王鹤
- 作品数：7 被引量：27H指数：4
- 供职机构：南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- microRNA-224通过调节Bim影响人非小细胞肺癌的增殖与凋亡被引量：3
- 2016年
- 目的:研究microRNA-224(miR-224)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及对NSCLC细胞增殖能力和凋亡的影响。方法:采用荧光实时定量PCR(q PCR)检测20对NSCLC组织与癌旁组织中miR-224的表达量,以及miR-224在NSCLC细胞A549与正常肺支气管上皮细胞中的表达量,并计算差值;转染anti-miR-224至A549细胞,q PCR检测anti-miR-224的转染效率;四甲基偶氮唑盐(MTT)实验及克隆形成实验检测miR-224对A549细胞增殖能力的影响,流式细胞技术检测细胞周期及凋亡;荧光素酶报告实验证实miR-224与靶基因Bim的结合;q PCR及Western blot检测转染anti-miR-224后A549细胞中Bim的表达量。结果:与癌旁正常组织相比,miR-224在NSCLC组织及细胞中均显著高表达(P<0.05);抑制miR-224能够显著抑制A549细胞的增殖能力并促进凋亡,并促进了Bim的表达。结论:miR-224在NSCLC中呈高表达,miR-224能够通过调控Bim抑制A549细胞的增殖能力并诱导凋亡。
- 魏晨晨姜黎黎陈沁楠王鹤王朝霞
- 关键词：非小细胞肺癌增殖凋亡
- miRNA-192对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响被引量：7
- 2014年
- 目的探讨抑制microRNA-192(miR-192)在非小细胞肺癌A549/DDP细胞对顺铂(DDP)耐药性方面的影响及可能机制。方法通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测人肺腺癌耐DDP细胞株A549/DDP及其亲本细胞株A549细胞中miR-192的表达水平,A549/DDP细胞转染miR-192抑制剂(inhibitor)和miR-阴性对照(NC)48h后采用qRT-PCR检测转染效率,分别采用MTT法、克隆形成实验及流式细胞术检测转染48h后A549/DDP细胞对DDP的药物敏感性、细胞增殖能力及细胞凋亡变化,Western blotting检测转染48h后细胞中Bax和Bcl-2的表达变化。结果 miR-192在A549/DDP细胞中的表达水平高于A549细胞(P<0.05);转染miR-192 inhibitor 48h后的A549/DDP细胞miR-192水平低于转染miR-NC者(P<0.05);转染miR-192 inhibitor后,A549/DDP细胞的增殖能力减弱、凋亡细胞增多、DDP对其半数抑制浓度降低、Bax蛋白水平升高和Bcl-2蛋白水平下降,与转染miR-NC者比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制miR-192能够降低A549/DDP细胞对DDP的耐药性,其作用机制可能是通过增加细胞凋亡以及下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白表达来实现的。
- 杨育才刘晶万里刘凤珍王鹤王朝霞
- 关键词：非小细胞肺癌顺铂耐药性
- microRNA-335对人非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的影响被引量：10
- 2012年
- 目的:研究microRNA-335(miR-335)在非小细胞肺癌中的表达及其对细胞迁移、侵袭能力与增殖能力的影响。方法:采用荧光实时定量PCR检测miR-335在12对非小细胞肺癌与癌旁正常组织中的表达差异,以及miR-335在非小细胞肺癌SPCA-1细胞与肺正常上皮细胞16HBE中的表达差异;应用Lipofectamine 2000瞬时转染anti-miR-335下调SPCA-1细胞中miR-335的表达,并通过荧光实时定量PCR验证;划痕实验检测miR-335对SPCA-1细胞迁移能力的影响;Transwell侵袭实验检测miR-335对SPCA-1细胞侵袭能力的影响;MTT实验及克隆形成实验检测miR-335对SPCA-1细胞增殖能力的影响。结果:与癌旁正常组织比较,miR-335在非小细胞肺癌组织中显著高表达(P<0.05);与16HBE细胞比较,miR-335在SPCA-1细胞中显著高表达(P<0.05);利用Lipofectamine 2000瞬时转染anti-miR-335入SPCA-1细胞24 h时miR-335表达明显减弱(P<0.01);抑制miR-335表达对SPCA-1细胞迁移和侵袭能力有显著的抑制作用,抑制率分别为(42.8±2.7)%(P<0.01)及(73.25±4.4)%(P<0.01);抑制miR-335表达对SPCA-1细胞的增殖能力无明显影响。结论:miR-335在非小细胞肺癌中呈高表达,miR-335低表达能显著抑制SPCA-1细胞的迁移和侵袭能力,但对SPCA-1细胞的增殖能力无明显影响。
- 王鹤刘志利德伟王朝霞
- 关键词：非小细胞肺癌迁移增殖
- miRNA-451逆转非小细胞肺癌A549/DDP细胞对顺铂的耐药性及其机制研究被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨microRNA-451(miR-451)逆转非小细胞肺癌A549/DDP细胞对顺铂的耐药性及其可能的作用机制。方法:应用实时荧光定量PCR法(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)检测耐DDP细胞株A549/DDP及其亲本细胞株A549中miR-451的表达差异,同时检测A549/DDP细胞转染miR-451 mimic后miR-451表达的变化;分别应用MTT法、克隆形成实验、流式细胞术检测转染后A549/DDP细胞对DDP药物敏感度,细胞增殖能力,联合DDP处理后细胞凋亡变化;Western印迹法检测转染后A549/DDP细胞Akt、p-Akt(Ser473)、bcl-2和bax的表达变化。结果:miR-451在耐DDP细胞株A549/DDP中的表达量显著低于敏感细胞株A549(P<0.05),A549/DDP细胞转染miR-451 mimic 24 h后,细胞中miR-451的表达水平较对照组明显提高(P<0.05)。在A549/DDP细胞中过表达miR-451可产生以下效应:相较于对照组,DDP对A549/DDP/miR-451细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)减低(P<0.05),A549/DDP/miR-451细胞的增殖能力减弱,A549/DDP/miR-451经过DDP处理后细胞凋亡增多(P<0.05)。Western印迹法结果显示,与对照组比较,转染miR-451 mimic的A549/DDP细胞p-Akt(Ser473)、bcl-2表达水平降低;bax表达水平升高。结论:miR-451可能通过诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖,上调bax蛋白及下调p-Akt(Ser473)、bcl-2蛋白表达而逆转A549/DDP细胞对DDP的耐药性。
- 王鹤边海波德伟王朝霞
- 关键词：非小细胞肺癌耐药性
- miR-194对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨microRNA-194(miR-194)对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响及其可能的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测非小细胞肺癌耐药细胞A549/DDP及其亲本细胞株A549中miR-194的表达差异,并在A549/DDP细胞中转染miR-194-inhibitor后检测miR-194的表达变化;应用MTT法、克隆形成实验、流式细胞术检测转染后A549/DDP细胞对DDP的敏感性、细胞增殖能力及凋亡变化;Western blot检测转染后A549/DDP细胞中Bax和Bcl-2的表达变化。结果:miR-194在耐药细胞A549/DDP中的表达量显著高于其亲本细胞株A549(P<0.05),A549/DDP在转染miR-194-inhibitor 24 h后miR-194的表达水平较对照组显著下降(P<0.05)。抑制miR-194表达后,相对于对照组,DDP对转染miR-194-inhibitor的A549/DDP细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)减低(P<0.05),转染miR-194-inhibitor的A549/DDP细胞增殖能力减弱,经DDP处理后凋亡细胞增多(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,转染miR-194-inhibitor的A549/DDP细胞Bax表达水平升高,Bcl-2表达水平降低。结论:miR-194可能通过抑制细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白及下调Bax蛋白表达而增加A549/DDP细胞对DDP的耐药性,抑制miR-194的表达可逆转A549/DDP细胞的耐药性。
- 徐江浩刘晶王鹤万里杨育才王朝霞
- 关键词：非小细胞肺癌耐药性
- MicroRNA在肺癌诊断和治疗方面的研究进展被引量：2
- 2011年
- MicroRNA(miRNA)是一类长21～25个核苷酸的小分子非编码RNA,通过与特定mRNA 3'UTR结合抑制蛋白质表达参与生物的发育、代谢及肿瘤的发生、发展等生命现象。近年来,越来越多的研究显示miRNA与肺癌的诊断、治疗关系密切,可作为肺癌早期诊断的生物标志物,还可能成为肺癌靶向治疗的有效靶点。本文结合国内外最新报道,综述miRNA在肺癌诊断、治疗方面的研究进展。
- 王鹤王朝霞
- 关键词：MIRNA肺癌靶向治疗
- miR-192对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响
- 王朝霞杨育才刘晶万里刘凤珍王鹤
