)位于6B染色体和其他染色体上的微卫星序列对微切割的染色体片段的PCR产物进行了验证。结果表明，获得的染色体片段的PCR产物来自于小麦6B染色体。将6B染色体4个片段的第二轮PCR产物克隆到pGEMT-vector中，建立了4个染色体特定区域的基因组文库，命名为R1、R2、R3和R4，分别包含2．1×10^5、2．74×10^5、2．45×10^5和2．93×10^5个重组子克隆。每个文库均随机挑选150个克隆进行质粒的小量制备和酶切验证。结果显示：插入片段大小在300～l800bp之间，平均大小为820-870bp，其中43％-48％的克隆为低／单拷贝序列，42％-47％为中／高拷贝序列。本研究为详细分析植物单染色体的不同片段的分子遗传学研究提供了基础。; 胡赞民王槐石锐党本元胡军尹维波陈宇红姜淑梅陈正华; 关键词：小麦

一种向莴苣叶绿体中导入外源DNA的方法以及用于该方法的莴苣叶绿体DNA片段: 本发明提供了一种向莴苣叶绿体中导入外源DNA的方法，包括：利用SEQ ID NO：2所示序列或者包括SEQ ID NO：2所示序列3’端的不小于1kb的片段、SEQ ID NO：3所示序列或者包括SEQ ID NO：3所...; 胡赞民石锐杨晨敏陈正华; 文献传递

一种向莴苣叶绿体中导入外源DNA的方法以及用于该方法的莴苣叶绿体DNA片段: 本发明提供了一种向莴苣叶绿体中导入外源DNA的方法，包括：利用SEQ ID NO：2所示序列或者包括SEQ ID NO：2所示序列3’端的不小于1kb的片段、SEQ ID NO：3所示序列或者包括SEQ ID NO：3所...; 胡赞民石锐杨晨敏陈正华; 文献传递

毛白杨叶绿体ATP合酶 β亚基基因序列(英文)被引量：2: 2002年; 尹维波张发云石锐杨晨敏胡赞民; 关键词：毛白杨叶绿体 ATP合酶 Β亚基基因序列

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石锐